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花生红衣中B型二聚体原花青素对丙烯酰胺的抑制效果被引量：4: 2016年; 丙烯酰胺是一种公认的神经毒素和致癌物,近年来植物多酚抑制高淀粉食物热加工过程中丙烯酰胺形成的研究是食品安全领域研究工作的一个热点。为了研究低聚体原花青素对丙烯酰胺形成的抑制效果,以花生红衣原花青素(Peanut Skin Procyanidins,PSPc)混合物经过凝胶色谱分离后得到的第二个级分PSPc-2为原料,通过反相高效液相色谱-二极管阵列检测器(RP-HPLC-DAD)分析比较其在化学模拟体系和炸薯条食品体系中对丙烯酰胺的抑制效果,并通过反相高效液相色谱-质谱联用技术(RP-HPLC-ESI-MS/MS)对PSPc-2进行鉴定。结果表明:PSPc-2在化学模拟体系和炸薯条食品体系中对丙烯酰胺的抑制均呈非线性的浓度-抑制率关系,在化学模拟体系中,PSPc-2添加浓度为0.05 mg/m L时抑制率可达66.47±1.15%,在炸薯条食品体系中PSPc-2浸渍浓度为0.1 mg/m L时抑制率可达70.59±2.34%;PSPc-2由两种B型原花青素二聚体组成。; 周婷雷润梅赵晓丹杨婧陈洋刘睿; 关键词：花生红衣丙烯酰胺

高粱原花青素四聚体干预Streptococcus mutans Ingbritt(c)体外黏附途径及机理被引量：1: 2014年; 以高纯度高粱原花青素(sorghum procyanidins,SPC)混合物和高粱原花青素四聚体(sorghum procyanidins tetramers,SPC-Ⅲ)为原料,采用荧光标记的方法比较其抑制Streptococcus mutans Ingbritt(c)黏附效果,在此基础上结合双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)以及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-associated laser dissociation/ionization time of fl ight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)探究其干预S.mutans Ingbritt(c)黏附的主要途径并期望阐明其作用机理。结果表明:SPC-Ⅲ比SPC混合物抑制S.mutans Ingbritt(c)体外黏附的效果更强,SPC-Ⅲ处理细菌的抑制效果强于处理获得性膜的抑制效果,是其抑制细菌黏附主要途径;类葡萄糖基转移酶(glycosyltransferases,GTFs)活性蛋白(3.10-Ⅱ)经SPC-Ⅲ作用前后的2-DE图有明显差异,差异点均为S.mutans中的不同蛋白酶类,其中A24可能是一种新蛋白。; 黄曼蔡欣玉佳男唐翠娥刘睿; 关键词：荧光标记双向凝胶电泳基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱

响应面法优化高粱外种皮中原花青素的超声波辅助提取工艺被引量：9: 2012年; 采用超声波辅助提取高粱外种皮中原花青素,在单因素试验的基础上,通过响应曲面分析对提取工艺参数进行优化,最优工艺为提取时间65min、提取超声功率60W、提取温度56℃。在此条件下高粱外种皮中原花青素的理论提取得率达到1.789%,验证实验条件下实际最大值为(1.764±0.006)%,达到理论得率的98.6%;与未用超声辅助提取的方法[得率为(0.906±0.033)%]相比,得率增加了近1倍。; 黄曼徐丽嫚陈静涂世刘睿; 关键词：原花青素超声波提取响应曲面法

变形链球菌UA159葡萄糖基转移酶B催化活性区的基因克隆及表达被引量：1: 2015年; 为获得具有良好生物活性的可溶性葡萄糖基转移酶催化活性区(GTFB/CAT),根据NCBI上已发表的Streptococcus mutans UA159(血清型c)GTFB的DNA测序结果,按照GTFB/CAT两端的序列设计引物,利用PCR克隆技术钓取S.mutans UA159(血清型c)的GTFB/CAT基因,连入表达载体p ET-28b(+)中构成p ET-28b(+)-GTFB/CAT重组体,将重组载体转入大肠杆菌BL21(E.coil BL21)宿主菌中进行诱导表达,最佳诱导条件为37℃或30℃、4 h、诱导剂IPTG的浓度为1 mmol/L,产物经Ni2+-NAT树脂亲和层析纯化,得到了不可溶的GTFB/CAT包涵体,包涵体通过变性-复性最终得到可溶性蛋白,产物经SDS-PAGE分析表明,在44 ku处有一明显条带,与预期蛋白分子量一致,蛋白纯度约为80%,采用Somogyi法测得GTFB/CAT蛋白的比酶活为1.66 IU/mg。研究表明:成功克隆GTFB/CAT基因并通过在E.coil BL21原核体系中表达得到有生物活性的可溶性蛋白,为后续研究GTF的抗结剂及预防龋齿的效果及机理奠定了基础。; 玉佳男田晶李宝丽张永霞刘睿; 关键词：克隆

高粱外种皮原花青素四聚体对远缘链球菌6715粘附的影响被引量：1: 2017年; 本文研究高粱外种皮原花青素四聚体(sorghum episperm procyanidin tetramer,SEPT)对远缘链球菌6715(S.sobrinus 6715)初始粘附及其致龋毒力因子-葡萄糖基转移酶(glucosyltransferase,GTF)的抑制效果。采用唾液包被羟基磷灰石(saliva coated hydroxylapatite,SHA)体外模型研究SEPT对S.sobrinus 6715初始粘附的影响。通过PCR扩增S.sobrinus 6715 GTF-I的催化活性区(catalytic region,CAT)的基因片段到质粒Pgex-4T-1中,转化至大肠杆菌T7 Express competent,IPTG诱导表达,纯化浓缩表达产物,获得目标蛋白GTF-I/CAT。再用不同浓度SEPT处理GTF-I/CAT,根据其水不溶性多糖产量(water insoluble glucosyltransferase,WIS)评价SEPT对GTF-I/CAT酶活力的抑制。实验结果表明,SEPT能够有效抑制S.sobrinus 6715在SHA的初始粘附,并具有一定的浓度效应关系;通过基因克隆表达获得的GTF-I/CAT蛋白酶活为8.446 m IU,产多糖能力为1.603 mg/(mg·h)。SEPT能明显抑制GTF-I/CAT产生WIS(p<0.01)。说明SEPT既可以有效抑制S.sobrinus 6715的初始粘附过程,又可以通过作用GTF-I的CAT区减少WIG的合成,抑制蔗糖依赖性粘附减少S.sobrinus 6715在牙齿表面的粘附聚集,从而干预龋齿的发生。; 田晶鲁群鲁亮张永霞刘睿; 关键词：粘附葡萄糖基转移酶

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国家自然科学基金(31271939)