上海市卫生局科研基金(034124)
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- 转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测(英文)被引量：2
- 2009年
- 目的:定量检测转化生长因子-β(Transforming Growth Fac-tor-β,TGF-β)及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法:随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和II型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果:TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4.26×10-7±1.45×10-7和10.67×10-7±7.47×10-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1.08×10-10±0.68×10-10和8.23×10-11±6.63×10-11。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0. 003015 ±0. 0036和0. 000379 ±0.000281, TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5.33×10-5±5.05×10-5和1.002×10-5±9.04×10-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2.9±2.8,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7.5±1.4,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-βⅠ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高于相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中Ⅰ型、Ⅱ型受体表达的降
- 仲明沈炜付清张媛
- 关键词：转化生长因子-Β受体翼状胬肉实时荧光定量PCR基因表达
- 实时荧光定量PCR检测糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子β受体-1和受体-2基因表达(英文)被引量：2
- 2006年
- 目的:定量检测转化生长因子β受体-1(TransformingGrowthFactor-βreceptortype1,TβR1)和转化生长因子β受体-2(TransformingGrowthFactor-βreceptortype2,TβR2)编码基因在糖尿病大鼠视网膜中不同时相点的动态表达水平,以探讨转化生长因子β及转化生长因子β受体在糖尿病视网膜病变(DR)中的作用。方法:选择健康成年SD大鼠28只,随机分为正常对照组(CON)和糖尿病组(DM)。利用链尿佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病视网膜病变模型,制备RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TβR1和TβR2在不同时相点相对于内参照基因18s的相对mRNA含量。结果:TβR1在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000493±0.000133和0.000608±0.000232。TβR2在4,12wk时相对于18s的mRNA含量分别为0.000166±0.000057和0.000113±0.000049。TβR1基因表达水平随着病变进展呈上升趋势,TβR2在4wk时表达量较正常增加,到12wk时表达量又减少,逐渐恢复到正常水平。结论:糖尿病大鼠视网膜中TβR1和TβR2基因表达水平变化可能影响TGF-β信号的转导过程,TGF-β及其受体介导的信号转导通路在糖尿病视网膜病变中具有重要作用。
- 曹丹柳林沈炜
- 关键词：受体链尿佐菌素基因表达
- 实时荧光定量PCR检测糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子β受体Ⅰ和受体Ⅱ基因表达被引量：1
- 2006年
- 目的:定量检测转化生长因子βⅠ型受体(TβRⅠ)和Ⅱ型受体(TβRⅡ)编码基因在糖尿病大鼠视网膜中的表达,以探讨转化生长因子β及转化生长因子β受体在糖尿病视网膜病变中的作用。方法:选择健康成年SD大鼠28只,随机分为正常对照组和糖尿病组。利用链尿佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病视网膜病变模型,制备RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TβRⅠ和TβRⅡ在4周、12周时相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果:正常对照组TβRⅠ在4周、12周时相对于18S mRNA含量分别为0.000 332±0.000 088和0.000 344±0.000 232,TβRⅡ在4周、12周时相对于18S的mR-NA含量分别为0.000 099±0.000 0310、.000 103±0.000 049。糖尿病组TβRⅠ在4周、12周时相对于18S的mRNA含量分别为0.000 493±0.000 133和0.000 608±0.000 232,TβRⅡ在4周、12周时相对于18S的mRNA含量分别为0.000 166±0.000 057和0.000 113±0.000 049;TβRⅠ基因表达水平随着病变进展呈上升趋势,TβRⅡ在4周时表达量较正常增加,到12周时表达量又减少,逐渐恢复到正常水平。结论:TβRⅠ和TβRⅡ基因表达量的改变可能与糖尿病视网膜病变的发生发展有关。
