国家自然科学基金(30371537)
- 作品数：17 被引量：76H指数：5
- 相关作者：杨丕山李纾潘克清葛少华谢瑞阅更多>>
- 相关机构：山东大学上海第二医科大学附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠牙胚裸鼠体内移植的形态学观察被引量：3
- 2006年
- 目的:观察小鼠牙胚裸鼠体内移植后的形态学变化。方法:将出生后5天的小鼠的下颌第一磨牙牙胚异位移植到成年裸鼠背部肌层中,在移植后第7天和第14天分别取出植入的牙胚,常规制片,HE染色,显微镜下观察。另取出生后12天和19天的小鼠各1只,常规制片,HE染色,作移植后不同时间的对照。结果:肉眼观察发现,移植后牙胚生长于肌浅层,组织相容性好,表面有丰富的毛细血管;组织学观察表明:移植后的牙胚可继续发育,但比正常发育的牙胚速度减慢。牙本质层较薄,移植后形成大量牙本质小管、排列不规则的牙本质。虽然上皮根鞘位置变化不明显,但牙根可继续根向延伸。髓室底形成,髓腔缩小,根部钙化程度明显增强。移植后第7天,牙胚内外均有炎细胞浸润;但移植后第14天的牙胚,均未见明显的炎症现象。结论:小鼠牙胚裸鼠肌浅层移植后有一定的发育趋势,可以短期用于牙根发育的研究。
- 谢瑞阅杨丕山李纾
- 关键词：小鼠牙胚裸鼠发育
- 矿化期小鼠牙胚中矿化相关因子的表达被引量：3
- 2006年
- 目的:研究核心结合因子α1(corebindingfactoralpha1,Cbfα1)、骨桥素(osteopontin,OPN)、骨唾蛋白(bonesialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OC)和碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)等调控矿化的相关因子在矿化期小鼠牙胚中的分布特点,探讨其在矿化期牙胚中的作用。方法:取出生后第5、7天的BALB/c小鼠30只,拉颈处死,分离解剖含下颌第一磨牙区的下颌骨,新鲜配制4%多聚甲醛固定过夜,常规石蜡包埋,近远中向5μm连续切片,采用免疫组化SABC法检测Cbfα1、OPN、BSP、ALP和OC等矿化相关因子在BALB/c小鼠矿化期牙胚中的表达及特点。结果:牙槽骨中可见Cbfα1、OPN和BSP表达;前期牙本质中有Cbfα1、ALP和OC表达;其余组织如牙囊细胞、牙髓细胞、中间层细胞、星网状层细胞、成牙本质细胞中仅见ALP和OC表达,且ALP在中间层细胞和牙髓细胞中呈强阳性表达;但在牙本质中均无表达。结论:牙发育相关的各硬组织,其形成的调控机制不同,分别由不同的矿化因子调控。Cbfα1、ALP和OC与牙本质的早期形成密切相关;Cbfα1、OPN和BSP参与牙槽骨的早期形成;ALP与中间层细胞的关系密切。这些因子对矿化的启动有重要作用。
- 潘克清杨丕山李纾
- 关键词：矿化免疫组织化学牙胚
- 小鼠牙囊细胞的体外分离培养鉴定及异质性研究被引量：23
- 2004年
- 目的:建立小鼠牙囊细胞体外分离培养的方法,并对其起源进行鉴定,同时检测其生物学特性。方法:用1%的胰蛋白酶消化分离7天龄Balb/c小乳鼠的下颌第一磨牙牙胚的牙囊组织进行体外培养,波形蛋白和角蛋白鉴定细胞起源,HE染色观察细胞的形态,Gomori改良钙钴法进行细胞的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALPase)染色,免疫组化法检测细胞Ⅰ型胶原和骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达。结果:分离培养的细胞具有多形性,现有3种基本的细胞类型:立方形或多角形;长梭形;非常细长的细胞形状,前2种细胞胞核内有2～4个清晰的核仁,胞质内有大量颗粒,且有大量的线状伪足。波形蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,ALPase染色显示72.7%的牙囊细胞内的AL鄄Pase呈强阳性;免疫组化染色显示48.8%的牙囊细胞Ⅰ型胶原及8.75%的牙囊细胞的OCN表达阳性。结论:所培养的牙囊细胞源自间充质,含有多种细胞表型,具有异质性。
- 葛少华李德懿杨丕山
