博士科研启动基金(KYBS201103)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 针对休眠结核分枝杆菌重组疫苗rBCG-Rv3133c的免疫效应研究被引量：1
- 2013年
- 为获取针对休眠期结核分枝杆菌(MTB)疫苗,本研究以编码MTB休眠相关转录调节蛋白DosR的基因Rv3133c为靶基因构建重组卡介苗,并研究其免疫效应。在本研究中,将从结核分枝杆菌H37Rv基因组获取的Rv3133c插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMV361构建重组质粒,该重组体以电转化方式导入卡介苗基因组构建重组卡介苗rBCG-Rv3133c。将成功构建的重组卡介苗免疫BALB/c小鼠,分别在免疫后30d及180d,通过检测疫苗诱导的血清抗体滴度水平评价其诱导的体液免疫反应,通过检测免疫小鼠脾淋巴细胞受TB-PPD刺激后脾CD4+和CD8+T细胞的比例变化、细胞因子IFN-γ的表达评价重组疫苗诱导的细胞免疫。结果显示,重组疫苗rB-CG-Rv3133c可诱导产生较BCG更高水平的特异性抗体滴度、更强的CD4+和CD8+T细胞增殖反应及较高水平的IFN-γ表达量,提示该疫苗具有较强的研究应用价值。
- 邓仪昊何红云张本斯
- 关键词：重组卡介苗免疫效应
- 人细胞因子IL-12p70与结核分枝杆菌特异性抗原Ag85A融合基因重组卡介苗的构建及鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的:构建可表达融合蛋白IL-12p70-Ag85A的重组卡介苗,为结核病新疫苗的研制奠定基础。方法:以穿梭表达质粒pMV361为载体,构建重组质粒rpMV361-IL-12p70-Ag85A。将成功构建的重组质粒以电转化方式导入BCG基因组构建重组卡介苗rBCG-IL-12p70-Ag85A。通过抗生素筛选、重组卡介苗基因组PCR扩增及测序,以及western-blotting对重组卡介苗进行鉴定。结果:经鉴定,重组卡介苗成功构建,并可表达融合蛋白IL-12p70-Ag85A。结论:重组卡介苗rBCG-12p70-Ag85A构建成功,并可高效表达目的蛋白。
- 邓仪昊何红云张本斯
- 关键词：重组卡介苗AG85A
- 重组结核病疫苗rBCG-IL-12p70-TB10.4的免疫效应被引量：1
- 2014年
- 目的将成功构建的重组卡介苗rBCG-IL-12p70-TB10.4免疫BALB/c小鼠,研究其免疫效应,为结核病新疫苗的研发提供依据。方法将融合基因IL-12p70-TB10.4克隆入pMV361构建重组质粒,以电转化方式将重组质粒导入卡介苗基因组,构建重组结核病疫苗rBCG-12p70-TB10.4（rBCG-IT）。将此重组卡介苗免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后3、6、9和12周,用间接ELISA检测特异性抗体滴度水平,XTT检测脾细胞增值反应,流式细胞仪检测脾CD4＋T、CD8＋T细胞亚型的比例,ELISA试剂盒检测细胞因子的诱生。结果在免疫后3-12周,rBCG-IT组脾细胞增殖反应均明显强于其他各组（P〈0.01）,该组IFN-γ诱生量及CD4＋T细胞比例均显著高于rBCG-I组、rBCG-T组及BCG组（P〈0.01）。IgG2a/IgG1比值在免疫后各时间点的变化趋势提示rBCG-IT可诱导Th1型细胞免疫应答。结论重组疫苗rBCG-IT可诱导产生较BCG更强、持续时间更长的特异性细胞免疫应答,可对其免疫保护作用进行深入研究。
- 张丰经何红云邓仪昊杨开明
- 关键词：重组卡介苗免疫效应
- 结核分枝杆菌ESX-1分泌系统的研究进展被引量：2
- 2012年
- 目的:综述结核分枝杆菌ESX-1分泌系统的组成及其组分的作用。方法:检索并查阅结核分枝杆菌ESX-1分泌系统相关的文献,并进行归纳总结。结果:ESX-1系统是以分泌ESAT-6及CFP-10为特征的分泌系统,包括编码基因及十余种分泌调节基因。结论:结核分枝杆菌毒力分子ESAT-6及CFP-10的分泌是多种相关编码基因共同作用的结果。
- 邓仪昊何红云王勇
- 关键词：结核分枝杆菌ESAT-6CFP-10
