云南省教育厅科学研究基金(06J316C)
- 作品数：7 被引量：24H指数：4
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- 高效液相色谱法测定云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量被引量：9
- 2008年
- 目的:建立云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量的测定方法。方法:样品经干燥研细后采用甲醇浸提、乙酸乙酯萃取,测定同一批细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量,采用Spherisorb C185μm柱,流动相甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流速1.0ml/min,检测波长为234nm。结果:云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量为0.023 47%,平均回收率为100.6%,变异系数(RSD)为2.2%。结论:该方法能准确、快速测定云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量,为探讨10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在细胞培养物中的代谢研究提供测定方法。
- 李海峰赵志莲杨永寿王胤刘光明
- 关键词：云南红豆杉细胞培养高效液相色谱法
- 云南红豆杉生长过程中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量变化被引量：5
- 2009年
- 目的研究云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ（10-deacetyl baccatinⅢ）的含量变化。方法采用色谱柱Agilent C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-水（42∶13∶45）,流速1.0 m l.min^-1,柱温32℃,检测波长234 nm,测定云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果回归方程Y=15.290 29X-4.059 76（r=0.999 0）,线性范围5.50～550μg.ml^-1;加样回收率（n=6）98.6%,RSD为2.4%。在云南红豆杉生长期树皮中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量高于枝叶,是枝叶中最高含量的1.498倍;休眠芽分化期和休眠期是10-去乙酰巴卡亭Ⅲ积累的关键时期,在枝叶中的含量显著高于树皮,最高含量达0.115 0%是树皮中最高含量的1.769倍,二年生枝叶中含量略高于一年生枝叶。结论该方法简便、准确度高,可用于云南红豆杉枝叶的质量控制。
- 李海峰赵志莲刘光明
- 关键词：云南红豆杉高效液相色谱法
- 从云南红豆杉细胞培养物中分离鉴定10-去乙酰巴卡亭Ⅲ被引量：4
- 2008年
- 目的:从云南红豆杉(Taxus yunnanensis)细胞培养物中提取、分离和纯化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)。方法:采用固液分离、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、重结晶等方法从细胞培养物中提取分离得到10-DABⅢ,并用波谱解析(1HNMR,13CNMR)对其结构进行了鉴定。结果:建立了从红豆杉细胞培养物中提取、分离和纯化10-DABⅢ的方法,证明与从天然红豆杉植物中得到的10-DABⅢ为同一化合物。结论:本方法简便、成本低,可用于红豆杉细胞培养物中10-DABⅢ的提取、分离。
- 李海峰赵志莲刘光明
- 关键词：云南红豆杉细胞培养物
- 培养基和培养条件对云南红豆杉细胞生长量及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响被引量：2
- 2009年
- [目的]探讨云南红豆杉细胞生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响条件。[方法]研究不同培养基、培养温度和光照强度对云南红豆杉细胞生长量和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。[结果]结果表明,BTM培养基中细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是B5培养基中的1.7倍和2.6倍;20℃培养时细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是30℃时的1.5倍和5.7倍;暗培养细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是强光照(3 000 lx)培养时的2.5倍和4.4倍。[结论]该研究结果为云南红豆杉细胞培养生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ提供依据。
- 赵志莲李海峰
- 关键词：云南红豆杉培养基
- Cu^(2+)、前体对红豆杉细胞生长及产生10-Deacetyl Baccatin的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:研究前体和Cu2+诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的乙酸钠、苯甲酸钠两种前体和CuSO4诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长情况进行统计,用HPLC测定细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果:培养基中添加0.1mmol/L乙酸钠和0.1mmol/L苯钾酸钠,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是不添加时的1.8倍和2.8倍,含量分别为0.079 88%、0.082 91%;B5培养基中添加0.1mg/L硫酸铜时,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是B5培养基标准含量的2.2倍。结论:确定了云南红豆杉细胞悬浮培养过程中B5培养基添加乙酸钠、苯甲酸钠和硫酸铜的最佳浓度,表明适宜浓度前体和Cu2+诱导子对10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放有显著影响。
- 张海珠赵志莲刘光明李海峰
- 关键词：云南红豆杉细胞生长前体诱导子
- 稀土诱导子对红豆杉细胞生长及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:研究稀土诱导子对云南红豆杉细胞生长及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的硝酸铈、硝酸铈铵和硝酸镧诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长量进行统计,用HPLC法测定细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果:培养基中添加0.1mmol/L硝酸铈、0.01mmol/L硝酸铈铵和0.01mmol/L的硝酸镧时,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是不添加时的2.3倍、4.1倍和2.6倍,含量分别为0.05446%、0.09767%和0.06187%。结论:该研究为云南红豆杉细胞培养生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ提供理论依据。
- 赵志莲顾培安李海峰
- 关键词：云南红豆杉细胞生长稀土诱导子
- 培养基成分对云南红豆杉细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究Bs培养基主要成分对云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法利用植物组织培养技术结合HPLC分析手段，通过改变Bs培养基中CaCl2、NaH2PO4、（NH4）2SO4和KNO3的质量浓度，研究其对云南红豆杉细胞生长及10-去乙酰巴卡亭Ⅲ量的影响。结果试验组与对照品相比，B5培养基中高质量浓度的NaH2PO4能够显著促进云南红豆杉细胞生长，CaCl2、（NH4）2SO4和KNO3浓度对细胞生长无显著影响；Bs培养基中低质量浓度的CaCl2、NaH2PO4、（NH4）2SO4和KNO3能够显著促进10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放。结论Bs培养基中NaH2PO4为300mg／L时，能够显著促进云南红豆杉细胞生长，细胞生长量是对照的1．2倍，CaCl2、（NH4）2SO4和KN03分别在75～300、134～268和2500～5000mg／L对细胞生长无显著影响；Bs培养基中CaCl2、NaH2PO4、（NH4）2SO4和KNO3的质量浓度分别为75、75、33．5、625mg／L时，能够显著促进细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放，10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量分别是对照的1．5、1．4、2．4倍。
- 李海峰赵志莲刘光明
- 关键词：云南红豆杉细胞生长培养基
