广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600294)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：章乐虹查中青元敏吴巧胜彭伟强更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院广州医科大学惠州市中心人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ERβ与其变异体对三阴性乳腺癌细胞株生长的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β(ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性;探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内分泌治疗的预测因子和新的治疗靶点。方法①构建真核细胞表达克隆pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△。②脂质体法转染人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,设ERβ组、ERβ△组、空载体组及空白对照四组。③转染后荧光显微镜检,免疫荧光、免疫细胞化学、WesternBlot等方法验证蛋白表达。按实验设计分别加入不同药物浓度的三苯氧胺、雌激素。④流式细胞术观察细胞周期情况。MTT法检测细胞相对活性。结果①以IRES2-EGFP为蓝本改造的pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△成功构建。②转染ERβ后细胞生长速度加快,细胞周期中G1期比例减少,S期比例增加,克隆形成能力增强;转染ERβ△后细胞系相对活性及细胞周期未见明显改变;雌激素及tamoxifen对转染ERβ及其剪切体ERβ△的细胞生长无明显影响。结论 ERβ单独表达促进MDA-MB-231细胞生长,增加细胞相对活性及克隆形成能力;转染ERβ的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中对雌激素及雌激素抑制剂tamoxifen无明显反应。
- 陈迪章乐虹查中青
- 关键词：三阴性乳腺癌内分泌治疗
- 雌激素受体β表达对于乳腺癌细胞生长特性及内分泌治疗的影响被引量：4
- 2013年
- 目的通过脂质体转染技术,将ERβ转染给ERα+的MCF-7细胞和ERα-的MDA-MB-231细胞,研究在ERα+和ERα-的不同条件下ERβ的功能。方法利用脂质体转染试剂Lipofectmine LTX将质粒pReveicer-M72-ERβ对MCF-7细胞和MDA-MB-231进行转染,并将细胞分为MCF-7组(ERα+ERβ-)、MCF-7ERβ组(ERα+ERβ+)、MCF-7空组(ERα+ERβ-)、MDA-MB-231组(ERα-ERβ-)、MDA-MB-231 ERβ组(ERα-ERβ+)、MDA-MB-231空组(ERα-ERβ-),对各组细胞进行雌二醇、他莫昔芬处理,并同时设置未处理组作为对照。用MTT法绘制各组细胞在不同处理因子作用下的生长曲线。结果①与MDA-MB-231组和MDA-MB-231空组相比,MDA-MB-231 ERβ组细胞生长速度加快(P<0.05),三组细胞对于雌二醇、他莫昔芬的反应差异无显著性;②与MCF-7组和MCF-7空组对比,MCF-7ERβ组细胞生长速度减慢(P<0.05);在雌二醇的作用下,MCF-7ERβ组细胞的生长速度比其他两组细胞减慢(P<0.05),三组细胞对于他莫昔芬的反应差异无显著性。结论①在ERα表达的条件下,ERβ的表达能够抑制细胞的生长,并且能够使细胞对于雌激素的敏感性下降;②在无ERα表达的条件下,ERβ的表达能够促进细胞的生长。
- 查中青元敏吴巧胜章乐虹
- 关键词：内分泌治疗
- ERβ1基因及其剪切变异体真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的应用基因克隆技术构建雌激素受体β1(ERβ1)及其5-8外显子缺失变异体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),为ERβ功能的研究奠定基础。方法组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增基因ERβ1及ERβ△,限制性酶切并克隆于以带EGFP绿色荧光基因及Myc报告基因的非融合真核细胞表达质粒IRES2-EGFP,菌群转化扩增后琼脂糖凝胶电泳,限制性酶切后行DNA测序鉴定。结果 PCR扩增及限制性酶切法证实重组真核表达质粒的构建成功。测序表明ERβ1长度为1593 bp,ERβ△长度为972 bp,与GeneBank上公布的蛋白编码区序列一致。结论成功构建ERβ1基因及其剪切变异体ERβ△真核表达载体。
- 陈迪章乐虹彭伟强
- 关键词：质粒
