辽宁省博士科研启动基金(20051039)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 相关作者：姜雅秋王秋月孙茵单忠艳张静更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学辽宁省人民医院更多>>
- 发文基金：辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA介导垂体瘤转化基因沉默抑制人泌乳素型垂体瘤凋亡的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)对人泌乳素型垂体瘤(HPA)细胞凋亡的影响。方法设计并合成针对PTTG的特异性siRNA序列,通过siPORTTM NeoFXTM转入原代培养HPA细胞,Western blot法检测siRNA作用后PTTG蛋白表达,DNA ladder和annexin V/PI染色法检测PTTG沉默对细胞凋亡的影响。结果siRNA转染组细胞内PTTG蛋白表达减弱;在CDDP诱导后,对照组和siRNA组均出现细胞凋亡,siRNA组DNA ladder形成不明显,Annexin V染色凋亡细胞数目减少,对照组细胞凋亡率为18.6%,而siRNA组仅为8.7%。结论垂体瘤转化基因对人泌乳素型垂体瘤细胞具有促进凋亡作用。
- 张静刘峥嵘阎英姜雅秋赵芳坤
- 关键词：垂体瘤转化基因SIRNA
- 注射IL-1β后大鼠下丘脑室旁核内CRH/AVP基因转录的动态变化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨IL-1β对下丘脑室旁核(PVN)内促肾上腺皮质素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响。方法麻醉下于Wistar大鼠右心房内留置导管,48h后将清醒大鼠分为5组,分别于右心房内注射IL-1β(1.4μg/kg)或生理盐水(300μl)后于15、120min后断头,以及无任何处置的空白对照组。取各组大鼠躯干血,采用放射免疫分析法测定促肾上腺皮质激素(ACTH)和AVP的浓度。利用[35S]UTP、[35S]CTP双标记RNA探针采用原位杂交组织化学方法检测各组大鼠PVN内CRH hnRNA、CRH mRNA和AVP hnRNA、AVP mRNA的表达。结果与空白对照组相比,血浆ACTH和AVP浓度均在注射IL-1β15min后显著增加(P<0.01),在120min后恢复正常。CRH hnRNA表达水平在注射IL-1β15min后显著增加(P<0.01),120min后恢复正常;CRH mRNA表达水平在注射IL-1β120min后显著增加(P<0.01)。小细胞内AVP hnRNA表达水平在注射IL-1β15min后显著增加(P<0.01),且持续增加至120min后,而大细胞内AVP hnRNA表达水平在注射IL-1β120min后显著增加(P<0.01);小细胞内AVP mRNA表达水平在注射IL-1β120min后显著增加(P<0.01),而大细胞内AVP mRNA表达水平在注射IL-1β15和120min后均无明显改变。结论共存于小细胞内的CRH、AVP基因转录的调控机制不同,而共存于大、小细胞内的AVP基因转录的调控机制也完全不同,表明不同细胞内同一基因转录的动态变化不同。
- 姜雅秋姜雷王秋月
- 关键词：白细胞介素1Β转录精氨酸加压素下丘脑室旁核
- 失血性休克后下丘脑室旁核内CRH和AVP基因转录的动态变化被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨失血性休克对下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响。方法:大鼠分别于失血后0、15、30、60、120min断头;RIA法测血中激素水平;应用[35S]标识的RNA探针进行原位杂交实验,分析失血后PVN内CRH和AVP基因转录的动力学变化。