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国家自然科学基金(30371475): 作品数：13 被引量：107H指数：7; 相关作者：魏光辉宋晓峰邓永继张德迎刘星更多>>; 相关机构：重庆医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对小鼠胎鼠睾丸及睾丸引带的影响被引量：5: 2009年; 目的:研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对小鼠胎鼠睾丸与睾丸引带形态结构及功能的影响,探讨隐睾发生的可能机制。方法:30只健康KM孕鼠随机均分为3组:空白对照组、玉米油对照组、DEHP组。DEHP组以剂量500mg/(kg.d)的DEHP灌胃作用于怀孕12～19d(GD12～GD19)的KM母鼠,观察DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重、睾丸重量、睾丸引带形态结构、位置、睾丸到膀胱颈之间的相对距离(TBD)、颅侧悬韧带残留情况、引带内雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、肌动蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。结果:DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重无明显影响;DEHP可影响胎鼠睾丸重量及TBD;DEHP组睾丸均有一定程度的下降不全,睾丸引带形态结构无明显差异;光镜下见DEHP组睾丸生精小管、支持细胞存在明显的发育障碍,睾丸Leydig细胞明显增生;DEHP组睾丸引带AR阳性表达率降低(P<0.01)。结论:DEHP可通过抗雄激素效应导致睾丸引带功能障碍,使睾丸下降发生异常而诱导小鼠隐睾;同时造成睾丸Ser-toli细胞、睾丸Leydig细胞和生精细胞的发育障碍和功能改变。; 宋晓峰邓永继张德迎刘星吴盛德魏光辉; 关键词：环境内分泌干扰物隐睾睾丸引带胎鼠

邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯对体外培养小鼠附睾上皮细胞的影响: 2007年; 目的：探讨DEHP对体外培养的小鼠附睾上皮细胞生长、活性及功能的影响。方法：将性未成熟期（PND20）和性成熟期（PND50）健康雄性KM小鼠附睾上皮细胞分离后进行体外培养，分别随机分为正常对照组、睾酮组和DEHP组。观察各期各组小鼠附睾上皮细胞的生长增殖情况，MTT法测定附睾上皮细胞活性，取细胞培养液上清测定附睾的功能性指标：唾液酸（SA）含量、α-1、4-糖苷酶活性及乳酸脱氢酶（LDH）活力。结果：DEHP组附睾上皮细胞活性降低，细胞培养液中唾液酸（SA）含量升高、α-1、4-糖苷酶活性及乳酸脱氢酶（LDH）活力降低；正常对照组、睾酮组细胞生长增殖正常。结论：DEHP可抑制体外培养的小鼠附睾上皮细胞生长增殖、活性，导致附睾功能受损。; 张超张德迎魏光辉刘官信张晓萍; 关键词：DEHP 附睾上皮细胞细胞培养

邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯诱导小鼠胚胎Leydig细胞凋亡的体外实验研究被引量：2: 2007年; 目的研究邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯EDi（2-ethylhexyl）phthalate，DEHP]对小鼠胚胎睾丸Leydig细胞凋亡诱导作用。方法DEHP50、100、200ug／ml分别作用于体外培养、纯化的胎龄16d（GD16）小鼠胚胎睾丸Leydig细胞。光镜、电镜观察Leydig细胞形态和超微结构变化，DNA末端原位标记染色法（TUNEL法）和Annexin-V／PI双染法流式细胞仪分别检测kydig细胞凋亡指数、凋亡细胞比例。结果DEHP处理组透射电镜可见凋亡典型的形态学变化，凋亡指数及凋亡细胞比例与对照组比较有显著或非常显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）。结论DEHP能诱导小鼠胚胎睾丸Leydig细胞凋亡。; 宋晓峰张德迎邓永继陈旋刘星魏光辉; 关键词：细胞凋亡胚胎

