山东省医药卫生科研项目(2005HZ059)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：葛伟鞠秀丽沈柏均李栋王海莲更多>>
- 相关机构：山东大学第二医院山东大学更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐血造血干细胞向巨核细胞诱导分化的研究被引量：5
- 2010年
- 目的:建立脐血CD34+造血干细胞向巨核细胞诱导分化的体系,探讨最佳的扩增方法。方法:免疫磁珠法分离获得CD34+细胞培养在无血清无基质培养液中,采用TPO加SCF加IL-3加IL-6、TPO加SCF加IL-3、TPO加SCF3种不同因子组合对其诱导分化及扩增。收集3、7、10、14d的扩增产物,运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志;流式细胞术(FCM)检测巨核细胞的凋亡;并对巨核细胞形成单位(CFU-MK)及DNA含量进行检测。结果:分离获得的CD34+细胞在体外可以有效扩增,随培养时间的延长CD34+/CD41+细胞数第7天达最高值,之后逐渐下降;而CD41+、CD42b+、CD61+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高。加入IL-3和IL-6后,Annexin Ⅴ阳性细胞由(8.26±2.49)%降至(3.51±1.24)%。CFU-MK的数量在第10天时最高,且8倍体及8倍体以上的巨核细胞所占的的百分比增加,即成熟产板型巨核细胞增加。结论:脐血CD34+造血干细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及有效扩增。3种因子组合中TPO加SCF加IL-3加IL-6组扩增效率最高。
- 王海莲鞠秀丽葛伟李栋沈柏均
- 关键词：脐血CD34+细胞巨核细胞分化
- 脐血CD34^＋细胞向巨核细胞的分化扩增及基因的表达变化
- 2009年
- 目的研究脐血CD34+细胞向巨核细胞的诱导分化及体外扩增,并观察此过程中巨核细胞特异性基因表达的变化。方法免疫磁珠法分离获得CD34+细胞培养在无血清无基质培养基中,采用TPO+SCF+IL-3+IL-6、TPO+SCF+IL-3、TPO+SCF三种不同因子组合对其诱导分化及扩增。收集3、7、10、14 d的扩增产物,运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志;流式细胞术(FCM)检测巨核细胞的凋亡;对巨核细胞进行DNA含量检测以及荧光定量PCR检测特异性基因表达的变化。结果分离获得的CD34+细胞在体外可以有效扩增,随培养时间的延长,CD34+/CD41+细胞数第7天达最高值,之后逐渐下降;而CD41+、CD42b+、CD61+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高。DNA含量检测发现,随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加。三种因子组合中TPO+SCF+IL-3+IL-6组扩增效率最高。荧光定量PCR显示转录因子GATA-1、NF-E2、TXS、GPIIb和HPRT在第7天表达量最高,之后下降。凋亡转录因子APAF-1随培养天数的延长表达量增加。结论脐血CD34+细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及扩增,其基因表达的变化也支持这一结论。
- 王海莲鞠秀丽葛伟李栋沈柏均
- 关键词：脐血CD34^+细胞巨核细胞扩增
