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国家自然科学基金(30471938): 作品数：22 被引量：98H指数：5; 相关作者：许文荣朱伟钱晖胡嘉波乔纯更多>>; 相关机构：江苏大学江苏大学附属医院南京师范大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

骨髓间质干细胞的免疫调节作用被引量：3: 2006年; 间质干细胞是存在于骨髓、脐带血、肌肉、骨骼、软骨、脂肪、血管等的多能干细胞。在体外培养时,细胞贴壁生长,呈成纤维样细胞表型,在一定条件下可分化内胚层、中胚层和外胚层细胞。因间质干细胞具有易分离扩增、基因转染、支持体外造血、体内造血重建以及免疫调节作用等特点,在临床上有很大的潜在应用价值。; 毛飞许文荣许化溪; 关键词：骨髓间质干细胞免疫调节

慢病毒转染大鼠骨髓间质干细胞条件优化及其性质研究: 目的建立慢病毒载体稳定转染大鼠骨髓间质干细胞的方法并研究转染后细胞性质.方法采用基于HIV-1的VSV-G假膜化的慢病毒载体转染大鼠骨髓来源的间质干细胞；研究不同转染条件包括感染复数、感染方式、感染次数对转染效率的影...; 张徐朱伟王梅曹慧玲徐学静钱晖许文荣; 关键词：间质干细胞基因治疗慢病毒转染

间质干细胞和肿瘤干细胞的分离鉴定及临床意义被引量：1: 2005年; 朱伟许文荣; 关键词：间质干细胞肿瘤干细胞

体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞被引量：4: 2008年; 目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及CC l4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志。结果:在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alphafetal prote in,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-d ioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuc lear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性。与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO。结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CC l4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源。; 司煜安许文荣严永敏钱晖朱伟周忠海徐静周洪兴曹慧玲李继刚; 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞细胞分化

FP248基因表达检测在白血病和肿瘤诊断中的意义: 2008年; 目的用real-time PCR和RT-PCR检测FP248 mRNA表达,研究其在白血病和肿瘤诊断中的意义。方法用real-time PCR和RT-PCR检测肿瘤细胞株(SGC-7901、A549、95D、SW480、U937、PC3)和白血病(ALL、CML、AML)患者骨髓或外周血以及胃癌等消化道肿瘤患者癌组织中FP248 mRNA的表达水平;用RT-PCR技术检测消化道肿瘤患者外周血单个核细胞(PB-MC)FP248 mRNA的表达。结果SGC-7901细胞株FP248 mRNA强阳性,A549和95D细胞弱阳性,其他细胞株阴性;ALL、CML、AML患者骨髓及PBMC FP248表达上调;胃癌、直肠癌、结肠癌患者癌组织中FP248 mRNA的表达高于癌旁组织,食道癌组织为阴性;胃癌、结肠癌和直肠癌患者PBMC未检测到FP248 mRNA。结论FP 248的表达可能在白血病和消化道肿瘤的发生发展中起重要作用;检测该基因的表达可能有助于白血病和消化道肿瘤的诊断。; 李继刚许文荣钱晖朱伟王胜步雪峰张蕾蕾徐静司煜安陈忠周忠海周洪兴施晓凤; 关键词：FP 白血病消化道肿瘤 REAL-TIME

人骨髓间质干细胞ING4基因的克隆及其慢病毒表达载体构建: 2007年; 目的:克隆人骨髓间质干细胞ING4(inhibitor of growth famility,member4)基因,构建其慢病毒表达载体PNL-ING4。方法:提取人骨髓间质干细胞(hMSCs)总RNA,经RT-PCR扩增出ING4cDNA,克隆至PMD19-T载体,选择阳性克隆进行酶切鉴定和测序,构建慢病毒表达载体PNL-ING4,用双酶切、基因测序进行鉴定。结果:RT-PCR产物为750 bp的条带,双酶切和基因测序正确。结论:成功从hMSCs克隆了ING4基因并成功构建其慢病毒表达载体PNL-ING4,为进一步研究ING4基因的作用与抗肿瘤机制奠定了基础。; 张蕾蕾许文荣乔纯钱晖朱伟李继刚周洪兴司煜安周宗海阴晴; 关键词：ING4 慢病毒表达载体人骨髓间质干细胞克隆

