背景与目的吉西他滨是目前治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的一线药物。研究表明作为吉西他滨作用靶点的核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1),其启动子区域的基因多态性可以影响吉西他滨对非小细胞肺癌患者的疗效。本研究旨在建立一种简便和高特异性的方法,检测RRM1(-37)位点的基因多态性,并以此方法分析RRM1(-37)位点A/C基因型与吉西他滨治疗NSCLC疗效的相关性。方法收集110例肺癌患者和40例健康人的外周血,提取基因组DNA,以RRM1基因的启动子区域为目的基因,合成野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R。利用DNA荧光嵌入染料SYBR Green I进行荧光PCR扩增,对PCR产物进行熔解曲线分析以确定基因型。分析RRM1(-37)位点基因多态性与患者的一般状态、接受吉西他滨治疗的疗效及生存时间的关系。结果110例肺癌患者和40例健康人中A/A等位基因频率分别为32%和30%,两组人群在RRM1(-37)位点基因分布频率上无统计学差异,RRM1(-37)位点的基因多态性与肺癌患者的性别、病理类型及临床分期无相关性(P>0.05),且与肺癌患者接受吉西他滨治疗的疗效及生存时间无相关性(P>0.05)。结论本研究建立的引物特异性实时荧光PCR法可对RRM1(-37)位点进行准确的基因分型。
