国家自然科学基金(30960092)
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
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- 转1Dx5基因小麦突变株系的研究被引量：1
- 2013年
- 以转1Dx5基因小麦3个高分子量麦谷蛋白突变株系B73-6-1-1、B73-6-1-2和B73-6-1-3及转基因受体L88-6为材料,对其主要农艺性状、低分子量麦谷蛋白表达情况及染色体核型进行研究.结果表明:在田间栽培条件下,纯合稳定转基因突变株系之间及其与转基因受体之间主要农艺性状存在差异,其中株高和千粒重存在显著差异(P=0.05);同时,SDS-PAGE结果显示,在小麦低分子量麦谷蛋白区域,突变株系之间无明显差异,而突变株系与转基因受体之间部分区域表达量存在明显差异并产生一个突变条带;通过核型分析比较,得出突变株系之间及其与转基因受体之间,染色体无论是相对长度还是臂比值都没有显著差异.
- 张小娟祝长青覃建兵
- 关键词：转基因小麦突变体农艺性状核型分析
- 转基因小麦插入突变蛋白的鉴定
- 2013年
- 为研究转基因小麦中插入突变蛋白的编码基因,以转基因小麦B73-6-1和受体小麦L88-6为材料,利用改良方法分离、纯化、回收目的蛋白后进行鉴定。N端测序结果显示,该蛋白N端前五个氨基酸序列(EGEAS)以及部分氨基酸序列与几乎所有高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)具有100%的同源性;同时,质谱鉴定结果显示,该蛋白的两个得分最高(96和58)的肽段(GGSFYPGETTPPQQLQQR和IFWGI-PALLKR)与1Dx5亚基的同源性达到100%,初步证明该突变蛋白为新的HMW-GS。这对外源1Dx5基因整合位点的确定和外源基因整合规律的研究提供了更多依据。
- 张兆亮祝长青覃建兵
- 关键词：小麦蛋白鉴定整合位点
- 不同抗生素对雪莲愈伤组织生长的影响被引量：4
- 2012年
- 以雪莲叶片为外植体,探讨了卡那霉素(kanamycin,Kan)、潮霉素(hygromycin B,Hyg)、羧苄青霉素(car-benidillin,Car)3种抗生素对雪莲愈伤组织诱导、生长及分化的影响,以确定农杆菌介导的遗传转化研究中筛选剂和抑菌剂的最适浓度。结果表明:40mg/L的卡那霉素已抑制雪莲愈伤组织生长,当卡那霉素为50mg/L时,愈伤组织的生长基本停止;8.0mg/L潮霉素能够有效抑制雪莲愈伤组织的生长,当潮霉素为20mg/L时则生长的愈伤组织块较小、褐化、甚至死亡。同时,低浓度(0.5～2.0mg/L)的潮霉素可以提高雪莲愈伤组织的分化率;作为农杆菌抑菌剂,不同浓度羧苄青霉素对雪莲愈伤组织生长的影响差异极显著,当羧苄青霉素的浓度超过400mg/L时对雪莲愈伤组织的出愈及生长均有明显的抑制作用。
- 唐亚萍原慧覃建兵
- 关键词：雪莲愈伤组织卡那霉素潮霉素
- 数据挖掘技术应用初探被引量：1
- 2010年
- 该文主要介绍了数据挖掘的定义,以及数据挖掘基本过程。并对数据挖掘算法做了对比性的介绍。最后,对各应用领域中所采用的数据挖掘技术的研究现状和发展趋势做了总结,特别是数据挖掘技术在生物信息学领域的应用。
- 陈鹏
- 关键词：数据挖掘生物信息学
- 小麦低分子量麦谷蛋白亚基分离条件优化被引量：5
- 2010年
- 目的:优化一种有效分离小麦LMW-GS的实验条件。方法:以面包小麦L88-6作为材料,采用SDS-PAGE技术,通过对麦谷蛋白提取液、分离胶浓度、分离时间、电泳缓冲液等条件进行实验比较。结果与结论:含0.3mol/LNaI和1.4%4-VP的麦谷蛋白提取液能有效提取LMW-GS成分,分离胶浓度为T=14%C=3%、分离时间为40h、Tris-硼酸或Tris-甘氨酸电极缓冲液的分离条件分离效果好、重复性好、简单易行,为小麦低分子量麦谷蛋白亚基深入研究的第一个限速步骤提供了良好的解决方案。
- 覃建兵任燕萍祝长青
- 关键词：小麦SDS-PAGE
- 小麦染色体标本制备方法的优化被引量：1
- 2013年
- 制备出分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好的染色体标本,一直是细胞遗传学实验课关注的重点和难点.本文在去壁低渗火焰干燥法的基础上,改良了小麦染色体制片方法,分析了影响染色体标本制备效果的主要因素.
