国家自然科学基金(30330510)
- 作品数：10 被引量：17H指数：3
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- 单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4体外抑制白念珠菌芽管形成及粘附作用被引量：3
- 2008年
- 目的:观察单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4在体外抑制白念珠菌芽管形成及抑制白念珠菌与宿主细胞粘附的作用.方法:将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4分别与白念珠菌酵母相悬液在有利于芽管形成的条件下共同孵育,倒置显微镜下计数白念珠菌总数以及白念珠菌芽管数;将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4与白念珠菌酵母相和人角质形成细胞混悬液、白念珠菌酵母相和人口腔黏膜上皮细胞混悬液、白念珠菌酵母相和胎儿脐静脉内皮细胞混悬液共同孵育,分别计数人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞上粘附的白念珠菌数.结果:与对照组比较,不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4均能抑制白念珠菌芽管生成,并且抗体浓度越高,抑制白念珠菌芽管形成的作用越明显;同时单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4能够显著减少白念珠菌与角质形成细胞、上皮细胞、内皮细胞的粘附,其抑制作用与单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4的浓度呈正相关.结论:单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4在体外能够抑制白念珠菌芽管形成,能够抑制白念珠菌与人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞的粘附,从而降低白念珠菌的侵袭力,提示天然抗体IgM在机体抗真菌感染的天然免疫中可能具有积极的作用.
- 陈新辉赵明玄安金刚李巍刘玉峰
- 关键词：白念珠菌
- Association study of NFKB1 and SUMO4 polymorphisms in Chinese patients with psoriasis vulgaris
- Nuclear factor kappa-beta(NF-κB)is a critical transcription factor responsible for modulating the expression o...
- Hong LiL GaoZ ShenCY LiK LiM LiYJ LvCX LiTW GaoYF Liu
- 关键词：PSORIASISNF-ΚBGENETICASSOCIATIONSNP
- 文献传递
- 置换肽对豚鼠银屑病样模型表皮增殖的治疗作用被引量：2
- 2006年
- 目的观察置换肽(APL)对豚鼠银屑病样模型表皮增殖的治疗作用。方法采用心得安法制备豚鼠耳廓银屑病样模型,APL外涂给药,免疫组化法检测皮损中细胞增殖核抗原(PCNA)变化并评价疗效。结果APL组动物银屑病样改变的好转程度明显优于对照组(P<0.05)。结论提示APL具有促进豚鼠银屑病样模型康复的作用。
- 史晓蔚沈柱樊建勇党育平王刚刘玉峰
- 关键词：PCNA银屑病动物模型
- 天然属性的抗角蛋白单克隆IgM抗体的制备被引量：9
- 2005年
- 目的制备天然属性的抗角蛋白单克隆IgM抗体。方法取饲养在无特殊病原体条件下BALB/c小鼠的脾细胞,直接与SP2/0细胞融合。以提取的角蛋白抗原对阳性杂交瘤细胞生长孔进行ELISA筛选。采用免疫组化、免疫印迹技术对获得的抗体进行鉴定。结果不经任何免疫,细胞融合率为60%;14%的杂交瘤细胞生长孔上清液与角蛋白抗原结合;获得3株稳定分泌IgM型天然抗角蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。免疫组化结果初步显示天然抗角蛋白IgM可以和表皮、皮脂腺、毛囊、肌肉组织结合。结论正常小鼠脾脏内存在自发分泌天然抗角蛋白IgM的B淋巴细胞。
- 付萌李巍王刚张衍国李承新樊平申刘玉峰
- 关键词：IGM抗体瘤细胞生长免疫印迹技术IGM型自发分泌
- 天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的多反应性鉴定及其分子机制的初步探讨被引量：4
- 2005年