邻苯二甲酸二乙基己酯对小鼠胚胎Leydig细胞毒性作用研究被引量：7: 2006年; 目的探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对小鼠胚胎睾丸问质细胞(Leydig细胞)的毒性作用。方法小鼠胚胎Leydig细胞体外原代培养。观察DEHP导致的Leydig细胞形态及超微结构改变,用MTT法和Annexin-V／PI流式细胞术分别检测DEHP在培养基内终浓度为25、510、100和200mg／L时对Leydig细胞活力影响及毒性作用。结果Leydig细胞活力随着DEHP浓度增加和作用时间延长而明显下降。Annexin-V／PI流式细胞术检测提示:死亡细胞比例随DEHP浓度升高和作用时间延长而显著增加,同时细胞增殖速度变慢,甚至增殖停止,伴随一系列细胞形态学及超微结构改变,呈剂量、时间依赖关系。结论DEHP能降低Leydig细胞的活性并促进其死亡,有明显细胞毒性。; 宋晓峰魏光辉邓永继陈旋刘星张德迎; 关键词：胚胎 LEYDIG细胞

小鼠胚胎睾丸Leydig细胞培养、纯化及其功能研究被引量：19: 2006年; 目的:探讨小鼠胚胎睾丸Leyd ig细胞体外培养、鉴定、纯化的方法,并进行形态学观察、分泌睾酮能力等生物学特性检测。方法:选择胎龄16 d的胎鼠睾丸,0.03%胶原酶Ⅰ消化,3β-羟基类固醇脱氢酶(HSD)染色鉴定及纯度测定,锥虫蓝染色检测细胞活率。放免法测定Leyd ig细胞不同培养时间及密度下分泌睾酮的水平。结果:Leyd ig细胞培养前和培养72 h后纯度分别为(45.10±1.66)%和(81.17±2.32)%;培养液中可检测到睾酮,睾酮水平与Leyd ig细胞数、培养时间相关,单个Leyd ig细胞睾酮分泌能力逐日下降。结论:该法分离的胚胎Leyd ig细胞纯度较高,生长性好,保持增殖和分泌睾酮的生物学特性,可应用于相关的研究。; 宋晓峰魏光辉邓永继; 关键词：睾酮胚胎小鼠体外培养

医用塑料增塑剂DEHP安全性研究及对策被引量：38: 2005年; DEHP作为广泛使用的通用型增塑剂,大量应用于塑料制品中,包括医用塑料制品。研究证实DEHP可通过多种途径进入人体,对机体多个系统均有毒性作用,被认为是一种环境内分泌干扰因子。PVC医疗器械中的DEHP释放到患者体内,对患者具有更大的危害性,尤其是处于发育早期和分化发育敏感阶段的儿童和孕妇。世界各国针对性地制定了相关的环保战略。本文就DEHP的理化性状、体内代谢、对机体损害、安全性评估及各国相关的环保政策作一综述。; 宋晓峰魏光辉; 关键词：增塑剂

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱发小鼠隐睾与INSL3 mRNA表达的相关性研究被引量：10: 2006年; 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)诱发小鼠隐睾的分子机制。方法:DEHP分别以低、中、高3个剂量组(100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg)灌胃,作用于孕12d(gestationday12,GD12)至产后3d(postnatalday3,PND3)的昆明孕鼠。观察仔鼠隐睾发生率,RT-PCR检测仔鼠睾丸胰岛素样因子3(insulinlikefactor3,INSL3)mRNA表达的相对强度。结果:DEHP可诱发小鼠隐睾,中、高剂量组双侧隐睾发生率分别为16.1%和40.5%,隐睾总发生率分别为25.8%和51.4%;DEHP影响小鼠睾丸组织形态,高剂量组Leydig细胞增生;DEHP下调各实验组小鼠睾丸INSL3mRNA表达水平;PND1、PND5时,DEHP诱发隐睾发生率与INSL3mRNA表达水平呈负相关(r=-1.0,P<0.01),PND15时两者无明显相关性(r=0.50,P>0.05)。结论:DEHP诱发小鼠隐睾并下调睾丸Leydig细胞INSL3mRNA表达水平,隐睾发生率与小鼠一定阶段的INSL3mRNA表达水平有相关性。; 宋晓峰张德迎魏光辉陈旋刘星邓永继; 关键词：LEYDIG细胞

