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国家自然科学基金(31201237)

作品数:10 被引量:22H指数:3
相关作者:官丽莉李校堃李海燕崔琪武云云更多>>
相关机构:吉林农业大学通化市第一中学吉林中粮生化有限公司更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 10篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 4篇农业科学
  • 3篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 8篇红花
  • 2篇蛋白
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇油体
  • 2篇植物
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇冻干
  • 1篇冻干粉
  • 1篇叶绿
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇原核表达
  • 1篇植物表达
  • 1篇植物表达载体
  • 1篇植物表达载体...
  • 1篇植物防御
  • 1篇植物防御素
  • 1篇制备及稳定性
  • 1篇质粒
  • 1篇生物胁迫

机构

  • 10篇吉林农业大学
  • 2篇通化市第一中...
  • 1篇东北师范大学
  • 1篇吉林中粮生化...

作者

  • 10篇官丽莉
  • 8篇李校堃
  • 6篇李海燕
  • 5篇崔琪
  • 4篇武云云
  • 2篇滕孝花
  • 2篇杨晶
  • 1篇姜潮
  • 1篇杜林娜
  • 1篇郭咏昕
  • 1篇刘树明
  • 1篇高红桃
  • 1篇张雪
  • 1篇陈昱
  • 1篇韩雨彤
  • 1篇齐冬梅