- 目的对天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的多反应性进行鉴定,并探讨其分子基础。方法用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组化法检测3B4与多种抗原的反应活性,分析其可变区基因与氨基酸序列。结果3B4除与角蛋白和皮肤发生较强的反应外,尚能选择性与多种具有不同表位的抗原和不同的组织反应;同源性分析表明,其重、轻链可变区基因分别与胚系基因VH1J558.42及VK1am4高度同源;HCDR3区为该抗体区别于其他同源性较高的免疫球蛋白的惟一基序,主要由短的侧链氨基酸组成。结论天然抗角蛋白单克隆抗体3B4具有多反应性,由少量突变的胚系基因编码,HCDR3区的柔韧性可能是多反应性的分子基础之一。
- 管海宏付萌夏汝山王刚刘玉峰
- 关键词：分子机制免疫组化法检测分子基础可变区基因同源性分析种抗原
- 多反应性分子机制的研究进展
- 2004年
- 多年来,传统免疫学理论一直认为抗原抗体间以“一把钥匙开一把锁”的方式特异性识别,但近二三十年研究发现的多反应性现象,更正或丰富了人们对抗原抗体间相互作用的认识。多反应性的分子机制是目前研究的热点之一。
- 管海宏付萌刘玉峰王刚
- 关键词：分子机制反应性抗原抗体相互作用钥匙
- 单克隆天然抗角蛋白抗体3B4抑制白念珠菌芽管生成的研究
- 2006年
- 目的观察单克隆天然抗角蛋白抗体384与白念珠菌结合及对芽管生成的影响。方法采用ELISA和流式细胞仪检测单克隆天然抗角蛋白抗体384与白念珠菌结合,并将抗体与真菌共孵育,检测白念珠菌芽管生成的变化。结果ELISA和流式细胞仪检测均发现3B4可以与白念珠菌结合；相对于同型对照组,384作用组真菌芽管生成率显著下降,两组差异有统计学意义。结论单克隆天然抗角蛋白抗体3B4可以与白念珠菌结合并抑制其芽管生成,提示天然IgM在机体抗真菌天然免疫中可能具有一定的作用。
- 安金刚李巍付萌邢影刘玉峰
- 关键词：免疫球蛋白M念珠菌免疫
- 天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的噬菌体呈现的scFv的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 目的:构建并表达噬菌体呈现的天然抗角蛋白单克隆抗体(mAb)3B4的单链抗体(scFv),并测定其活性。方法:分别以pMD18TmAb3B4VH和pMD18TmAb3B4VL为模板进行PCR,扩增mAb3B4的VH和VL基因,然后将其依次插入噬菌体表达载体pscMH中。经DNA序列测定正确后,转化大肠杆菌,用辅助噬菌体VCSM13超感染诱导表达scFv;用ELISA检测其与亲本mAb3B4的抗原结合活性的改变。结果:对扩增的mAb3B4的VH和VL基因进行测序,结果表明VH基因与原序列完全一致,VL基因在骨架区FR1有1个碱基发生突变。用VCSM13超感染后能检测到scFv的表达,其与亲本一样具有多反应性,但抗原结合模式不完全相同。结论:成功地构建并表达了天然抗角蛋白mAb3B4噬菌体呈现的单链抗体,表达的scFv与mAb3B4的抗原结合活性有一定的差异,为探讨天然自身抗体的抗原结合模式奠定了基础。
- 管海宏付萌李巍夏汝山王刚刘玉峰
- 关键词：天然抗角蛋白自身抗体SCFV
- 天然抗角蛋白IgM调理巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的作用被引量：4
- 2005年
- 目的探讨天然抗角蛋白IgM对金黄色葡萄球菌的结合反应和介导调理吞噬的功能。方法ELISA法及间接免疫荧光法检测天然抗角蛋白IgM抗体3B4与金黄色葡萄球菌的结合。将3B4与金黄色葡萄球菌作用后与巨噬细胞共孵育,菌落形成实验及流式细胞仪分析3B4介导细菌的调理吞噬作用。结果 ELISA与间接免疫荧光均发现3B4可以与细菌结合,菌落形成实验显示3B4作用组菌落数量显著少于阴性对照组,流式细胞仪分析显示巨噬细胞对3B4作用后细菌的吞噬作用明显增强。结论天然抗角蛋白IgM抗体3B4可以结合并介导调理吞噬金黄色葡萄球菌,提示天然IgM在抗细菌天然免疫中具有一定的作用。
- 安金刚李巍付萌王刚李承新刘玉峰
- 关键词：免疫球蛋白M葡萄球菌金黄色葡萄球菌巨噬细胞吞噬IGM抗体间接免疫荧光法
- 抗白念珠菌人鼠嵌合抗体真核表达载体的构建与表达
- 2008年
- 目的构建抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达。方法从含有单克隆天然抗白念珠菌抗体3B4可变区基因的载体pMDT-V2H和pUC-VL中PCR克隆单抗3B4的可变区VH和VL基因,依次插入含有人免疫球蛋白κ轻链恒定区基因和γ1重链恒定区基因的真核表达载体pMH-CA。经DNA序列测定正确后,电穿孔转染J558L细胞进行嵌合抗体表达,RT-PCR,ELISA方法对抗体表达进行鉴定。结果成功构建了抗白念珠菌人鼠嵌合抗体,转染真核细胞后RT-PCR显示人鼠嵌合抗体重链和轻链mRNA的转录,ELISA证实了抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的表达以及对白念珠菌的识别。结论成功构建抗白念珠菌人鼠嵌合抗体的真核表达载体,并表达出具有结合活性的基因工程抗体。
- 周澜华安金刚李巍刘玉峰
- 关键词：嵌合抗体白念珠菌基因工程抗体