- 关键词：牙囊细胞培养碱性磷酸酶骨钙素
- 核心结合因子a1、骨形成蛋白及骨桥素在小鼠牙周组织发育中的免疫组化定位研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨核心结合因子a1、骨形成蛋白和骨桥素3者在小鼠牙周组织发育过程中的时间和空间分布特点、表达意义及它们之间的相互作用。方法用SABC免疫组化法检测3者在出生后不同时期小鼠牙周组织发育中的表达及特点。结果牙齿发育早期,仅骨形成蛋白在牙囊细胞中表达;当牙根开始发育后,3者皆在牙周膜细胞、成牙骨质细胞中表达,但骨形成蛋白在无细胞牙骨质和细胞牙骨质中皆不表达,核心结合因子a1在细胞牙骨质中表达,而骨桥素则在无细胞牙骨质、细胞牙骨质和牙槽骨表面皆呈强阳性表达。结论核心结合因子a1、骨形成蛋白、骨桥素3者皆参与牙周组织的发育,对矿化和生长发育发挥重要作用。
- 杨丕山潘克清李纾姜波
- 关键词：核心结合因子A1骨形成蛋白骨桥素
- 苯妥英钠对人牙周膜成纤维细胞生物学活性影响的实验研究被引量：14
- 2008年
- 目的研究苯妥英钠(PHT)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)生物学功能的影响,并探讨其用于促进牙周组织再生的可能性。方法将不同质量浓度的PHT(1、5、20、100、500、2500mg/L)加入体外培养的第4代hPDLF,检测其对细胞增殖活性、蛋白合成、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;Von Kossa染色法检测PHT(20、100、500mg/L)对第4代hPDLF矿化结节形成能力的影响;应用ELISA法测定PHT(20、100mg/L)对第3代hPDLF中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。结果在20、100mg/L的质量浓度时,PHT可显著促进hPDLF的增殖及分化(P<0.01);在质量浓度100mg/L时,PHT可增强hPDLF的蛋白合成(P<0.05);同时,PHT在质量浓度100mg/L可显著促进hPDLF的矿化能力及BMP-2的表达(P<0.01)。但高质量浓度(2500mg/L)的PHT则严重抑制细胞的生物学活性。结论适当质量浓度的PHT对hPDLF的增殖和分化有促进作用,但过高质量浓度的PHT具有细胞毒性,不利于牙周组织的修复和再生。
- 于美娇杨丕山葛少华
- 关键词：苯妥英钠牙周膜成纤维细胞细胞培养矿化
- 小鼠磨牙上皮根鞘与牙骨质发育的关系被引量：6
- 2007年
- 目的:研究上皮根鞘细胞(Hertwig's epithelial root sheath,HERS)的发生,非胶原基质蛋白骨桥素(osteopontin,OPN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)及牙骨质发育之间的关系。方法:取出生后5d、9d、15d、19d及4个月的BALB/c小鼠共18只,光镜观察上皮根鞘的发生、牙骨质发育过程,透射电镜观察该阶段上皮根鞘细胞的超微结构。PV免疫组化两步法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、OPN、BSP在牙骨质形成过程中的表达。结果:超微结构观察发现,内、外釉上皮在融合过程中,2层细胞间包含个别具有丰富细胞器的一类细胞,其胞质中可见大量的高尔基复合体和粗面内质网,通过桥粒与内、外釉上皮连接。免疫组化显示,新形成上皮根鞘细胞呈OPN阳性表达,但未见BSP阳性表达。在牙根的发育过程中,牙本质-牙骨质交界处OPN有较高表达,伴随牙骨质基质在根面不断沉积,OPN在牙骨质中表达增强,成熟牙根表面可见厚度不同的牙骨质覆盖,OPN阳性表达。结论:上皮根鞘发生时,内、外釉上皮间可包容个别源于网状层或中间层、细胞器丰富的细胞,从而形成类似成釉器的结构。其可能在牙根发育起始阶段分泌某些蛋白和信号分子,启动根部牙本质和牙骨质的形成。
- 于西佼李纾杨丕山肖长杰于兰刘宗霞
- 关键词：上皮根鞘骨基质蛋白透射电镜
- 牙囊在牙根发育中作用的实验研究被引量：9
- 2006年