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对原代培养小鼠胚胎睾丸Leydig细胞功能影响研究被引量：8: 2006年; 目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[D i(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]对体外培养的小鼠胚胎睾丸间质细胞(Leyd ig细胞)3β-羟基类固醇脱氢酶(3-βHSD)活性及睾酮合成的影响。方法小鼠胚胎Leyd ig细胞原代培养。DE-HP染毒剂量分别为25、50、100、200 mg/L,通过检测睾酮合成关键酶3β-HSD活性、放免法测定培养液中睾酮浓度,研究DEHP对Leyd ig细胞功能影响。结果小鼠胚胎Leyd ig细胞分离培养后,纯度和存活率分别达(81.17±2.32)%、(80.88±2.80)%。DEHP(25 mg/L)处理12 h,或DEHP(50 mg/L)处理6 h后,实验组与对照组比较3β-HSD酶活性明显降低(P<0.05),随着时间延长和药物浓度增加差异更显著(P<0.01)。DEHP50、100 mg/L实验组,在12、24 h的睾酮水平明显低于对照组(P<0.05)或(P<0.01),存在时间-效应关系;DEHP 200 mg/L实验组在6、12、24 h与对照组比较均有非常显著差异(P<0.01),并可观察到Leyd ig细胞明显的形态学改变。结论DEHP能影响原代培养小鼠胚胎Leyd ig细胞3β-羟基类固醇脱氢酶活性,并抑制睾酮合成,存在时间-效应和剂量-效应关系。; 宋晓峰魏光辉邓永继陈璇刘星张德迎; 关键词：胚胎 LEYDIG细胞睾酮

邻苯二甲酸二乙基己酯对新生小鼠睾丸及Leydig细胞影响的实验研究被引量：8: 2006年; 目的：探讨邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）对新生小鼠睾丸及Leydig细胞形态结构及功能的影响。方法：DEHP分别以低、中、高3组剂量[100、200、500mg／（kg·d）]灌胃作用于怀孕12d到产后3d（GD12～PND3）的KM母鼠，观察DEHP对新生雄性仔鼠体重、睾丸重量、Leydig细胞形态结构和3β-羟基类固醇脱氢酶（3β—HSD）活性、酶反应面积的影响。结果：DEHP作用于母鼠后，其雄性子代幼鼠体重和睾丸重量减轻，睾丸Leydig细胞形态、超微结构发生改变；高剂量组Leydig细胞数量明显增多；低、中剂量组睾酮合成关键酶3β-HSD酶活性下降，酶反应面积减小，但高剂量组在仔鼠出生后15d时酶活性降低[（吸光度值（0．154±0.011）1）8空白对照组（0．222±0.013），P〈0．01]，而酶反应面积增大[（6303．0±745．6）μm^2 vs 空白对照组（5091．4±214．4）μm^2，P〈0．01）]。结论：DEHP能影响新生雄性小鼠体重、睾丸重量、Leydig细胞的形态结构和3B—HSD活性，具有抗雄激素效应。; 宋晓峰魏光辉邓永继陈璇刘星张德迎; 关键词：邻苯二甲酸二乙基己酯胚胎 LEYDIG细胞

二乙基己基邻苯二甲酸致小鼠附睾生殖毒性及锌保护作用实验研究被引量：2: 2008年; 目的探讨二乙基己基邻苯二甲酸（DEHP）对附睾生殖功能的损害和可能机制，探寻DEHP毒性作用的拮抗剂。方法出生后20d（PND20）和50d（PND50）雄性KM小鼠分别随机分为正常对照组、玉米油组、DEHP组和DEHP＋葡萄糖酸锌组，连续灌胃10d，观察各期各组小鼠附睾组织学改变，检测雄激素受体（AR）、雌激素受体（ER）表达水平；体外培养PND20和PND50小鼠附睾上皮细胞，MTT法测定附睾上皮细胞活性，测定唾液酸（SA）含量、α-1，4-糖苷酶活性及乳酸脱氢酶（LDH）活力。结果体内实验表明DEHP可导致附睾萎缩等组织病理学改变，并可导致附睾组织AR水平上调和ER水平下调（P〈0．01）；体外实验表明DEHP可导致附睾上皮细胞活性降低，而DEHP＋葡萄糖酸锌组附睾的形态、结构及功能均未见明显改变。结论DEHP可使附睾的结构和功能受损，锌对DEHP所致附睾生殖毒性具有拮抗作用。; 张超宋晓峰刘星张德迎魏光辉; 关键词：生殖附睾锌小鼠

国家自然科学基金(30371475)

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