国家自然科学基金(30371360)
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 相关作者:李莉刘彦李先兴王晨曦张玲珍更多>>
- 相关机构:第二军医大学上海市第一人民医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人脐血源肝干/祖细胞体外定向诱导分化被引量:1
- 2006年
- 目的研究具有多分化潜能的脐血单个核细胞,定向诱导分化成肝干/祖细胞的可能性。方法采集32份足月分娩后的新鲜脐带血,密度梯度离心法分离出单个核细胞,随即分为两组:①对照组8份脐血:培养液中无细胞因子;②实验组24份脐血,随机分为4组,分别在培养的当天、7、14、21天进行实验测定:培养液中加入细胞因子SCF、OSM、HGF、LIF、FGF-1、FGF-2;观察细胞形态学的变化,RT-PCR定量测定hALBmRNA,细胞免疫化学检测ALB、CK18、CK19的表达。结果观察到实验组中培养的细胞数目随培养时间的延长逐渐增多,体积增大,折光性增强的形态学变化,RT-PCR检测到hALBmRNA表达逐渐增强,细胞免疫化学显示CK18、CK19、ALB呈阳性表达。结论脐血单个核细胞在定向诱导下有分化为肝干/祖细胞的能力,可以考虑作为肝干/祖细胞和肝细胞新的细胞来源。
- 王晨曦李莉刘彦
- 关键词:人脐血单个核细胞免疫细胞化学
- 肾移植术后110例淋巴细胞表型的检测及其临床意义
- 2004年
- 目的:探讨监测肾移植患者淋巴细胞亚群变化的临床意义。方法:110病例选自首次尸肾移植,肾功能在术后1周内恢复,免疫抑制剂使用统一方案。抗凝外周血以CD3/CD25、CD4/CD45RA、CD8/CD28和CD95/CD95L单克隆抗体标记,流式细胞术(FCM)分析它们在淋巴细胞中表达的变化与患者移植后时间、环孢素各值(CsA-LT)浓度、肌酐(Cr)浓度、患者年龄、性别和排斥发生等的关系。结果:肾功能稳定的受者CD4+/CD45RA+、CD8+/CD28+、CD28、CD25和CD95L随术后时间延长、年龄增加和CsA-LT增高而减低。术后3.5年以上、年龄大于55岁和CsA-LT大于400 ng/ml者与术后1.5年以内、年龄30岁以下和CsA-LT 200 ng/ml以下者相比差异显著(P<0.05)。CD95表达随年龄的增加、术后时间的延长逐渐增多,随CsA-LT的增加逐渐下降(P<0.05)。结论:CD4+/CD45RA+、CD8+/CD28+、CD28、CD25和CD95L表达降低,CD95表达增加是肾移植患者免疫系统稳定的表现,结合患者年龄、术后时间、CsA-LT和肾功能检查可以作为免疫抑制剂应用和排斥监测的简便、可靠指标。
- 李莉齐隽李先兴张明张玲珍刘玉杉孔宪涛
- 关键词:肾移植淋巴细胞表型环孢素肌酐移植物排斥
- p27基因下调对人骨髓和脐血造血祖细胞体外活性的影响被引量:1
- 2005年
- 目的比较干扰p27基因表达对骨髓和脐血来源造血祖细胞增殖和造血潜能的影响,并探讨其相关机制。方法以含p27全长反义cDNA逆转录病毒感染经流式细胞仪分选的人骨髓与磁珠分离获得的人脐血来源的CD34+细胞,在含混合生长因子条件下体外培养不同时间,分别观察细胞生长曲线,检测细胞周期,确定细胞增殖能力;半固体培养计数集落形成,确定其造血能力;Westernblot检测p27与CDK2蛋白表达,明确基因转染效果并探讨p27反义cDNA促进细胞扩增的作用途径。以含p27全长正义cDNA和仅含绿色荧光蛋白(GFP)基因的病毒感染细胞为对照。结果与GFP和p27正义cDNA比较,p27反义cDNA对脐血造血祖细胞生长有明显促进作用(P<0.01),至培养第9天p27反义cDNA、p27正义cDNA和GFP组细胞数分别增加了(197.3±47.7)倍、(12.7±8.1)倍和(41.8±30.6)倍;骨髓造血祖细胞数增加不明显,至培养第9天3组细胞数分别增加了(36.0±22.3)倍、(8.7±6.8)倍和(14.1±10.4)倍。p27反义cDNA主要促进脐血和骨髓造血祖细胞S期增加,p27反义cDNA、p27正义cDNA和GFP组脐血造血祖细胞S期细胞百分比为(17.0±4.8)%,(2.0±0.8)%和(4.1±1.8)%;骨髓造血祖细胞则为(8.4±4.4)%,(1.0±0.7)%和(3.8±1.4)%。p27反义cDNA对骨髓和脐血的集落形成能力促进作用高于GFP组(P<0.
- 李莉李先兴程涛
- 关键词:反义CDNA骨髓造血祖细胞P27基因集落形成人骨髓体外活性