浙江省科技攻关计划(2005E60014)
- 作品数:3 被引量:22H指数:2
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- 相关机构:浙江省农业科学院山东农业大学更多>>
- 发文基金:浙江省科技攻关计划浙江省自然科学基金更多>>
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- 大肠杆菌O78原生质体制备与再生的研究被引量:2
- 2009年
- 以耐药标记的鸭大肠杆菌ZBO78(Eryr,Chls)为亲本菌株,在DNaseⅠ始终存在的条件下,采用溶菌酶-EDTA法制备原生质体,然后在高渗琼脂平板上再生。通过优化溶菌酶-EDTA的工作浓度与作用时间、原生质体不同的处理方式和再生培养基中蔗糖浓度等条件,摸索出ZBO78以0.2g/L溶菌酶作用20min后补加EDTA至终浓度为0.01mmol/L继续作用16min为最佳试验条件,并成功获得了91.94%的原生质体制备率和37.29%的再生率,为下一步进行融合试验提供了依据。
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- 关键词:大肠杆菌原生质体
- 微生物原生质体融合技术研究进展被引量:18
- 2008年
- 原生质体融合技术在遗传学、动植物远缘杂交育种、生物学、免疫学、兽医学以及医药、食品、农业等方面都有广泛的应用价值,文章就原生质体制备、再生及其融合过程中的影响因素做了综述,另外还对原生质体融合方法和融合子的筛选方法进行了比较,为选择适宜有效的诱导融合方法和筛选方法提供依据。
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- 关键词:原生质体融合影响因素
- Race法扩增4株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析被引量:3
- 2009年
- 利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3’末端真实序列,包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区(untranslated region,UTR)和poly(A)尾巴。测序结果表明,扩增的特异性片段长度为597nt(不包括polyA尾巴)。各毒株3’UTR均为315nt,位于终止密码子TGA之后,比对分析结果表明各毒株间的同源性较高;4株DHV 3’末端核苷酸序列(不包括polyA尾巴)之间的同源性为96.3%~100%,而与参考毒株之间的同源性为93.5%~99.7%。在系统发生进化树上,各毒株亲缘关系较近。
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- 关键词:鸭病毒性肝炎病毒POLY(A)