国家自然科学基金(30380060)
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
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- 相关机构：宁夏大学宁夏医学院大连大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- C型产气荚膜梭菌重组菌株BL21(DE_3)pXETAB_2B_1表达条件的优化被引量：2
- 2007年
- 目的优化C型产气荚膜梭菌重组菌株BL21(DE3)pXETAB2B1融合蛋白表达的条件。方法以IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)为诱导剂,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳比较pH值、培养温度、诱导时间、菌体生长密度等因素对重组α-β2-β1融合蛋白表达进行表达条件的影响。结果C型产气荚膜梭菌重组菌株BL21(DE3)pXETAB2B1的表达优化条件是:最适培养基pH值是7.5,最适诱导时间是5小时,最适表达温度是37℃,最适菌体生长密度是OD6001.0,IPTG最适诱导浓度是0.4 mmol/L。结论获得C型产气荚膜梭菌重组菌株BL21(DE3)pXETAB2B1融合蛋白的最佳表达条件。
- 韩学波曾瑾王玉炯
- 关键词：C型产气荚膜梭菌融合基因
- C型产气荚膜梭菌保护性抗原的免疫原性被引量：10
- 2008年
- 目的研究C型产气荚膜梭菌α-β2-β1融合基因重组工程菌BL21(DE3)/pXETAB2B1抗原的免疫原性。方法在对重组工程菌BL21(DE3)/pXETAB2B1进行优化表达的基础上,制备包涵体粗提物、全细胞培养物及全细胞乳糖诱导培养物3种抗原,对ICR小鼠进行攻毒保护试验。结果重组工程菌BL21(DE3)/pXETAB2B1能够表达α-β2-β1融合蛋白,该融合蛋白能够有效刺激免疫小鼠产生特异性抗体,达到保护的目的。结论已获得具有一定免疫原性的重组工程菌,可作为预防产气荚膜梭菌所引起疾病的候选菌株。
- 韩学波曾瑾王玉炯蔡琴
- 关键词：产气荚膜梭菌保护性抗原融合蛋白免疫原性
- 产气荚膜梭菌α-β_2-β_1融合基因的构建及表达被引量：6
- 2006年
- 目的构建产气荚膜梭菌α-β2-β1融合蛋白基因表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法利用PCR技术,从含α毒素基因的质粒pXCPA02中扩增出α毒素基因,经NcoⅠ酶切,回收0·95kb的α基因片段,再与经NcoⅠ酶切并含融合基因β1-β2的质粒pXETB1B2连接,获得重组质粒pXETAB2B1,经NcoⅠ、BamHⅠ和EcoRⅠ酶切鉴定,并对其表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果重组质粒pXETAB2B1含有α-β2-β1融合基因。表达产物相对分子质量约为95000,并可被特异性抗体识别。结论已获得高效表达α-β2-β1的重组菌株。
- 韩学波许崇波曾瑾王玉炯
- 关键词：产气荚膜梭菌毒素融合基因
- C型产气荚膜梭菌病单价和二价混合灭活苗与三价灭活苗免疫效力比较
- 2011年
- 为了比较C型产气荚膜梭菌病单价和二价混合灭活苗与三价灭活苗的免疫效力,试验制备了单价和二价混合灭活苗与三价灭活苗,并接种奶牛及ICR小鼠,分别进行静脉采血,观察抗血清中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2毒素粗提物的情况。结果表明:制备的抗血清可以中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2的剂量为1LD100,ICR小鼠血清毒素中和保护率均达到100%,奶牛血清毒素中和保护率分别为40%和60%。说明三价灭活苗的奶牛血清中和效果比单价和二价混合菌株灭活苗高20%。
- 韩学波韩生银曾瑾谢琴王玉炯
- C型产气荚膜梭菌α-β_2-β_1融合蛋白的免疫原性研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究含α-β2-β1融合基因的重组菌株BL21(DE3)(pXETAB2B1)的免疫原性。方法用重组菌株BL21(DE3)(pXETAB2B1)制备包涵体和全细胞培养物两种抗原,采用氢氧化铝胶体作为免疫佐剂,免疫ICR小白鼠,用C型产气荚膜梭菌外毒素粗提物进行攻毒,观察小鼠的保护情况。结果包涵体加氢氧化铝凝胶制备的抗原保护效果对于1LD100和2LD100的攻毒均达到100%;全细胞培养物加氢氧化铝凝胶制备的抗原保护效果对于1LD100和2LD100的攻毒达到50%和20%。结论已获得具有一定免疫原性重组菌株,可作为预防C型产气荚膜梭菌所致疾病的候选菌株。
- 韩学波于欣廖国玲谢琴曾瑾王玉炯
- 关键词：C型产气荚膜梭菌融合蛋白免疫保护
- C型产气荚膜梭菌BL21(DE3)pXETAB2B1三价灭活苗的免疫效力试验
- 2008年
- 目的研究C型产气荚膜梭菌BL21(DE3)(pXETAB2B1)三价灭活苗的免疫效力。方法制备C型产气荚膜梭菌BL21(DE3)(pXETAB2B1)三价灭活苗,免疫接种奶牛及ICR小鼠,分别进行静脉采血,观察抗血清中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2毒素粗提物的情况。结果奶牛抗血清中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2毒素粗提物达到60%;ICR小鼠抗血清中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2毒素粗提物达到100%。结论C型产气荚膜梭菌BL21(DE3)(pXETAB2B1)三价灭活苗能中和C型产气荚膜梭菌强毒株C59-2毒素粗提物。
- 韩学波廖国玲于欣曾瑾王玉炯谢琴
- 关键词：产气荚膜梭菌