传媒

  • 3篇中草药
  • 2篇生物技术通报
  • 2篇吉林农业大学...
  • 1篇中国中药杂志
  • 1篇中国油料作物...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2022
  • 1篇2020
  • 2篇2018
  • 5篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2013
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
植物防御素基因家族结构、功能及调控研究进展被引量:2
2018年
防御素(Defensins,DF)是抗菌肽家族中最古老的一员。植物防御素是一类包含45-54个氨基酸残基,含有半胱氨酸(Cys)稳定的αβ模序,与哺乳动物及昆虫抗菌肽的亲缘关系非常密切,大部分植物防御素在体内被合成为具有信号肽序列的前体,并被分泌到胞外空间。植物防御素在宿主防御系统中起重要作用,不仅可抑制一系列的植物、动物及人类体内的细菌、真菌,还可杀伤一些肿瘤细胞及病原虫。植物防御素广泛存在于植物的花、茎、叶、果实、根和种子中,具有抗菌、抗肿瘤、抑制酶活、作为离子阻断剂和增加耐受性的功能,可作为新型的杀菌剂或新型的抗生素类药物。随着抗生素导致的耐药菌株的出现,对植物防御素的研究就显得尤为重要,特别是因其有效的抗真菌活性,植物防御素在作物抗病基因工程方面具有巨大的潜力。主要介绍了其发现、结构、类型、逆境调控功能、作用机制以及外源表达植物防御素基因等方面的最新研究进展,有助于将来对植物防御素基因家族进行更深入和全面的研究。
官丽莉崔琪李声钊董程李海龙彭建豪李校堃
关键词:植物防御素
红花水通道蛋白CtAQP1基因的克隆及功能分析
2022年
为了探究CtAQP1基因的功能,通过对前期红花干旱胁迫转录组数据的挖掘,利用RT-PCR方法从药用植物红花中首次克隆得到1条全长为888 bp的水通道蛋白基因序列,命名为CtAQP1,其编码295个氨基酸,预测分子量为30.2 kD,等电点为8.63,生物信息学分析表明,CtAQP1蛋白属于NIP亚家族。利用基因工程方法构建原核表达载体pET32a-CtAQP1,Western Blot分析验证重组蛋白的特异性表达。耐逆性分析表明,CtAQP1基因可降低大肠杆菌对0.8 mol/L山梨醇模拟干旱环境的耐受性。初步鉴定红花水通道蛋白的功能,为研究CtAQP1基因在红花抵抗非生物胁迫中的分子机制提供理论基础。
李海龙文秋菊郑志诚张瑶杨晶李校堃官丽莉
关键词:红花水通道蛋白蛋白表达
红花bZIP20转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建被引量:3
2016年
目的克隆红花花瓣中b ZIP20(Basic region/leucine zipper motif)基因,研究其在不同组织中的表达量并构建其植物表达载体。方法根据红花转录组测序结果挑选b ZIP基因的设计引物,以红花花瓣总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增b ZIP20基因开放阅读框(ORF)片段,利用RT-PCR法分析在红花不同组织以及尖孢镰刀菌侵染后红花根部b ZIP20基因的表达量,同时构建植物表达载体p BASTA-b ZIP20。结果 b ZIP20基因ORF长981 bp,编码326个氨基酸(Gen Bank登录号为KT692605)。红花b ZIP20与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与芝麻、野茶树的氨基酸序列相似性高达85.41%和83.99%。实时荧光定量PCR分析表明,b ZIP20基因在不同组织中的表达水平具有显著差异,在花中呈现高表达,而在其他组织中低表达。接种尖孢镰刀菌的红花根部组织中b ZIP20基因的表达显著上调。结论成功地对b ZIP20基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体p BASTA-b ZIP20。
官丽莉崔琪韩怡来顾天瑶武云云胡人阁杜林娜李海燕李校堃
关键词:红花RT-PCR植物表达载体
Overexpression of vacuolar proton pump ATPase(V-H^+-ATPase) subunits B, C and H confers tolerance to salt and saline-alkali stresses in transgenic alfalfa(Medicago sativa L.)被引量:5
2016年
The vacuolar proton pump ATPase(V-H^+-ATPase), which is a multi-subunit membrane protein complex, plays a major role in the activation of ion and nutrient transport and has been suggested to be involved in several physiological processes, such as cell expansion and salt tolerance. In this study, three genes encoding V-H^+-ATPase subunits B(Sc VHA-B, Gen Bank: JF826506), C(Sc VHA-C, Gen Bank: JF826507) and H(Sc VHA-H, Gen Bank: JF826508) were isolated from the halophyte Suaeda corniculata. The transcript levels of Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H were increased by salt, drought and saline-alkali treatments. V-H^+-ATPase activity was also examined under salt, drought and saline-alkali stresses. The results showed that V-H^+-ATPase activity was correlated with salt, drought and saline-alkali stress. Furthermore, V-H^+-ATPase subunits B, C and H(Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H) from S. corniculata were introduced separately into the alfalfa genome. The transgenic alfalfa was verified by Southern and Northern blot analysis. During salt and saline-alkali stresses, transgenic lines carrying the B, C and H subunits had higher germination rates than the wild type(WT). More free proline, higher superoxide dismutase(SOD) activity and lower malondialdehyde(MDA) levels were detected in the transgenic plants under salt and saline-alkali treatments. Moreover, the Sc VHA-B transgenic lines showed greater tolerance to salt and saline-alkali stresses than the WT. These results suggest that overexpression of Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H improves tolerance to salt and saline-alkali stresses in transgenic alfalfa.