骨髓间充质干细胞和部分肿瘤细胞中Nucleostemin基因的表达被引量：37: 2005年; 以分离的人胚胎和大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs) ,6种肿瘤细胞株 ,裸鼠肿瘤和转移瘤组织为实验材料 ,以大鼠心肌组织和人胎盘组织为对照 ,探讨nucleostemin基因的表达情况 .RT PCR结果显示 ,nucleostemin基因在MSCs、肿瘤细胞和肿瘤组织中均有不同程度的表达 ,而大鼠心肌和人胎盘组织中无表达 .DNA测序结果证明 ,扩增的PCR产物与GenBank提供的DNA序列完全同源 .SCID裸鼠肿瘤动物模型定量PCR结果证实 ,nucleostemin的mRNA在裸鼠肿瘤组织和转移瘤组织中表达较高 .研究结果表明 ,在细胞中nucleostemin基因不同水平的表达可能与MSCs、肿瘤细胞的增殖和肿瘤的发生、发展与转移有关 .; 钱晖许文荣王文兵韩崇旭郝顺祖朱伟孙晓春胡嘉波黄诒森; 关键词：肿瘤细胞人胎盘组织骨髓间充质干细胞 N基因 PCR产物

TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的:构建携带绿色荧光蛋白的TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒表达载体,转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)。方法:设计含有GM-CSF信号肽序列和BglⅡ及HindⅢ酶切位点的引物,PCR扩增TNFα-Tumstatin,将扩增产物亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组。筛选获得含有融合基因的重组腺病毒质粒,酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,经过包装、扩增后感染hUCMSCs并检测细胞内融合基因的表达。结果:重组腺病毒质粒经PCR和PacⅠ酶切鉴定,证实含有TNFα-Tumstatin融合基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒感染的hUCMSCs表达绿色荧光蛋白和融合基因。结论:成功构建了TNFα-Tumstatin融合基因的腺病毒表达载体,能高效率感染hUCMSCs,为进一步研究融合基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤效应奠定了基础。; 周忠海许文荣朱伟乔纯王兴忠陈圆司煜安徐静周洪兴张蕾蕾李继刚钱晖; 关键词：腺病毒载体融合基因细胞转染

慢病毒转染人骨髓间质干细胞研究被引量：3: 2008年; 目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs。利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs。结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs。结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础。; 张徐钱晖朱伟曹慧玲徐学静司煜安王梅许文荣; 关键词：间质干细胞慢病毒转染

间质干细胞的基因治疗被引量：1: 2006年; 目的:总结以间质干细胞为载体细胞的基因治疗的进展,为细胞基因修饰在实验性基因治疗中的应用提供提示。资料来源:用计算机检索Medline,Pubmed和Springer数据库1998-01/2005-12与骨髓间质干细胞基因治疗相关的文章,检索词为“mesenchymalstemcells,genetherapy”,并限定文章语言种类为English。同时计算机搜索CNKI中国全文期刊数据库1998-01/2005-12与骨髓间质干细胞基因治疗相关的文章,限定文章语言种类为中文,检索词为“间质干细胞,基因治疗”。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①选择与间质干细胞,转基因,基因治疗、运输、转导有关文章。②在1998年以后发表的文章。排除标准:重复文章、综述文献、Meta分析类文章。资料提炼:共搜集到273篇相关文章,入选41篇。对检索到的文章的相关信息综合加以概括综述,其中间质干细胞的生物学特性、自我更新和分化10篇,以间质干细胞作为靶细胞的基因治疗31篇。资料综合:细胞介导的基因治疗,包括诱导转移性基因进入细胞的病毒和非病毒载体的设计,转移性基因的能力,引导修饰性基因或者被分泌的治疗性物质进入疾病组织的能力以及在干细胞内的治疗性物质产物的最佳化和调节等。运载缺失的基因可以促进心脏的功能性恢复,心肌的再生则可以用来修复心肌损伤。骨髓来源的间质干细胞对治疗自身免疫性疾病的免疫抑制效应非常重要。结论:间质干细胞是具有潜在应用前景的基因治疗的载体细胞。间质干细胞来源丰富,易于在体外分离和培养,并具有自我更新和多系分化的能力,通过体内外分泌一系列的蛋白从而对遗传缺陷性疾病或获得性疾病进行治疗。; 乔纯许文荣; 关键词：干细胞基因疗法

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