国家自然科学基金(30471785)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
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- 相关机构：中南大学郴州市第一人民医院更多>>
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- 琥珀酸抑制人中性粒细胞黏附功能的实验研究
- 2009年
- 中性粒细胞是机体天然免疫系统的重要组成部分，黏附作用是其发挥各项生理功能的第一步。琥珀酸是脆弱拟杆菌等厌氧菌代谢过程中产生的一种短链脂肪酸，临床感染标本及体外培养基中浓度均较高。这些短链脂肪酸能使局部环境中氧化还原电势和pH值下降，抑制细胞的分裂增殖。本实验中，笔者拟通过观察琥珀酸对体外孵育的人外周血中性粒细胞黏附功能的影响，探讨其在脆弱拟杆菌致病中的作用。
- 任利成黄晓元
- 关键词：中性粒细胞琥珀酸短链脂肪酸脆弱拟杆菌天然免疫系统
- 脆弱类杆菌内毒素／脂多糖对正常人外周血单核细胞分泌肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的影响
- 2012年
- 感染和脓毒性休克，至今仍然是严重烧（创）伤或大手术后患者面临的严重问题，是影响创面愈合的关键因素[1]。此时患者免疫力下降，厌氧菌所致脓毒症的发生率呈上升趋势，脆弱类杆菌等条件致病菌在其中占较大比例，成为严重烧伤常见的并发症和死亡原因之一。
- 马铮铮任利成黄晓元
- 关键词：脆弱类杆菌白细胞介素1Β肿瘤坏死因子Α细胞分泌内毒素单核
- TREM-1在脆弱类杆菌脂多糖诱导单核细胞炎症反应中的作用被引量：3
- 2007年
- 脂多糖（LPS）与免疫细胞表面相应的受体结合后可引发一系列信号转导进而诱生大量炎性介质，导致全身炎症反应综合征（SIRS）或脓毒症。以往的研究多以大肠杆菌LPS为对象，对于临床厌氧菌感染中最重要的致病菌脆弱类杆菌（bacteroides fragilis，B．fragilis的LPS研究较少。髓系触发受体-1（TREM-1）是新近发现的表达于单核／巨噬细胞等髓系细胞表面的激活型受体，能在细菌或LPS等的刺激下触发髓系细胞产生大量炎性因子，从而在炎症反应的触发和放大过程中起重要作用。本文拟通过体外单核细胞炎症反应模型，观察TREM-1在转录及翻译水平的表达情况，以探讨其是否参与脆弱类杆菌LPS所致炎症反应。
- 闵安杰杨兴华张自功马铮铮周捷黄晓元
- 关键词：TREM-1脆弱类杆菌脂多糖诱导单核细胞髓系细胞受体结合
- 髓系细胞触发受体1在烧伤后早期患者外周血单核细胞中的表达被引量：7
- 2007年
- 目的了解髓系细胞触发受体1(TREM-1)在烧伤后早期患者外周血单核细胞中的表达情况,并探讨其意义。方法选择8例健康志愿献血者(健康对照组)及伤后48 h内入院的29例轻、中度烧伤患者(烧伤1组),9例重度、特重度烧伤患者(烧伤2组),采集其外周血分离单核细胞。半定量反转录-PCR法检测单核细胞TREM-1 mRNA的表达,流式细胞术检测细胞表面TREM-1蛋白的表达。酶联免疫吸附测定法检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量。结果健康对照组、烧伤1组、烧伤2组外周血单核细胞中TREM-1 mRNA表达量分别为0.74±0.13、1.24±0.09、1.46±0.07,细胞表面TREM-1蛋白表达率分别为(9±4)%、(51±6)%、(71±7)%。烧伤1组、烧伤2组以上2项指标及血浆中TNF-α、IL-1β含量均较健康对照组明显升高(P= 0.000)。3组受试人员血浆中TNF-α、IL-1β的含量与TREM-1 mRNA表达水平呈显著正相关(r_s= 0.68、0.72,P=0.000)。结论严重烧伤后早期患者外周血单核细胞中TREM-1表达增高,这一变化与炎性因子分泌相关;TREM-1参与了烧伤后急性炎性反应的发生与发展。
- 闵安杰张丕红肖目张任利成张明华岳丽青黄晓元
- 关键词：烧伤单核细胞白细胞介素1
- 脆弱类杆菌脂多糖(LPS)对正常人外周血单个核细胞分泌IL-10及凋亡的影响被引量：1
- 2010年
