中国博士后科学基金(2009013)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：刘芳梁朝旭李粲邱永福刘晓静更多>>
- 相关机构：广西大学广西农业科学院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金南宁市科学研究与技术开发计划项目广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建被引量：6
- 2012年
- 【目的】利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGFP插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia1300-cbcor15a-bar。【方法】参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点。利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察。【结果】与导入pCambia1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号。【结论】重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障。
- 卢双楠李粲滕峥刘开雨刘芳邱永福梁朝旭方位宽何姗珊刘晓静李鸣梁俊李容柏
- 关键词：甘蔗转基因植物表达载体构建
- 甘蔗MAP激酶基因SoMAPK4克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2012年
- 【目的】克隆甘蔗MAP激酶家族新基因的全长序列,为了解甘蔗抗逆胁迫机制提供依据。【方法】以新台糖22为材料,提取甘蔗幼叶总RNA并反转录为cDNA;利用已知物种MAP激酶基因核苷酸序列保守区设计引物,采用5'和3'端RACE技术克隆新基因全长,并进行生物信息学分析。【结果】克隆获得的甘蔗新基因与玉米ZmMAPK4同源性很高,达92.6%,将该基因命名为SoMAPK4(登录号JQ062930),基因全长1499bp,其中开放阅读框(ORF)为1128bp,5'非翻译区(UTR)为218bp,3'非翻译区(UTR)为213bp。生物信息学分析结果表明,SoMAPK4基因编码一个含376个氨基酸的蛋白质,分子量约43.5kDa,等电点为5.51,含有11个保守的蛋白激酶亚区和MAP激酶的磷酸化位点TEY基序。【结论】克隆获得甘蔗MAP激酶新基因SoMAPK4,该基因可能参与多种胁迫反应的信号传递,是研究甘蔗非生物胁迫和生物胁迫过程中信号传递的一个关键因素。
- 李粲滕峥刘开雨桑洪玉卢双楠方位宽梁朝旭刘晓静何姗珊刘芳邱永福李鸣李容柏
- 关键词：甘蔗MAP基因克隆生物信息学
