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国家自然科学基金(30671697)

作品数:6 被引量:15H指数:3
相关作者:陆海饶国栋潘翔蒋湘宁杨婷更多>>
相关机构:北京林业大学河南科技大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 2篇农业科学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 5篇连接酶
  • 4篇毛白杨
  • 4篇基因
  • 4篇白杨
  • 4篇4-香豆酸
  • 4篇4-香豆酸:...
  • 2篇克隆
  • 2篇基因家族
  • 1篇动力学
  • 1篇动力学参数
  • 1篇动力学研究
  • 1篇新基因
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇植物
  • 1篇突变体
  • 1篇漆酶
  • 1篇漆酶基因
  • 1篇酶促
  • 1篇酶基因

机构

  • 5篇北京林业大学
  • 1篇河南科技大学

作者

  • 5篇陆海
  • 3篇饶国栋
  • 2篇潘翔
  • 2篇蒋湘宁
  • 1篇范丙友
  • 1篇曹山
  • 1篇王晓雪
  • 1篇李慧
  • 1篇张强
  • 1篇王莹
  • 1篇李丽红
  • 1篇杨婷
  • 1篇李欢欢

传媒

  • 2篇成都大学学报...
  • 1篇北京林业大学...
  • 1篇广东农业科学
  • 1篇Forest...
  • 1篇植物学研究

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 2篇2009
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
Cloning and analysis of a new 4CL-like gene in Populus tomentosa被引量:1
2013年
The phenylpropanoid enzyme 4-coumarate: coenzyme A ligase (4CL), plays a key role in general phenylpropanoid metabolism. Our investigation involves a new 4CL-like gene cloned from Populus tomentosa. This new 4CL-like gene is 1,692 bp and encodes a protein of 552 aa. After analysis of its domain, we found a highly conserved region of a 4CL gene family in this 4CL-like gene. Based on our results, we believe that this gene belongs to the family of 4CL. A recombinant vector, referred to as pET30a-4CL-like, was constructed by connecting this 4CL-like gene fragment to pET30a. After inducing it with IPTG for 3 h, the 4CL-like protein was purified by a Ni-NTA method. This 4CL-like protein has a calculated molecular weight of 60 kDa by SDS-PAGE.
Hong-Yi WEIGuo-Dong RAOYu-Kun WANGLei ZHANGHai LU
关键词:新基因毛白杨SDS-PAGE连接酶
重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶催化不同肉桂酸衍生物的酶促动力学研究被引量:4
2009年
4-香豆酸:辅酶A连接酶是杨树木质素合成途径的关键酶之一,催化维管植物木质素合成羟基肉桂酸及其衍生物辅酶A酯化合物的形成.对毛白杨的重组Pt4CL1蛋白的不同肉桂酸衍生物底物的酶促动力学进行了分析,Pt4CL1对肉桂酸、4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸具有催化活性,其中的4-香豆酸、咖啡酸、阿魏酸,Km(μM)值分别为55.02±3.5、52.94±6、44.62±4,Vmax(nM.S-1)值分别为4.23±0.27、4.12±0.11、2.16±0.07;4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kcat(S-1)值分别为44.73×10-3、43.57×10-3、7.61×10-3;对4-香豆酸,咖啡酸,阿魏酸的Kenz(M-1.S-1)值分别为823、812.98、170.55.Pt4CL1对肉桂酸的催化能力很弱,而对芥子酸没有催化活性.结果表明,Pt4CL1对4-香豆酸的催化效率最高,对咖啡酸的催化效率略低于4-香豆酸,而对阿魏酸的催化效率最低,对咖啡酸的催化效率略有很高的转化效率.
李欢欢饶国栋范丙友潘翔蒋湘宁陆海
关键词:4-香豆酸:辅酶A连接酶毛白杨动力学参数
毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶338Val缺失突变分析被引量:1
2009年
通过对毛白杨中的4-香豆酸:辅酶A连接酶1(Pt4CL1)蛋白第338位缬氨酸进行缺失突变,从而获得了具有芥子酸催化活性的Pt4CL1蛋白突变体338dVal。与野生型4CL1蛋白活性相比较,该突变体获得了催化芥子酸的活性,比活力是(1.62±0.34)nkat/mg。同时,对4-香豆酸催化活性有轻微的降低(约降低12%),对咖啡酸的催化活性有明显增加(约增加126%),对阿魏酸的催化活性有部分的降低(约降低29%),对肉桂酸的催化活性没有显著变化。该结论证实了第338位缬氨酸对底物芥子酸5位甲氧基具有空间位阻效应。该项研究为通过基因工程技术调控木质素的合成提供了新的方法。
王晓雪蒋湘宁陆海
关键词:毛白杨突变体酶学特性
植物4CL基因家族结构功能与表达特性研究进展被引量:6
2011年
4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)是植物苯丙烷衍生物,如类黄酮和木质素等,生物合成途径的一种关键酶,在大多数维管植物中4CL基因以基因家族的形式出现.4CL基因家族成员在植物组织中存在差异表达,并参与不同的苯丙烷类衍生物的生物合成.从4CL酶的基因结构、基因家族组成与表达特性等方面详细论述了当前最新研究进展,这将有助于更好地理解植物4CL基因参与苯丙烷类衍生物途径的合成与代谢机制.
杨婷潘翔饶国栋陆海
关键词:基因家族
毛白杨4CL基因家族的克隆与进化分析被引量:6
2012年
为研究毛白杨4CL基因家族及其进化关系,采用TRIZOL法单独提取毛白杨各组织的总RNA,以反转录得到各个组织的总cDNA为模板,通过PCR技术克隆18个毛白杨4CL基因。利用MEGA软件对这18个基因以及其他25个来自不同物种的4CL基因进行了进化树分析,结果显示,毛白杨4CL基因分为两个聚类:ClassI和ClassII,4CL1~4CL5属于ClassI,而4CL6~4CL18属于ClassII。
饶国栋陆海
关键词:毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶克隆进化分析
毛果杨漆酶基因LAC-1的克隆与原核表达研究
2016年
目的:克隆毛果杨漆酶基因LAC-1,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体在大肠杆菌中进行融合蛋白的诱导表达并纯化目的蛋白,为植物漆酶基因蛋白体外结构与功能的研究提供一定的理论基础。方法:根据同源克隆的原理,利用已经研究公布的拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,利用PCR技术克隆毛果杨漆酶基因的序列,构建重组表达载体,转化大肠杆菌BL21并表达重组蛋白,通过Ni-NTA亲和层析进行纯化。结果:克隆获得了毛果杨漆酶基因的序列(命名LAC-1,基因登录号XP_002310245),序列分析表明LAC-1具有漆酶基因的保守结构域,进化树分析表明该序列与拟南芥的漆酶基因AtLAC4有较高的同源性,利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测结果表明表达蛋白与预期蛋白大小一致。结论:LAC-1属于毛果杨基因家族的一员,该漆酶基因可以在体外成功进行原核表达,为毛果杨漆酶基因家族成员的鉴定及后续活性功能的分析提供了一定的理论基础。
李丽红撖静宜王莹曹山张强蒋璐瑶要笑云李慧陆海
关键词:LAC基因克隆原核表达
共1页<1>
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