国家科技部农业科技成果转化资金(06NK4034)
- 作品数：3 被引量：35H指数：3
- 相关作者：王晓明李俊彬李永欣曾慧杰谢碧霞更多>>
- 相关机构：中南林业科技大学湖南省林业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技部农业科技成果转化资金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 金银花ISSR-PCR反应体系的建立与优化被引量：10
- 2008年
- 以金银花叶片基因组DNA为模板,通过单因素试验,研究了退火温度、Taq DNA聚合酶的用量及模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度等6种因素对ISSR-PCR扩增的影响,建立了适合于金银花IS-SR-PCR反应体系和扩增程序,即在20μl反应体系中,内含1×PCR反应缓冲液(Mg2+free)、1.5UTaq DNA聚合酶、0.15mmol/L dNTPs、0.4μmol/L引物、1.5mmol/LMgCl2、60ng模板DNA。确定了适宜的退火温度为49.9℃。扩增程序为94℃预变性5min;35个循环为94℃变性30s,49.9℃退火30s,72℃延伸1.5min;最后72℃延伸7min,4℃保存。利用优化反应体系,从100条ISSR引物中筛选出10条稳定性和重复性高的引物;以这10条引物对22个金银花品种基因组DNA扩增,共扩增出108条带,其中多态性条带96条,多态性条带比率为88.9%。金银花ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行金银花品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础。
- 王晓明李俊彬李永欣曾慧杰
- 关键词：金银花ISSR
- 金银花多胺高效液相色谱法测定体系的建立被引量：3
- 2007年
- 以金银花新品种‘金翠蕾’为材料,对金银花中多胺高效液相色谱法测定的技术体系进行了优化。结果表明:重蒸水配制各种溶液和流动相比超纯水的杂峰少。样品上清液过ODS-C18固相萃取柱2次可有效纯化。苯甲酰化反应以加苯甲酰氯7μL,反应后再用乙醚萃取吹干2次为宜。适宜的色谱分析条件是:流动相为甲醇和水(64:36),检验波长230nm,流速0.7mL/min,柱温为30℃。可在15min内将腐胺、亚精胺、精胺完全分离并可进行定量测定,线性关系良好(r值大于0.99)。该方法简洁、快速、灵敏度高、重现性好,可有效分析金银花中微量多胺的含量。
- 王晓明李俊彬李永欣
- 关键词：金银花多胺高效液相色谱法
- 金银花ISSR分子标记及遗传多样性分析被引量：24
- 2008年
- 以湖南、山东、河南的22个金银花主要栽培品种为材料，利用ISSR分子标记对22个金银花品种进行了遗传多样性分析．结果表明：从100条ISSR引物中筛选出10条能够扩增出清晰、稳定条带的引物；这10条引物对22个金银花品种基因组DNA扩增，共扩增出108条带，其中多态性条带96条，多态性条带比率为88．89％；22个金银花品种间的遗传相似性系数范围在0．41～1．00，平均遗传相似性系数为0．68．利用UPGMA进行系统聚类分析，22个供试金银花品种划分为2大类，第1类为忍冬种群，第2类为灰毡毛忍冬种群，每一大类又分为北方种群与南方种群．而且主成分分析结果支持以上的聚类分析结果．可见，利用ISSR标记可有效地分析金银花种质资源的遗传多样性，为金银花品种鉴别、分类、种质资源的有效利用提供理论依据．
- 王晓明谢碧霞李俊彬曾慧杰李永欣
- 关键词：经济林学金银花ISSR聚类分析