- 张小娟覃建兵
- 关键词：细胞遗传学染色体标本小麦
- 转基因小麦麦谷蛋白亚基突变体类型被引量：2
- 2010年
- 采用十二烷基磺酸钠–聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了含外源1Dx5和1Ax1的T7代转基因小麦HMW-GS的突变类型及等位变异.结果显示,随机挑选的1000份B72-8-11bT6代籽粒在T7代中共21类突变类型,其外源1Dx5基因表达频率为49.4%,GluA1、GluB1和GluD1共3、13和9个等位变异类型,分别以N、17+18和N为主,占94.7%、61.5%和49.7%;B102-1-2共11类,外源1Ax1基因表达频率占95%,GluA1、GluB1和GluD1共2、7和3个等位变异类型,分别以1、17+18和N为主,占95%、98.7%和98.3%。研究结果进一步说明了转基因株系的纯合性,完全符合孟德尔遗传分离规律,对小麦优质新品种的培育具有理论意义和应用价值.
- 任燕萍祝长青覃建兵
- 关键词：SDS-PAGE转基因小麦麦谷蛋白等位变异
- 转基因小麦T_1代中外源基因的检测和分析
- 2012年
- 该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白质亚基X,表明外源基因的插入引起了转基因T1代籽粒中HMW-GS组成的变化.该研究不仅验证了线性基因片段遗传转化策略的可行性,而且印证了普通小麦Glu-1D等位基因的多重PCR分子标记体系的有效性,为培育安全型的转基因作物新种质打下坚实的基础,加快小麦分子育种进程.
- 周继阳祝长青覃建兵
- 关键词：转基因小麦蛋白质检测多重PCR
- 新疆雪莲DFR基因的分离及同源遗传转化被引量：3
- 2012年
- 二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是植物重要的次生代谢产物花青素生物合成途径中的关键酶。运用RT-PCR和RACE技术从新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.)中克隆得到DFR基因(GenBank登录号为JN092126)。DFR基因的cDNA全长序列含有1个1 029 bp的开放阅读框(ORF),编码343个氨基酸,该基因推断的蛋白与水母雪莲DFR基因推断的蛋白高度同源,相似性达到92%;以不同物种中DFR氨基酸序列进行比对分析,推断的蛋白含有与NADPH特异结合的结构域。将该基因运用农杆菌介导的叶片转化法进行同源转化,将含有转DFR基因的愈伤组织进行悬浮培养,紫外分光光度法测定愈伤组织的总黄酮含量,结果表明转基因愈伤组织的总黄酮含量明显高于非转基因愈伤组织的含量。该研究为提高新疆雪莲药用化学成分黄酮类物质及实现新疆雪莲花青素的人工生物合成的研究奠定基础,对解决天山雪莲资源匮乏提供参考。
- 覃建兵唐亚萍曾卫军
- 关键词：新疆雪莲DFR总黄酮
- AtsHsp17.6-CⅠ和AtsHsp17.6-CⅡ基因对非生物胁迫的应答研究
- 2012年
- 小分子热激蛋白是植物受到热胁迫后的主要表达产物之一,与植物细胞耐热有密切关系。该研究发现,拟南芥小分子热激蛋白基因AtsHsp17.6-CⅠ和AtsHsp17.6-CⅡ除热激之外,重金属离子Ni+、Pb2+、Cu2+、Zn2+和Al3+均能诱导这2个热激蛋白基因的表达;氧化胁迫和渗透胁迫同样也能诱导它们表达。该研究将由CaMV35S启动子驱动的这2个小分子热激蛋白基因导入拟南芥,RT-PCR分析表明,2个小分子热激蛋白基因在转基因植物中呈现组成型表达。实验结果表明,组成型表达小分子热激蛋白基因AtsHsp17.6-CⅠ的转基因植物表现出对6μmol.L-1Cd2+胁迫、0.4%NaCl胁迫的耐受性。研究表明,这2个小分子热激蛋白基因可能参与着多种抗逆途径,推测其能够减轻或抵抗逆境胁迫引起的伤害并对其进行修复。
- 曾卫军原慧覃建兵
- 关键词：小分子热激蛋白非生物胁迫抗逆