WANG Fa-weiWANG ChaoSUN YaoWANG NanLI Xiao-weiDONG Yuan-yuanYAO NaLIU Xiu-mingCHEN HuanCHEN Xi-fengWANG Zhen-minLI Hai-yan
关键词:ALFALFA
红花2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆及表达分析被引量:4
2015年
目的克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础。方法根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花种子中克隆MPBQ MT基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建MPBQ MT与相关物种MPBQ MT的系统进化树,利用RT-PCR方法分析在红花种子不同发育时期MPBQ MT基因的表达量。结果MPBQ MT基因全长1 392 bp,命名为Ct MPBQ MT,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 038 bp,编码345个氨基酸。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白理论相对分子质量约为38 900。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的SAM蛋白功能结构域。结合其他物种的MPBQ MT基因构建系统树表明,红花MPBQ MT基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与向日葵和生菜同源性高达89%和86%。实时荧光定量PCR分析表明,MPBQ MT基因在红花开花后50 d的种子中表达量最高。结论成功地对MPBQ MT基因进行克隆及表达分析,为红花维生素E合成及调控机制研究奠定基础。
代斯宁王文玲韩怡来齐冬梅顾天瑶崔琪官丽莉李海燕李校堃
关键词:实时荧光定量PCR红花
红花脂质转运蛋白基因的克隆及表达分析
2016年
克隆红花脂质转运蛋白基因(Lipid transfer protein,LTP),并进行生物信息学及表达分析,旨为研究LTP在红花抵抗逆境胁迫中的作用提供依据。通过RT-PCR方法从红花种子中克隆LTP基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建LTP与相关物种LTP的系统进化树,利用Real-time PCR方法分析在红花不同号组织中LTP基因的表达量。结果显示,LTP基因ORF全长294 bp,编码97个氨基酸,相对分子量为7.46 kD,等电点为8.91。红花LTP蛋白包含一个长为29个氨基酸残基的信号肽序列;该蛋白含有一个丝氨酸磷酸化位点;三级结构预测表明该蛋白是由3个α-螺旋和一个β-转角简单的缠绕在无规则卷曲上的简单结构。分子进化表明,红花LTP基因与十字花科的甘蓝型油菜进化关系最近。通过荧光定量PCR对红花LTP基因的组织表达特异性进行分析,结果表明Ct LTP在不同组织的表达水平具有显著差异,在种子和花中呈现高表达,而在其他组织中低表达。
韩怡来崔琪武云云顾天瑶滕孝花胡人阁吴贯达官丽莉李海燕李校堃
关键词:红花荧光定量PCR生物信息学分析
红花非生物胁迫相关CtDHN1基因的克隆及功能研究被引量:2
2020年
脱水素(Dehydrins)属于LEA (Late embrygenesis abundant protein)蛋白家族的第二亚家族成员,是一类高度无序的响应逆境胁迫的蛋白。本研究通过对前期红花干旱胁迫转录组数据的挖掘,利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法从油料作物红花中首次克隆得到一条全长为957bp响应干旱胁迫脱水素基因序列,命名为CtDHN1,其编码318个氨基酸,预测分子量为31.1kDa,等电点为6.36。生物信息学分析表明CtDHN1蛋白属于YnSKn型脱水素,原核表达分析表明CtDHN1蛋白为可溶性蛋白,在IPTG浓度为0.4mmol/L,OD600值为0.8,诱导时间为4h,诱导温度为37℃时表达量最高。大肠杆菌耐逆性分析表明CtDHN1基因可耐受1.5mol/L山梨醇和1.3mol/L氯化钠的干旱和高盐环境。体外酶活测定表明CtDHN1蛋白在500mmol/L山梨醇和300mmol/L氯化钠环境下可保护LDH酶活性。本研究初步鉴定红花脱水素蛋白的功能,为研究CtDHN1基因在红花抵抗非生物胁迫中的分子机制提供理论基础。
董程杨景松刘紫嫣李海龙初卓文秋菊解子洋刘树明官丽莉
关键词:脱水素非生物胁迫原核表达LDH活性
红花生育酚环化酶基因的克隆及表达分析被引量:1
2016年
生育酚环化酶(tocopherol cyclase,TC)是植物Vit E生物合成途径的关键酶之一。该研究根据红花转录组数据,利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法从药用植物红花种子中克隆得到生育酚环化酶基因序列,命名为Ct TC,对其进行生物信息学分析,结果表明该基因开放阅读框(ORF)为1 524 bp,编码507个氨基酸,相对分子质量为62.9 k Da,等电点(theoretical p I)为5.01。跨膜结构分析表明TC存在跨膜结构。蛋白糖基化位点分析表明TC蛋白含有1个丝氨酸糖基化位点以及1个苏氨酸糖基化位点。亚细胞定位表明其定位于叶绿体中。利用荧光定量PCR检测红花不同发育时期种子以及干旱胁迫不同时间的红花叶片中TC基因的表达量,结果表明TC基因在红花的开花后50 d的种子中表达量最高,干旱胁迫6 d时TC基因的表达量达到最高值,随后下降,为TC基因在红花Vit E合成以及抵抗逆境胁迫中的功能研究奠定基础。
官丽莉崔琪韩雨彤武云云胡人阁顾天瑶李海燕李校堃
关键词:红花克隆
天然维生素E的研究进展
维生素E(Vatmin E)是一种脂溶性维生素,主要存在于植物油中,是非常重要的抗氧化剂之一。本文介绍了天然维生素E的结构、生理功能及检测方法,并对天然维生素E的开发现状和应用前景进行了探讨。
张雪官丽莉李海燕李校堃
关键词:维生素E生育酚
文献传递
金属硫蛋白2基因在红花中表达的初步研究
2016年
目的获得转金属硫蛋白2(metallothionein 2,MT2)红花植株,为MT药用蛋白的生产奠定基础。方法采用Nco I/HindⅢ酶切pEASY-oleosin-MT获得oleosin-MT融合基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT,进行PCR和双酶切鉴定。采用冻融法将重组质粒pOP-oleosin-MT转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转MT基因红花植株进行PCR检测及Southern blotting检测。结果成功构建了MT基因的植物油体表达载体pOP-oleosin-MT,获得了3株PCR检测呈阳性的转MT基因红花植株。结论建立了完善的红花再生体系,获得了转MT基因的红花植株。
官丽莉陈昱武云云滕孝花杨晶郭咏昕胡人阁李海燕李校堃姜潮
关键词:红花金属硫蛋白油体SOUTHERN重组质粒
共2页<12>
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