结果:血中促肾上腺皮质激素(ACTH)及AVP于失血后15min达高峰(P<0.01),失血后60min时基本恢复到基础水平;PVN内CRHh nRNA在失血前几乎无表达,于失血后15min表达量已显著升高(P<0.01),30min达峰值(P<0.01),120min内基本恢复,失血前CRHmRNA在PVN就有大量表达,于失血后15min及120min两次有意义升高(P<0.01);失血前AVPhnRNA在PVN的小细胞领域基本没有表达,于失血后15min开始有意义增加(P<0.01),30min达峰值(P<0.01)后一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很少,失血后60min时其表达量有意义增加(P<0.01),并持续到失血后120min;失血前AVPhnRNA在PVN的大细胞领域就有大量表达,于失血后15min开始显著升高(P<0.01),并一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很多,失血后其表达量没有明显变化。结论:在失血性休克时共存于小细胞领域的CRH和AVP的基因转录的动态变化不同,分别存在于大小细胞两领域的AVP的基因转录的动态变化不同。
- 姜雅秋姜蕾孙茵单忠艳滕卫平
- 关键词：失血性休克促肾上腺皮质激素释放激素血管加压素基因转录
- RNA干扰PTTG基因对泌乳素型垂体瘤细胞凋亡的机制研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究RNA干扰垂体瘤转化基因(PTTG)对泌乳素型垂体瘤细胞(HPA)凋亡的影响并探讨其作用机制。方法设计并合成靶定PTTG的特异性siRNA片段,转入体外培养HPA细胞,48h后验证siRNA的干扰效应;Annexin V/PI染色法观察PTTG基因沉默对细胞凋亡的影响;RT-PCR和Western blot检测caspase-3在mRNA和蛋白水平表达;caspase活性检测试剂盒检测caspase活性。结果设计合成的PTTGsiRNA转染后,能够有效抑制体外培养HPA细胞内PTTG表达实现其基因沉默效应;经浓度梯度CDDP诱导24h,转染和未转染细胞均产生细胞凋亡,caspase-3表达增强,并呈现出浓度依赖性;RNA干扰组细胞凋亡率低于未转染组,转染组caspase-3活化受抑,其caspase-3基因表达、蛋白活性均低于未转染组(P<0.05)。结论 PTTG在人泌乳素型垂体瘤中过表达,能通过激活caspase-3促进HPA细胞凋亡,可作为该肿瘤临床诊断和基因治疗的新靶点。
- 张静王秋月刘峥嵘姜雅秋刘洁崔泽实
- 关键词：垂体瘤转化基因细胞凋亡CASPASE-3
- 游泳应激对下丘脑室旁核CRH/AVP基因转录的影响及糖皮质激素的作用被引量：1
- 2008年
- 目的阐明游泳应激后下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的变化以及非生理剂量地塞米松对两基因转录的调节作用。方法生理盐水(100μl)或地塞米松(0.3mg/kg)腹腔内注射2h后,强迫游泳10min分别立即断头取血;血中促肾上腺皮质激素(ACTH)水平应用放射免疫分析法(RIA)测定。合成[35S]标记的RNA探针,应用原位杂交组织化学方法及放射自显影的方法检测CRH mRNA、CRH hnRNA、AVP mRNA及AVP hnRNA的表达量,放射自显影图像应用NIH Image软件系统解析。所有数据均输入数据库,以statview软件进行统计分析。结果强迫游泳10min血中的ACTH明显升高,而地塞米松可部分抑制这种由于游泳应激引起的血中ACTH升高。游泳应激10min时PVN内的CRH hnRNA表达量明显升高,地塞米松的投与完全抑制了CRH hnRNA的增加(P<0.01,n=5)。在单纯生理盐水和地塞米松注射组PVN小细胞内AVP hnRNA的表达量极少,游泳应激10min小细胞内AVP hnRNA的表达量无明显变化,地塞米松对此也无任何影响。结论糖皮质激素可以抑制急性应激所致的CRH基因转录。与此不同的是强迫游泳应激后PVN小细胞区AVP基因转录水平却并未立即增加,说明虽然AVP与CRH基因均表达于PVN区同一神经元,但是其转录调控机制却不尽相同。
- 姜雅秋孙茵姜雷王秋月单忠艳
- 关键词：促肾上腺皮质激素释放激素血管加压素基因转录