- 曹丹柳林沈炜
- 关键词：转化生长因子Β受体转化生长因子Β实时荧光定量聚合酶链反应基因表达
- 实时荧光定量PCR检测大鼠视网膜中TGF-β受体Ⅰ和受体Ⅱ的基因表达
- 2007年
- 沈炜柳林满晓波曹丹
- 关键词：TGF-Β受体荧光定量PCR检测基因表达转化生长因子Β受体
- 转化生长因子-β2在糖尿病大鼠视网膜中基因表达的研究(英文)被引量：2
- 2008年
- 目的:糖尿病视网膜病变(diabetic retinophthy,DR)是糖尿病在眼部的主要并发症,为我国四大致盲眼病之一。DR的病理基础是微血管病变,研究其发生、发展的机理对预防和治疗这一疾病具有重要的临床意义。而转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一类能够调节细胞生长和分化的多肽,具有多种生物学作用。本研究选择转化生长因子-β2(TGF-β2)为研究对象,检测其在不同时相点糖尿病大鼠视网膜中的基因表达情况,观察和分析TGF-β2的动态表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变发生、发展中的作用机制。方法:选10w龄正常雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,用链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠建立糖尿病动物模型,血糖浓度大于16.7mmol/L定为糖尿病模型大鼠,于第4,8,12,16,20,24wk分别分离视网膜,液氮保存,应用RT-PCR检测糖尿病大鼠视网膜中不同时相点TGF-β2的基因表达。结果:(1)制备大鼠视网膜总RNA,甲醛变性凝胶电泳显示RNA样品完好无降解,能够用于基因表达分析。(2)用STZ成功诱导建立了大鼠糖尿病动物模型。(3)与正常对照组相比,糖尿病组大鼠视网膜中TGF-β2mRNA表达于4wk时升高,但统计学上差异无显著性(P>0.05);8wk时则下降,差异有显著性(P<0.05);12wk时仍下降,差异有显著性(P<0.05),较8wk时已出现上升趋势;16wk时与正常对照组无明显差异(P>0.05);20wk时则开始升高,但差异无显著性(P>0.05);24wk时继续升高,差异有显著性(P<0.05)。结论:TGF-β2的mRNA表达在糖尿病大鼠视网膜中较对照组于第8wk、12wk时明显降低,第24wk时明显升高,可以看出TGF-β2随时间变化呈双相性。一方面说明TGF-β作为一种重要的细胞生长调节因子的双向调控特点,另一方面也说明TGF-β2在DR中可能发挥着重要作用。
- 沈炜柳林
- 关键词：转化生长因子-Β2基因表达视网膜糖尿病大鼠逆转录聚合酶链反应
- 转化生长因子-β受体Ⅰ/Ⅱ在大鼠视网膜中基因表达的定量检测(英文)被引量：3
- 2008年
- 目的:定量检测转化生长因子-(受体Ⅰ(transforming growth factor-(typeⅠreceptor,TβRⅠ)和受体Ⅱ(TβRⅡ)基因在大鼠视网膜中的表达水平,探讨TGF-(不同受体在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析视网膜中TβRⅠ和TβRⅡ的mRNA含量。结果:TβRⅠ相对于18S的mRNA含量是0.00034±0·00013,TβRⅡ相对于18S的mRNA含量是0.0001±0·00005,差异有统计学意义(P<0.01)。在大鼠视网膜中以TβRⅠ表达为主,TβRⅠ和TβRⅡ比值的平均值为3·9±1.7。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达,TβRⅠ的mRNA在视网膜中的表达明显高于TβRⅡ,提示这可能是与TβRⅠ及TβRⅡ本身结构特点和在TGF-β信号转导过程中的不同作用有关。当TβRⅠ/TβRⅡ比例改变时,可影响细胞对TGF-β的应答反应,可能是增殖性视网膜病变的发生机制之一。
- 沈炜柳林
- 关键词：转化生长因子-Β受体实时荧光定量PCR基因视网膜
- 大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测(英文)
- 2008年
- 目的:定量检测转化生长因子-β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)和转化生长因子-β2(TGF-β2)在大鼠正常视网膜中的表达水平,探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法:分离取出大鼠正常视网膜,抽提RNA并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。结果:大鼠视网膜RNA保持完好未被降解,能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0.0378±0.009,TGF-β1为0.0008±0.0003,前者明显高于后者,统计学上差异有显著性(t=12.37,P<0.001),说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主,TGF-β2和TGF-β1的比值为55.00±26.61。结论:实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网膜中以TGF-β2表达为主,提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导作用。
- 沈炜柳林
- 关键词：视网膜实时荧光定量PCR转化生长因子-Β基因表达
