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云南省自然科学基金(2001C0072M)
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
相关作者:
李卫东
张新文
姜述德
杨建勇
陈俊英
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相关机构:
中国疾病预防控制中心
卫生部北京生物制品研究所
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
云南省自然科学基金
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相关领域:
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作者
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廖国阳
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杨建勇
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姜述德
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张新文
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李卫东
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中华实验和临...
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2006
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双顺反子载体构建及其在基因联合免疫中的应用
被引量:5
2006年
目的为了便于多价DNA疫苗的制备和基因表达的研究。方法以pcDNA3·0为基础构建了pcDNA3·0BA双顺反子载体,将HBVpreS2S与HCVpc154基因插入pcDNA3·0BA构建了单价和双价质粒。质粒转染Cos-7细胞瞬时表达,并经肌肉免疫BALB/c小鼠测定抗体应答和淋巴细胞增殖能力。结果pcDNA3·0BA全长为6·4kb,具有两个外源基因表达单元,其调控元件均为CMV启动子和BGHpolA;两个表达单元中多克隆位点单酶切分别为:MCS1为EcoRⅤ、NotⅠ、XhoⅠ;MCS2为:KpnⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ。双价质粒在Cos-7细胞中preS2S与HCVpc154两个基因都同时表达,诱导小鼠产生了抗HBs和HCV核心蛋白抗体,抗体效价和淋巴细胞对抗原刺激的增殖能力单价和双价质粒相比差异不显著。结论pcDNA3·0BA双顺反子载体可以共表达多个基因,并诱导产生免疫应答。
廖国阳
毕胜利
杨建勇
李卫东
陈俊英
张新文
姜述德
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