国家自然科学基金(81070150)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 不同浓度药物PTC124和G418对HERG通道无义突变体的作用
- 2014年
- 目的:通过对HERG基因无义突变体应用不同剂量PTC124和G418来观察其通道功能的恢复情况,并探讨药物的作用机制。方法:制备HERG基因R1014X突变体,将野生型(WT)HERG及R1014X分别瞬时转染至HEK293细胞,转染24 h后将其置入含不同浓度的PTC124和G418的培养液中孵育24 h。逆转录聚合酶链反应法检测各组细胞HERG信使核糖核酸(mRNA)的表达,蛋白印迹法检测野生型和R1014X给药前后通道蛋白的表达,全细胞膜片钳技术记录通道电流以评价HERG基因编码通道的功能性表达。结果:与野生型相比,R1014X突变体编码的通道蛋白的蛋白条带变短,蛋白量及mRNA水平无明显差异(P>0.05)。药物PTC124和G418均能恢复R1014X完整蛋白的表达,并呈剂量依赖性变化(P<0.05),PTC124的作用弱于G418(P<0.05)。药物干预后,R1014X突变体HERG通道的功能得到不同程度的恢复,其最大尾电流密度由(4.75±0.88)pA/pF分别增加至(9.62±0.73)pA/pF(PTC124,P<0.05)和(22.57±2.26)pA/pF(G418,P<0.05),G418作用使通道的半激活电压得到恢复(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:药物PTC124和G418能不同程度恢复HERG基因无义突变的结构和功能性表达,其恢复HERG基因的蛋白表达呈剂量依赖性变化。
- 于海云姚艳张银辉龚菁黄健浦介麟
- 关键词：HERG无义突变遗传性心律失常
- 抗生素治疗无义突变所致的遗传性疾病
- 2013年
- 无义突变可以导致多种遗传性疾病的发生。编码某一氨基酸的三联体密码经碱基替换后,产生提前终止的无义密码子,使肽链的合成提前终止,生成没有功能或者是功能不完整的蛋白质,导致了疾病的发生。研究发现,一些与核糖体结合的药物,如氨基糖苷类抗生素和某些人工合成的小分子物质,能够使氨基酰-tRNA通过提前出现的转录终止位点,产生完整的蛋白质并且恢复蛋白质的功能,从而改善疾病的症状,为治疗无义突变引起的遗传性疾病提供了广阔的前景。
- 于海云浦介麟
- 关键词：无义突变遗传性疾病氨基糖苷类抗生素
