安徽省自然科学基金(01043401)
- 作品数：9 被引量：27H指数：4
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- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三七总皂甙和维甲酸联合诱导大鼠MSCs分化为神经元样细胞被引量：6
- 2007年
- 目的:体外探讨三七总皂甙、维甲酸对大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的影响。方法:以三七总皂甙和维甲酸为诱导条件诱导大鼠MSCs分化,免疫细胞化学检测分化细胞的神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、γ-氨基丁酸(GABA)、酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况。结果:免疫细胞化学显示MSCs诱导后具有神经细胞的形态,NSE、AchE、GABA、TH有阳性表达,GFAP表达为阴性。结论:三七总皂甙和维甲酸联合应用对大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞及在提高其分化率中起着重要作用。
- 施雪英陈先文胡慧敏徐仿成任于果
- 关键词：骨髓间质干细胞神经元三七皂甙维甲酸
- 大鼠骨髓间充质干细胞在体外向神经元样细胞的分化被引量：9
- 2006年
- 目的探讨2-ME与BHA对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的作用。方法大鼠股骨中分离MSCs,贴壁法体外扩增、传代。以二巯基乙醇(2-ME)预诱导,再加入2-ME、3-叔丁基-4羟基茴香醚(BHA)诱导。免疫细胞化学染色检测巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管联合蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、γ-氨基丁酸(GABA)、酪氨酸羟化酶(TH)的表达,以鉴定分化细胞的表型特征。尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)作为细胞分裂标记检测MSCs增殖特性。结果细胞诱导后具有神经细胞的形态,并被BrdU标记,nestin、NSE、MAP-2、AchE、GABA表达阳性,而GFAP、TH表达为阴性。结论2-ME和BHA在体外能够有效的诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。
- 施雪英陈先文任于果徐仿成胡慧敏
- 关键词：细胞学
- 全反式维甲酸及银杏提取物对神经干细胞分化的影响被引量：4
- 2006年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)、银杏提取物(Egb)对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化为胆碱能神经元和多巴胺能神经元的作用。方法取第3代NSCs诱导分化,试验分为4组:ATRA组(10-8mol/L)、Egb组(2mg/L)、ATRA(10-8mol/L)+Egb组(2mg/L)和空白对照组;免疫细胞化学染色检测神经微管相关蛋白(MAP2)、乙胆碱酯酶(AchE)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达,并计算阳性染色细胞的百分率。结果ATRA组诱导神经干细胞分化为AchE阳性和TH阳性神经元的百分率分别为26·32%±3·62%和12·02%±2·78%;Egb组分别为42·93%±3·08%和18·13%±1·74%;ATRA+Egb组分别为43·32%±5·60%和13·03%±2·54%;空白对照组分别为27·68%±2·51%和5·74%±1·81%。结论ATRA和Egb均可促进NSCs向TH阳性神经元分化,Egb还可促进NSCs向AchE阳性神经元分化,ATRA和Egb联用无协同效应。
- 徐仿成陈先文胡慧敏施雪英任于果
- 转Nurr1基因联合全反式维甲酸及银杏提取物诱导的神经干细胞治疗帕金森病大鼠模型被引量：2
- 2007年
- 目的探讨核受体相关因子(Nurr1)基因修饰联合全反式维甲酸(ATRA)及银杏提取物(Egb)诱导的神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病动物模型的疗效及作用机制。方法将建模成功的帕金森病SD大鼠模型分为4组,将溴尿嘧啶(Brdu)标记的单纯胚胎NSCs(NSCs组)、RA/Egb诱导分化的NSCs(RA/Egb组)、单纯转Nurr1基因的NSCs(Nurr1组)和转Nurr1基因联合RA/Egb诱导分化的NSCs(Nurr1+RA/Egb组)分别注入模型鼠右侧纹状体。观察其病理性旋转行为的改善,采用免疫组化染色方法检测酪氨酸羟化酶(TH)、Nurr1、神经丝巢蛋白(nestin)表达及Brdu标记情况,观察移植的NSCs在体内的存活、迁移与分化,并进行TH阳性细胞计数研究脑内多巴胺含量的变化。结果各组动物脑内移植后动物旋转行为较前均有改善,尤以Nurr1+RA/Egb组改善最明显,RA/Egb组次之。免疫组化可见各组移植区均有TH阳性细胞表达,其中Nurr1+RA/Egb组TH染色细胞数更密集,形态更成熟,病理学改善最明显。在Nurr1组和Nurr1+RA/Egb组移植区可见有Nurr1散在表达,在NSCs组和RA/Egb组移植区未见Nurr1明显表达。nestin检测未见有明显阳性表达。结论转Nurr1基因联合全反式维甲酸及银杏提取物诱导的神经干细胞脑内移植后可以存活、迁移、分化并表达TH和Nurr1,部分地改善PD模型旋转行为,增加脑内TH表达。
