教育部留学回国人员科研启动基金(2011-1568-1)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 未巯基化vGPCR的胞外氨基端可降低hGRO-α在裸鼠中的致瘤性
- 2012年
- 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)编码的G-蛋白偶联受体(vGPCR)是一种致瘤蛋白,它与KSHV相关恶性肿瘤的发生密切相关.本工作组前期研究发现,vGPCR胞外氨基端(N端)第26位和第28位酪氨酸(Y26和Y28)均具有巯基化修饰,且该巯基化修饰对于vGPCR在裸鼠中的致瘤性至关重要.hGRO-可结合巯基化的vGPCR,并通过自分泌促进其致瘤性.有趣的是,未巯基化的vGPCR突变体(yydd-vGPCR)削弱由hGRO-导致的肿瘤的发生.本研究表达和纯化了vGPCR的N端(wt-vGN)和未巯基化的vGPCR突变体的N端(yydd-vGN).放射性标记实验结果表明,wt-vGN而非yydd-vGN可结合[35S]标记的硫酸盐.在裸鼠实验中,稳定表达yydd-vGN的NIH3T3细胞而非稳定表达wt-vGN的NIH3T3细胞可强烈抑制hGRO-导致的肿瘤发生.本研究证明,未巯基化的vGPCR胞外N端的可降低hGRO-在裸鼠中的致瘤性.
- 吴慧傅永明肖俊周曼周维冯浩
- 关键词:致瘤性
- 改良红鲫Dmc1基因编码阅读框的克隆及表达被引量:1
- 2012年
- Dmc1基因是一个在减数分裂前期Ⅰ表达的基因,其表达产物为减数分裂时同源染色体配对所必需。本实验根据普通红鲫Dmc1基因编码阅读框(ORF)序列设计引物,克隆了改良红鲫Dmc1基因(命名为IRCC-Dmc1)的ORF序列并将之插入到cDNA5-FRT/TO载体中,构建了改良红鲫Dmc1基因表达载体FRT/TO-IRCC-Dmc1-Myc。以FRT/TO-IRCC-Dmc1-Myc质粒转染HEK293T细胞,蛋白印迹杂交实验检测到改良红鲫Dmc1基因在HEK293T细胞中有着正确的表达。本文为将来进一步研究改良红鲫Dmc1基因的功能打下了基础。
- 周曼冯浩
- 关键词:克隆