国家自然科学基金(30471734)
- 作品数：9 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：武汉大学清华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 电纺丝:纤维取向的研究进展与应用被引量：4
- 2006年
- 电纺丝从20世纪末兴起之后,短短十年时间,其加工材料就从十几种发展到百种以上,应用领域也从早期的过滤、传感等少数几个方向扩展到生物医药、组织工程、高效催化、光电器件、航天器材等多个部门和学科。
- 王波胡平曲欣刘念
- 关键词：电纺丝纤维取向生物医药光电器件
- 温固化水凝胶复合细胞外基质与膀胱平滑肌细胞的相容性
- 2007年
- 目的:选用膀胱平滑肌细胞为实验细胞,评估细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架材料的生物相容性。方法:实验于2005-02/05在武汉大学人民医院泌尿外科研究室完成。①实验分组:实验分为4组。细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组:细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架种植平滑肌细胞;单纯细胞外基质组:单纯细胞外基质种植平滑肌细胞;阴性对照组:单纯培养平滑肌细胞;空白对照组:无细胞培养液。②实验操作:种植细胞前先用培养液将支架材料预湿,取第3代兔膀胱平滑肌细胞悬液(1×108L-1)50μL缓慢接种于材料上。③实验评估:培养2d后倒置相差显微镜下观察细胞黏附、生长情况以及扫描电镜下观察细胞在材料上的空间生长情况;培养5,10d取细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组、单纯细胞外基质组材料,进行细胞计数,观察细胞黏附数量;培养1,3,5,7d时MTT法检测细胞的活力。结果:①相差显微镜下可见细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合材料为红染的网状结构,纤维较粗,网孔直径较小,未见到细胞碎片;种植平滑肌细胞后6h,可见细胞紧密黏附于材料表面;种植平滑肌细胞后12h,可见细胞已伸展,有多个突起;培养3d时,贴附于材料的细胞数量增加,细胞增殖明显。②扫描电镜下可见发育良好的细胞附于材料上,伪足沿纤维伸展,附着牢固,细胞间连接紧密,可见到细胞外基质分泌。③膀胱平滑肌细胞在单纯细胞外基质上黏附性良好,黏附率为87.6%,复合温度敏感性水凝胶后的细胞外基质表面黏附能力较之增强,黏附率为96.7%。④细胞活力:细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组、阴性对照组细胞活力(A)高于单纯细胞外基质组,差异有显著性意义(P<0.05,0.01),培养1,3,5d细胞外基质/温度敏感性水凝胶复合支架组细胞活力(A)低于阴性对照组,培养7d高于阴性对照组,差异�
- 姚颐张杰方立叶达夫彭建平李强
- 关键词：水凝胶细胞外基质复合支架材料生物相容性
- 聚β-羟基丁酸酯为载体鼠肾上腺细胞肾被膜下移植研究被引量：2
- 2007年
- 肾上腺皮质功能减退的患者可以应用激素替代治疗，但替代治疗时，患者需终身服药、剂量难于掌握。肾上腺细胞以其来源丰富、可长期保存和弱免疫原性，而有可能成为治疗肾上腺皮质功能不全的理想方法。我们以聚β-羟基丁酸酯（PHB）为载体将体外培养的肾上腺细胞进行肾被膜下移植，为临床上应用肾上腺细胞移植提供依据。
- 何上进张孝斌胡平张杰杨吉伟程帆
- 关键词：聚Β-羟基丁酸酯肾上腺细胞激素替代治疗肾上腺皮质功能减退肾上腺皮质功能不全
- 肾上腺皮质细胞移植研究进展
- 2009年
- 为治疗各种原因引起的肾上腺皮质功能不全，人们进行了肾上腺移植的探索，时至今日，临床疗效并不理想。当前学者主要以皮质细胞为研究对象，探讨肾上腺细胞如何再生，如何促进其再生及如何将干细胞诱导分化为肾上腺皮质细胞的问题。现就以上进展作一综述。
- 方立张杰
- 关键词：肾上腺皮质细胞移植
- 两种不同方法培养大鼠肾上腺细胞的比较
- 2009年
- 目的观察胶原凝胶三维培养对肾上腺细胞形态和功能的影响。方法分离SD大鼠乳鼠肾上腺细胞，于自制鼠尾Ⅰ型胶原凝胶中培养14d，与传统平面培养的肾上腺细胞相对比，比较两者在细胞形态、细胞增殖率、蛋白表达和分泌功能方面的差异。结果两种培养方式下，肾上腺细胞均能表达其特异性细胞色素氧化酶CYP11B1和CYP11B2。原代培养8d后，三维胶原凝胶培养大鼠肾上腺细胞的增殖率显著高于平面培养，至第14天，胶原凝胶中培养的肾上腺细胞增殖率为16．6％，而传统平面培养的仅为2．9％。胶原凝胶中培养的肾上腺细胞分泌功能维持时间更长，第14天其培养液中皮质酮和醛固酮浓度分别为（278．33±38．20）μg/L和（133．85±38．20）ng／L，而相应的平面培养肾上腺细胞分泌皮质酮和醛固酮浓度分别为（160．35±28．12）μg／L和（74．03±12．12）ng／L，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胶原凝胶中三维培养肾上腺细胞更有利于细胞功能的维持。
