国家自然科学基金(30772817)
- 作品数：4 被引量：65H指数：3
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- 人参多糖与人参皂苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞造血细胞因子表达的作用比较被引量：20
- 2011年
- 目的了解骨髓多能间充质干细胞(BM-MSC)主要造血因子mRNA表达水平,比较人参多糖和人参皂苷对BM-MSC造血因子mRNA表达的影响。方法 采用Real-timePCR技术,观察人参多糖(20μg/mL)或人参皂苷(20μg/mL)作用于大鼠BM-MSC12、24、36h时间点造血因子IL4、Csf2、Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等10个基因mRNA相对表达水平。结果 正常大鼠BM-MSC未检测到IL4和Csf2mRNA表达,以内参基因GapdhmRNA作参比,Kitlg、Csf1、IL6、Lif、Csf3、IL11、Epo和IL3等mRNA相对表达量依次减弱。Epo和IL3mRNA表达在人参多糖与人参皂苷作用后各个时间点均无明显影响(P>0.05)。人参多糖在12h和36h时间点对BM-MSC的Csf1、IL6、Lif、Csf3和IL11等5个造血因子mR-NA表达有显著促进作用(P<0.05),在24h时间点对Csf1、IL6、Lif、Csf3和Kitlg等5个造血因子mRNA表达有显著促进作用(P<0.05)。人参皂苷在12、24和36h时间点对BM-MSC有促进表达的基因分别为1个(Csf3),3个(Csf3、IL6和Lif),5个(Csf3、IL6、Lif、IL11和Kitlg)。结论 在药物作用早期人参多糖对BM-MSC造血细胞因子mRNA表达的促进作用强于人参皂苷;随着作用时间延长,人参皂苷的促进作用逐渐增强并超过人参多糖的作用。
- 危建安程志安温建炫戴韵峰莫嘉强
- 关键词：人参多糖人参皂苷骨髓间充质干细胞
- 六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对大鼠BMSCs向脂肪细胞分化相关基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:研究补肾益气功效的六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,补肾阴、补肾阳和补肾健骨方药(代表方分别为六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸)含药血清干预BMSCs成脂分化过程,采用反转录-实时荧光定量技术(RT-q real-time PCR),观察成脂分化相关基因Lpl、Fabp4和PparγmRNA表达水平的变化。结果:与10%正常大鼠血清相比较,Fabp4 mRNA在补肾阴组、补肾阳组(10%含药血清)表达水平均下降33%,但无统计学意义;Lpl mRNA在补肾阳组和补肾健骨组(10%含药血清)表达水平下降,其中补肾阳组具有统计学意义。PparγmRNA在其它各组表达无显著性变化。结论:六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸对转录因子表达水平无显著改变,但对其下游靶基因表达水平有显著下调作用,金匮肾气丸对成脂分化过程中成脂相关基因下调作用最为明显,推测其抑制骨髓间充质干细胞成脂分化能力较其它功效的方药更强。
- 危建安韩凌程志安孙静段晓栋
- 关键词：六味地黄丸金匮肾气丸健骨二仙丸成脂分化
- 过氧化氢诱导BMSCs氧化衰老模型的建立及其对相关基因p16、p21、p53表达的影响被引量：3
- 2014年
- 【目的】探究过氧化氢(H2O2)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)氧化应激损伤所致衰老的相关机制,摸索合适的H2O2衰老造模浓度,为后期的药物干预实验研究奠定基础。【方法】采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,H2O2分别以100、200、300、400、500、600、700、800、1 000μmol/L浓度作用于BMSCs 2、12、24、48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞代谢活力;β-半乳糖苷酶染色判断细胞衰老的建立成功与否;采用反转录荧光定量技术(RT-q real-time PCR)观察衰老相关基因p16、p21、p53表达水平的变化。【结果】当H2O2浓度>700μmol/L时,BMSCs凋亡明显升高,而H2O2浓度<400μmol/L时,变化不明显,甚至有刺激BMSCs增殖的作用;以500μmol/L H2O2作用BMSCs 24 h后,β-半乳糖苷酶染色阳性率显著增加,p21、p16、p53基因表达显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】以500μmol/L H2O2浓度作用于BMSCs 24 h后,可造成BMSCs氧化损伤衰老模型,并可使衰老相关基因p16、p21、p53表达上调。
- 郭柏铭李聪唐超段晓栋付至江程志安
- 关键词：衰老
- 六味地黄丸、金匮肾气丸及健骨二仙丸含药血清对BMSCs成脂、成骨细胞分化相关基因的影响被引量：42
- 2013年
- 目的研究补肾方药对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的前脂肪细胞向成骨分化的影响。方法采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,用经典化学方法诱导BMSCs为前脂肪细胞,用六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸含药血清(含量浓度均为10%,分别代表补肾阴、补肾阳和补肾填精方药),干预前脂肪细胞成骨分化过程;采用反转录-实时荧光定量PCR技术(RT-real time qPCR),分别于第6、12和18天,检测成骨分化相关基因RUNX2、ALP、BGP、BMP2、BMP4、SPP1和IGF1 mRNA,及成脂分化相关基因LPL、FABP4和PPARγ mRNA表达水平。结果对于成骨分化相关基因,与对照组比较,第6天各组基因表达无显著变化(2.0>Ratio>0.5);第12天,金匮肾气丸组IGF1和RUNX2 mRNA表达升高较为显著,相对表达量(Ratio)分别为2.97和1.81;第18天,各组IGF1 mRNA表达均显著上升,六味地黄丸组、金匮肾气丸组和健骨二仙丸组Ratio值分别为3.74、12.60和8.35;各组SPP1 mRNA表达也显著升高,Ratio值分别为2.94、3.18和2.62。对于成脂分化相关基因,第6天,六味地黄丸组和金匮肾气丸组FABP4mRNA表达显著下降(Ratio分别为0.47和0.40),其他基因表达均下调,但不显著;第12天和第18天,成脂分化基因表达变化均无显著变化(2.0>Ratio>0.5)。结论成骨分化相关基因在补肾方药作用较晚时间出现表达上调的变化,而成脂分化相关基因在补肾方药作用较早时间即出现表达下调的改变,并且提示补肾阳法促进成骨分化、抑制成脂分化作用更为显著。
- 程志安韩凌危建安孙静段晓栋
- 关键词：六味地黄丸金匮肾气丸健骨二仙丸前脂肪细胞