- 李小元陈先文徐仿成胡慧敏王烈成
- 关键词：干细胞
- 全反式维甲酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究被引量：1
- 2005年
- 目的体外探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的作用。方法从大鼠股髓分离出MSCs,采用贴壁法体外扩增、传代,取5代后细胞采用EGF共培养,二巯基乙醇(2ME)预诱导,再以ATRA为诱导剂诱导,然后免疫细胞化学检测巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况。结果MSCs诱导后具有神经元样细胞的形态,免疫细胞化学显示nestin、NSE、AchE有阳性表达,而GFAP、TH表达为阴性。结论ATRA在体外能够有效的诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞,且可表达AchE。
- 施雪英陈先文胡慧敏徐仿成
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经元分化全反式维甲酸
- 大鼠胚胎大脑皮层源性神经干细胞体外培养及增殖分化特点被引量：3
- 2005年
- 目的 建立大鼠胚脑皮层神经干细胞体外培养及鉴定技术,探讨其增殖分化特性,为应用神经干细胞移植治疗神经疾病提供基础。方法 采用含有丝分裂源表皮生长因子(EGF)的无血清培养基培养SD大鼠孕14 5d的胚胎大脑皮层神经干细胞,应用免疫细胞化学方法了解其增殖分化特性; 以单细胞克隆实验及BrdU免疫标记证实神经干细胞自我增殖能力。结果 培养细胞在EGF作用下可分裂增殖,并表达神经干细胞特异性抗原nestin,分化细胞MAP2 及GFAP抗原表达阳性。结论 SD大鼠胚脑皮层可分离培养出神经干细胞;并具有增殖、自我更新能力和多向分化潜能特性。
- 任于果陈先文高宗良
- 关键词：表皮生长因子大脑皮质
- 基因转染神经干细胞移植治疗帕金森病研究进展被引量：4
- 2008年
- 帕金森病(PD)是一种常见的中枢神经系统的变性疾病。目前,药物治疗和外科治疗仅限于控制症状,不能延缓、阻止PD病人黑质区病变的发展,而神经干细胞移植联合基因治疗可能成为最佳治疗方案之一。TH基因、Nurr1基因、VHL基因、GDNF基因等修饰神经干细胞移植治疗PD是当前PD基因治疗研究的热点。本文对近年基因修饰神经干细胞治疗PD的研究进展进行综述。
- 李小元陈先文
- 关键词：神经干细胞基因治疗帕金森病
- 转染Nurrl基因的大鼠骨髓基质细胞的诱导分化被引量：1
- 2007年
- 目的通过克隆孤儿核受体(Nurrl)基因并转染大鼠的骨髓基质细胞(MSCs),探讨Nurrl基因对MSCs在三七总皂甙(tPNS)和全反式维甲酸(ATRA)的联合诱导下向神经元分化的影响。方法构建pcDNA3.1-hygro-Nurrl表达质粒,应用脂质体Lipofectamine 2000转染MSCs。转染前MSCs以相同的密度铺6孔板,并随机设置4个实验组,分别是:Nurrl+tPNS/ATRA组、tPNS/ATRA组、Nurrl组和对照组,利用免疫细胞化学方法检测Nurrl基因的表达。转染48 h对Nurrl+tPNS/ATRA组和tPNS/ATRA组的细胞,依次给予β-疏基乙醇(BME)预诱导和tPNS/ATRA诱导,而Nurrl组和对照组的细胞除给予培养基代替tPNS/ATRA诱导剂外,其余步骤均相同;检测4组细胞的酪氨酸羟化酶(TH)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和γ-氨基丁酸(GABA)抗体的免疫细胞化学结果并统计各组阳性细胞的比例。结果免疫细胞化学显示,转染的骨髓基质细胞表达Nurrl蛋白;Nurrl+tPNS/ATRA组TH阳性细胞比例明显高于tPNS/ATRA组,分别是(38.4±4.6)%和(5.9±3.4)%。结论用tPNS/ATRA作诱导剂,转染Nurrl的MSCs诱导后TH阳性细胞的比例明显高于未转染组,差别有统计学意义;tPNS/ATRA诱导MSCs分化成神经元细胞的作用明确。
- 胡慧敏陈先文施雪英徐仿成
- 关键词：孤儿核受体骨髓基质细胞三七总皂甙全反式维甲酸免疫细胞化学
- Nurr1基因修饰对神经干细胞分化为多巴胺能神经元的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察Nurr1基因修饰原代培养的神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用。方法用电穿孔法将携带Nurr1基因的质粒转染P3代NSCs并进行潮霉素筛选,24h后免疫细胞化学检测转染效果;并对转染后的NSCs进行传代培养至P6代,检测Nurr1基因修饰的NSCsNurr1表达效果,并进行分化实验,分化培养7d后免疫细胞化学检测酪氨酸羟化酶(TH)的表达。对照组选用未转染的NSCs。结果电穿孔法转染的NSCs24h后免疫细胞化学检测到Nurr1高表达;传代至P6代,检测到Nurr1较高表达;对照组呈弱表达。分化实验表明:Nurr1基因修饰的NSCs分化的神经细胞中TH阳性比例占27.20%±7.12%,对照组为5.74%±1.81%;差异有显著性(P<0.01)。结论Nurr1基因修饰可以促进原代培养的NSCs向多巴胺能神经元方向分化。
- 徐仿成陈先文胡慧敏李小元
- 关键词：酪氨酸单氧化酶细胞分化电穿孔神经元