- 方立张杰杜贤进李又空彭建平
- 关键词：肾上腺细胞
- 以聚β-羟基丁酸酯为支架的肾上腺细胞移植形态学研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨以聚β-羟基丁酸酯(PHB)为支架的肾上腺细胞移植后的形态学变化。方法分离Wistar大鼠的肾上腺细胞,接种至改性的PHB上,然后移植至切除双侧肾上腺的大鼠的后肢肌间隙中,并设单纯双侧肾上腺切除的对照组及假手术组。观察术后第2、4、8周时移植局部的组织学变化,免疫组化染色观察移植局部CD3表达。结果组织学观察显示,随着时间的推移,移植物的组织反应逐渐变小,PHB逐渐降解,肾上腺细胞趋向组织化;超微结构观察显示,移植的肾上腺细胞保持着同正常肾上腺细胞相似的结构;免疫组织染色显示,移植的肾上腺细胞组织化后其CD3的表达与正常肾上腺组织相似(P>0.05)。结论以PHB为支架的肾上腺细胞移植,移植物在体内可存活,且呈现明显的组织化,移植的肾上腺细胞与正常肾上腺细胞的超微结构基本一致。
- 吴天鹏胡平张孝斌程帆李伟
- 关键词：肾上腺细胞移植聚Β-羟基丁酸酯活组织检查
- P21^(WAF1/CIP1)在大鼠肾上腺细胞培养中的表达及其意义
- 2006年
- 目的:探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂(CDI)P21在大鼠肾上腺细胞培养过程中的表达及其意义。方法:应用SP免疫组化法,检测细胞周期依赖性激酶抑制剂P21在大鼠肾上腺细胞培养不同时期表达的强度变化,同时测定肾上腺细胞分泌皮质酮功能的动态变化。结果:在肾上腺细胞体外培养过程中,第3,5,7天,P21蛋白表达逐渐减弱,第9,11天与第7天相比,P21蛋白表达重新增强(P<0.05),皮质酮浓度测定显示在第7天皮质酮浓度达到最高峰,随后逐渐下降,与P21蛋白表达的变化趋势一致。结论:肾上腺细胞体外培养在第7天肾上腺细胞增殖最旺盛,而且肾上腺分泌皮质酮达到最高峰。
- 何上进张孝斌张杰程帆刘毅杨吉伟葛名欢金化民
- 关键词：P21^WAF1/CIP1肾上腺细胞培养
- PCNA在大鼠肾上腺细胞培养中的表达及其意义被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)在大鼠肾上腺细胞培养过程中的表达及其意义。方法:应用SP免疫组化法,检测PCNA在大鼠肾上腺细胞培养不同时期表达的强度变化,同时测定肾上腺细胞分泌皮质酮功能的动态变化。结果:在肾上腺细胞体外培养过程中,第3、5、7天,PCNA蛋白表达逐渐增强,分别为(18±3)%、(38±5)%、(70±6)%,第9、11天与第7天相比,PCNA蛋白表达减弱(P<0.05),皮质酮浓度测定显示在第7天皮质酮浓度达到最高峰(101.2±15.8nmol/L),随后逐渐下降,与PCNA蛋白表达强度的变化趋势一致。结论:肾上腺细胞体外培养在第7天肾上腺细胞增殖最旺盛,而且肾上腺分泌皮质酮达到最高峰。
- 何上进张孝斌张杰程帆刘毅杨吉伟葛名欢金化民
- 关键词：PCNA肾上腺细胞培养
- 大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植治疗肾上腺功能不全的可行性。方法分离SD大鼠（出生3d内的乳鼠）的肾上腺细胞，置于自制鼠尾Ⅰ型胶原凝胶中培养，1周后移植到双侧肾上腺切除的成年雄性SD大鼠肾被膜下。术后每周取血1次，测量血浆皮质酮和醛固酮的水平；移植8周后处死大鼠，观察移植物的组织学特点；肾上腺细胞的增殖情况及CYP11B1和CYP11B2蛋白的表达情况；并与单纯肾上腺细胞移植组和正常对照组相比较。结果大鼠移植经胶原凝胶三维培养的肾上腺细胞后，80％（12／15）存活达8周；手术后血浆皮质酮水平显著高于同期单纯肾上腺细胞移植组，移植6～8周时，与正常对照组已无显著性差异；其醛固酮水平术后恢复缓慢，与单纯肾上腺细胞移植组的差异无统计学意义；移植后肾上腺细胞在胶原内生长良好，增殖率高，95％为束状带细胞，表达CYP11B1，而表达CYP11B2的球状带细胞仅占5％，未见炎症细胞浸润。结论肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后移植能形成有功能的血管化肾上腺组织，长期效果理想，有望成为临床治疗肾上腺功能不全的有效方法。
- 方立张杰彭建平李又空杜贤进韦梅红
- 关键词：肾上腺胶原
