江苏省农业科技自主创新基金(0610808-2)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 相关作者：何孔旺欧阳伟诸玉梅夏兴霞潘群兴更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 重组表达口蹄疫病毒T细胞表位猪细小病毒病毒样颗粒的制备被引量：6
- 2010年
- 为增强表位疫苗的免疫原性,本研究将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中编码T细胞表位肽(aa 21～aa 40)序列连接于猪细小病毒(PPV)VP2的5'端,并插入到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转化含有穿梭载体Bacmid的E.coli DH10Bac中,经蓝白菌落筛选获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转染昆虫草地夜蛾(Sf9)细胞,并在Sf9中进行了表达。电镜观察显示,表达的重组蛋白能够自我组装成病毒样颗粒rPPV∶VLP(FMDV)。用间接免疫荧光试验(IFA)、western blot分析表明,表达产物具有与PPV VP2天然蛋白相似的免疫原性。小鼠免疫实验证实,在低浓度FMDV抗原下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应;而且该病毒样颗粒能诱导机体产生抗FMDV特异性细胞免疫反应。
- 潘群兴王永山何孔旺欧阳伟王晓丽诸玉梅夏兴霞
- 关键词：猪细小病毒病毒样颗粒O型口蹄疫病毒T细胞表位
- 重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建
- 将O型口蹄疫病毒（FMDV）VP1上T细胞表位肽（第21～40残基）基因嵌合在PPV VP2的N端,克隆到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV VP1:PPV VP2,...
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