- 目的通过研究脆弱类杆菌LPS对正常人外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10及凋亡的影响,探讨脆弱类杆菌感染的机制,为临床上防治厌氧菌感染提供科学的理论依据。方法采用脆弱类杆菌临床分离菌和标准菌株(NCTC9343)提取的LPS,以不同浓度梯度作用于正常人外周血单个核细胞,24h后收集培养细胞上清液,运用ELISA法检测细胞上清液中IL-10的含量变化,溴乙啶-吖啶橙染色检测凋亡百分率。结果脆弱类杆菌LPS对正常人PBMCIL-10分泌有显著刺激作用,并能诱导其凋亡(P<0.01)。脆弱类杆菌临床分离菌与标准菌株LPS对正常人PBMC分泌IL-10及凋亡具有相同效应,两组之间无明显差异(P>0.05)。结论脆弱类杆菌LPS对正常人PBMIL-10的分泌有刺激作用,并能诱导其凋亡。
- 周捷黄晓元
- 关键词：脆弱类杆菌LPSIL-10凋亡
- 髓系触发受体-1在脆弱类杆菌诱导小鼠脓毒血症中的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体(Lentivector,LV)TREM-1 vshRNA对脆弱杆菌脓毒血症小鼠脾脏中促炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达及NF-κB通路的影响。方法将清洁级BALB/c雄性小鼠分成4组,即正常对照组(C组),脆弱类杆菌脓毒症模型生理盐水组(S组),TREM-1 vshRNA干扰实验组(T组)和GFPvshRNA干扰实验组(G组)。观察各组中小鼠脾内TREM-1,TNF-α,IL-1β,lL-6的蛋白表达以及IkBa,pDAP12,NF-κB p65的表达情况的变化。结果与C组比,T组TREM-1 mRNA及蛋白表达均有显著增加(P<0.01);T,G,S组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较C组显著增加(P<0.01);T组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较S,G组明显降低(P<0.01)。S组脾细胞中的pDAP12和核内NF-κB p65蛋白表达水平明显增强,IκBa蛋白表达水平降低;而T组与S组比较,pDAP12和NF-κB p65蛋白的表达水平显著下调。结论小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体可选择性抑制TREM-1表达,下调脆弱类杆菌诱导的促炎症因子的分泌,而转染可能是通过下调DAP12的表达,稳定IkBa/NF-κB复合物,抑制TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8基因的转录,而对脆弱类杆菌脂多糖炎症反应产生抑制作用。
- 宋达疆黄晓元杨兴华肖目张王双
- 关键词：脓毒症髓系细胞触发受体-1慢病毒载体
- 髓系触发受体-1基因RNAi慢病毒载体的构建及功能初步检测被引量：3
- 2009年
- 目的:构建髓系触发受体-1(TREM-1)基因RNAi慢病毒载体,探讨TREM-1在脆弱类杆菌所致炎症反应中的作用。方法:根据小鼠TREM-1 mRNA序列选择4个靶序列并设计合成4对双链DNAoligo,其两端含酶切位点黏端,同时合成1对阴性对照双链DNA oligo;将以上5对双链DNA oligo退火后连入pGCSIL-GFP载体,经PCR及测序鉴定后,将以上质粒分别与包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染Raw264.7细胞后,运用real-time PCR和ELISA检测TREM-1 mR-NA和蛋白表达水平。实时定量PCR和ELISA观察干扰TREM-1后脆弱杆菌内毒素引发的Raw264.7细胞内毒素血症模型中TREM-1的表达变化。结果:PCR和测序证实目的双链DNA oligo片段已被准确克隆到pGCSIL-GFP载体;各质粒与包装质粒共转染293T细胞后产生了高滴度的慢病毒颗粒;各组慢病毒感染Raw264.7细胞后均可以显著抑制TREM-1的表达,以pGCSIL-GFP/Lenti-1组效果最明显。在脆弱杆菌内毒素引发的体外细胞内毒素血症模型中TREM-1表达明显增高,实时定量PCR表明慢病毒干扰载体能显著抑制模型中TREM-1的表达。结论:成功构建了小鼠TREM-1基因RNAi慢病毒载体,所构建的慢病毒载体能够抑制脆弱类杆菌内毒素所诱导的TREM-1的表达。
- 宋达疆黄晓元杨兴华肖目张王双
- 关键词：RNAI慢病毒载体脆弱类杆菌
