广东省自然科学基金(9451008002003467)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 相关作者：余细勇李晓红单志新林秋雄朱杰宁更多>>
- 相关机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯胺酮对人心房肌细胞瞬时外向钾电流的影响被引量：1
- 2010年
- 本研究应用全细胞膜片钳技术观察氯胺酮对人心房肌细胞瞬时外向钾电流(transient outward potassium current,Ito)的影响,以了解其作用的部分机制。标本取自心脏瓣膜置换病人的右心耳,采用急性酶解法消化分离人心房肌细胞,室温下以全细胞膜片钳技术记录Ito,分别观察30、100、300和1000μmol·L-1的氯胺酮对Ito的作用。实验过程由pCLAMP9.0软件程序发放刺激和采集信号并存储于计算机中。结果表明,氯胺酮对Ito电流-电压曲线呈浓度依赖性抑制作用,在+50mV时,30、100、300和1000μmol·L-1的氯胺酮分别阻断Ito峰电流(13.62±0.04)%、(38.92±0.05)%、(72.24±0.10)%和(83.84±0.05)%,其半数有效浓度(IC50)为121μmol·L-1。但是100μmol·L-1氯胺酮对Ito的激活和失活曲线以及复活曲线均无明显影响。由此得知,氯胺酮呈浓度依赖性抑制人心房肌细胞瞬时外向钾电流。
- 邝素娟邓春玉李晓红刘晓颖林秋雄单志新杨敏余细勇
- 关键词：氯胺酮膜片钳技术人心房肌细胞瞬时外向钾电流
- 骨髓干细胞向心肌细胞分化的基因芯片分析被引量：1
- 2011年
- 目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)在特殊微环境下向心肌细胞分化的过程中基因表达的差异变化。方法:用密度梯度离心法培养BMSCs,原代培养乳鼠心室肌细胞,与BMSCs一起用半透膜共培养。共培养后2周提取细胞总RNA,进行22KHumanGenomeArray芯片检测。用RT-PCR检测心肌分化相关的基因的时序表达。结果:基因芯片检测BMSCs诱导前后差异基因的表达水平,发现诱导2周后表达明显升高(ratio>5)的基因有572个,表达下调(ratio<0.2)的基因有336个。基因的时序性表达发现HOP,Nkx2.5和GATA4基因在诱导前几乎没有检测到阳性表达,诱导后0.5周表达增强,1～2周表达达到高峰,维持一定水平后到4～8周表达呈下降趋势。心肌特异性基因β-MHC和ANF在0.5周开始出现,表达随时间逐渐增加,2周达到高峰。结论:分化诱导相关基因如IGF、FGF等的表达与心肌发育分化相关,GATA4和Nkx2.5等转录因子在微环境诱导心肌分化过程中起重要作用。然而心肌的分化实际上极为复杂,转录因子间相互作用的机制尚需进一步探讨。
- 李晓红林秋雄邓春玉符永恒单志新朱杰宁杨敏余细勇
- 关键词：间质干细胞心肌细胞细胞分化基因芯片
- 转染isl1基因促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化被引量：5
- 2012年
- 目的:Isli蛋白在心脏发生和多能心脏祖细胞分化调节中发挥着重要作用,本文旨在探寻转染isl1基因是否能提高骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力。方法:利用携带isl1基因的慢病毒(LVS-isl1)感染人骨髓间充质干细胞,通过Puromycin筛选获得稳定细胞株,并对其进行RT-PCR和Western blotting鉴定。以共培养为基础,用real-time PCR、Western blotting以及免疫荧光法检测Isl1蛋白的心肌诱导能力。结果:RT-PCR和Western blotting表明成功获得稳定细胞株BMSC-isl1,real time-PCR结果显示BMSC-isl1组较之BMSCs组和BMSC-vehicle组GATA结合蛋白4、NK2转录因子5、肌细胞增强因子2C和兰尼碱受体2的表达量分别提高了2.3、2.7、2.6和3.2倍;Western blotting以及免疫荧光法结果均提示BMSC-isl1组内心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白I和α-辅肌动蛋白的表达均比BMSCs组和BMSC-vehicle组要高。结论:转染isl基因的BMSCs不仅可以稳定表达Isli蛋白,而且在微环境共培养条件下,可以提高BMSCs向心肌细胞分化的能力。
- 李杏肖李晓红林秋雄肖定璋刘晓颖单志新朱杰宁麦丽萍夏慧苏余细勇
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢病毒心肌样细胞