- 目的研究牙囊在牙根发育中的作用。方法8只出生5d的Balb/c小鼠随机分为含牙囊组和去除牙囊组,取其双侧下颌第一磨牙牙胚分别异位移植到Balb/c成年裸鼠背部肌层中,移植后第7天和第14天分别取出植入的牙胚,常规制片,苏木精-伊红染色,观察牙胚发育情况。另取1只出生5d的Balb/c小鼠的下颌第一磨牙牙胚作为对照。结果肉眼观察发现移植后牙胚生长于肌肉浅层,组织相容性好,表面有丰富的毛细血管。组织学观察表明:移植后的两组牙胚牙冠均可部分继续发育并矿化,但含牙囊组牙胚比去除牙囊组发育更快,体积较大,钙化程度较高。虽然两组牙胚上皮根鞘根向延伸均不明显,但含牙囊组牙根有一定程度的发育,牙齿有根向生长的趋势,而去除牙囊组牙齿未见根向生长的趋势。移植后第7天两组牙胚均出现炎症反应,到移植后第14天则均未见明显的炎症。结论牙囊在牙齿发育特别是牙根的形成中起重要作用,能够引导牙根向正常方向生长并形成牙根。
- 谢瑞阅杨丕山李纾
- 关键词：牙胚牙囊发育
- Runt相关基因2/核心结合因子a1在小鼠牙周组织发育中的免疫组化定位研究被引量：5
- 2005年
- 目的探讨Runt相关基因2/核心结合因子a1(Runx2/Cbfa1)在小鼠牙周组织发育过程中的时空表达及意义。方法建立BALB/c小鼠牙周发育动物模型,采用免疫组化方法检测Runx2/Cbfa1在小鼠出生后各期牙周组织发育中的表达及特点。结果Runx2/Cbfa1在牙齿发育过程中的表达具有时空特异性,在牙根开始发育之前,仅在牙槽骨及成骨细胞中表达;当牙根开始发育即从第11天以后各期,在根部牙周膜细胞、成牙骨质细胞及成骨细胞中均呈阳性表达,但牙槽骨呈阴性表达。结论Runx2/Cbfa1在成牙骨质细胞及成骨细胞的分化及牙植骨的形成具有重要作用,可能在牙周组织的发育中发挥作用。
- 潘克清杨丕山李纾戚向敏
- 关键词：免疫组化牙周组织发育
- 富含亮氨酸的间质蛋白多糖在小鼠牙周组织发育中的组织学定位被引量：2
- 2005年
- 目的研究富含亮氨酸的蛋白多糖类物质纤维调节素(FMN)、核心蛋白聚糖(DCN)及双糖链蛋白聚糖(BGN)在小鼠牙周组织不同发育时期的分布特点,探讨其在牙周组织发育中的作用。方法取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死,解剖并分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,新鲜配制4%多聚甲醛固定24h,甲酸-甲酸钠复合脱钙液脱钙1～3周,常规石蜡包埋,近远中向5μm连续切片。免疫组织化学Power VisionTM二步法,观察各发育时期第一磨牙牙周组织中3种间质蛋白多糖的组织学分布特点。结果FMN在牙龈结缔组织和牙周膜中呈强阳性表达,且在牙周膜与牙骨质及牙槽骨界面有较强表达;DCN强阳性表达于牙龈结缔组织、靠近牙槽骨面的牙周膜及牙槽骨表面的成骨细胞中;BGN则在各期牙龈结缔组织及牙周膜中表达,在牙槽骨表面及成骨细胞中为阴性。结论FMN可能与DCN及BGN相互作用,调节牙龈结缔组织及牙周膜胶原纤维的网络形成,并可能参与牙槽骨和牙骨质的矿化过程。
- 李纾杨丕山潘克清谢瑞阅段学静
- 关键词：蛋白聚糖类牙周组织牙胚
- 1,25-(OH)_2 VitD_3对小鼠牙囊细胞分化的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨1,25-(OH)2Vit D3对小鼠牙囊细胞向成骨细胞(成牙骨质细胞)分化能力的影响.方法:第3代小鼠牙囊细胞与10-8mol/L的1,25-(OH)2Vit D3共孵育3、5、7、9 d后,测定其对牙囊细胞增殖、碱性磷酸酶(alkaline phosphotase,ALP)活性、蛋白含量及骨钙素(osteocalcin,OC)表达的影响.结果:在5～7 d的时间范围内,1,25-(OH)2Vit D3能显著促进牙囊细胞的增殖(P＜0.05),在5～9 d内能提高ALP活性(P＜0.01),增加OC阳性细胞率(P＜0.05),但在9 d时能使总蛋白含量下降(P＜0.05).结论:1,25-(OH)2Vit D3能促进牙囊细胞的增殖及向成骨细胞方向分化,但对蛋白合成有抑制作用.
- 葛少华杨丕山李纾赵宁
- 关键词：牙囊细胞分化骨钙素
