贵州省科技厅工业攻关项目(sy[2009]3054)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：王建怡胡晓袁平朱加应张广云更多>>
- 相关机构：贵州省人民医院贵阳医学院重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：贵州省科技厅工业攻关项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素及雌激素受体α减轻谷氨酸对神经细胞的损伤被引量：5
- 2014年
- 目的:建立谷氨酸诱导的神经细胞损伤模型,观察雌激素及雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)对谷氨酸诱导的神经细胞损伤的作用。方法:原代培养小鼠大脑皮层神经细胞,神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)免疫组化染色鉴定神经元的纯度。建立谷氨酸诱导的神经细胞损伤模型。用前期实验中已构建成功的ERα重组慢病毒(V-ERα-RFP-flag)感染经谷氨酸诱导的神经细胞。实时荧光定量PCR和Western blotting检测ERαmRNA和蛋白表达水平。实验分为3组:(1)对照组:用空慢病毒(V-RFP-flag)感染经谷氨酸诱导的神经细胞;(2)雌激素组:用雌激素干预经谷氨酸诱导的神经细胞;(3)慢病毒组:用V-ERα-RFP-flag感染经谷氨酸诱导的神经细胞。流式细胞术检测各组神经细胞凋亡率;实时荧光定量PCR及免疫荧光染色检测各组神经细胞中N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartate receptor 1,NMDAR1)及囊泡膜谷氨酸转运体蛋白1(vesicular glutamate transporter protein 1,VGLUT1)的变化。结果:成功原代培养神经细胞,经NSE免疫组化方法鉴定神经元纯度大于90%。成功建立经谷氨酸诱导的神经细胞损伤模型。MOI=7的V-ERα-RFP-flag感染神经细胞72 h后,在荧光显微镜观察下可见到红色荧光表达,与对照病毒相比,能增加神经细胞中ERαmRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。与对照组相比,雌激素组和慢病毒组细胞凋亡率降低(P<0.05),且实时荧光定量PCR结果显示,雌激素组和慢病毒组的NMDAR1和VGLUT1 mRNA表达降低(P<0.05),免疫荧光实验结果提示NMDAR1和VGLUT1阳性的细胞数减少(P<0.01)。结论:雌激素和ERα能减轻谷氨酸对神经细胞的损伤效应,该保护作用可能通过抑制NMDAR1和VGLUT1的表达来实现。
- 朱加应张广云王建怡袁平胡晓
- 关键词：雌激素谷氨酸神经元
- 谷氨酸诱导新生小鼠皮层神经细胞损伤体外模型的建立被引量：6
- 2012年
- 目的:本实验建立谷氨酸(Glu)诱导神经细胞的损伤模型,观察Glu对神经细胞的兴奋毒性作用,探索Glu诱导神经细胞损伤模型的最佳浓度,为进一步研究Glu与神经系统疾病之间的关系奠定基础。方法:原代培养新生小鼠皮层神经细胞,鉴定成功后,采用不同浓度的Glu诱导神经细胞损伤,酶标仪测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率和死亡率,以获得Glu诱导神经细胞损伤模型的最佳浓度。结果:成功培养新生小鼠皮层神经细胞,Glu诱导神经细胞损伤呈浓度依赖性。实验中Glu浓度=100μmol/L,细胞凋亡率(%)为44.34±6.19而细胞死亡率仅为4.6±0.90说明在Glu浓度=100μmol/L诱导神经细胞,能得到较大的凋亡率和较小的死亡率。结论:成功建立Glu诱导的神经细胞损伤模型,验证Glu=100μmol/L为诱导神经凋亡的最佳浓度。
- 张广云胡晓袁平王建怡
- 关键词：谷氨酸神经细胞小鼠
- 雌激素对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的抗炎机制被引量：3
- 2011年
- 目的探讨雌激素减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)炎症反应的可能机制。方法用MOG35-55多肽诱发60只EAE小鼠模型,做去卵巢术。分为治疗组(n=30)和对照组(n=30),治疗组予雌激素治疗。比较两组EAE小鼠的临床症状评分。取脑和脊髓,行H-E染色观察病理学改变,实时荧光定量PCR及ELISA检测EAE小鼠CNS中白细胞介素(interleukin,IL)-17、IL-23、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)、IL-4水平。结果治疗组EAE小鼠与对照组相比临床症状减轻(P<0.05);H-E染色显示治疗组炎细胞浸润减少(P<0.05),实时荧光定量PCR及ELISA结果示治疗组CNS中IL-17、IL-23、TNF-α、IFN-γ表达降低而IL-4增加(P<0.05)。结论雌激素可能通过降低IL-17、IL-23、TNF-α、IFN-γ,增加IL-4,从而减轻EAE小鼠炎症反应。
- 胡晓朱加应黄伟琨万兴王建怡
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎雌激素炎症反应
- 雌激素治疗多发性硬化的可能机制被引量：2
- 2010年
- 多发性硬化（MS）是一种是以中枢神经系统血管周围炎性细胞浸润为主，可伴有多灶性白质脱髓鞘为病变特征的自身免疫性疾病。女性高发且初发年龄较早。女性MS患者妊娠末期病情可缓解，但产后伴随雌激素水平下降而病情加剧，提示体内高水平雌激素对女性MS患者具有保护作用。目前对MS尚无有效的治疗方法。此文就国内外有关雌激素及选择性雌激素受体调节剂治疗MS的可能机制进行综述，期望为相关领域的研究者提供参考。
- 胡晓王建怡秦新月
- 关键词：多发性硬化雌激素
