国家自然科学基金(30471808)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 相关作者：狄文高华施君葛盛芳何以丰更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海交通大学上海市第一妇婴保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-1α对人卵巢癌细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:HIF-1α是一个在缺氧状态下重要的转录调节因子,控制调节各种由缺氧引起的相关基因表达,参与肿瘤的恶化、浸润和转移,在肿瘤领域已成为研究热点。本文主要研究CoCl2模拟化学缺氧复氧中HIF-1α的表达,及其对人卵巢癌HO-8910PM细胞株生物学行为的影响。方法:在培养基中加入和去除CoCl2模拟化学缺氧和缺氧复氧,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CoCl2与HIF-1α的mRNA转录的量-效和时-效关系;通过MTT、Boyden小室、细胞黏附试验分别检测细胞生长、侵袭力和黏附力。结果:人卵巢癌HO-8910PM细胞株中存在HIF-1α的mRNA转录;在CoCl2模拟缺氧的时-效关系实验中,150μmol/LCoCl2刺激细胞8h、16h、24h时HIF-1αmRNA转录呈递增(分别为2.11±0.03、2.52±0.05、2.78±0.11)(P<0.05),24h达高峰,48h明显下降。同时,在量-效关系实验中,100μmol/L、150μmol/L刺激细胞16h时HIF-1αmRNA转录呈递增(分别为1.54±0.03、2.07±0.13)(P<0.05);MTT发现CoCl2诱导的缺氧对细胞生长起抑制作用;Boyden小室检测细胞侵袭力实验发现缺氧16h复氧24h后细胞的侵袭力增加(穿越细胞膜的细胞数86±9,较对照组53±10增加)(P<0.05);细胞黏附实验发现缺氧16h复氧24h后细胞的黏附力增加(P>0.05)。结论:CoCl2能诱导HO8910-PM细胞HIF-1α的过度转录,而且存在一定的时-效关系;经缺氧后复氧,肿瘤细胞的侵袭力和黏附力增加,且肿瘤细胞的侵袭力增加统计学差异显著。
- 施君狄文
- 关键词：二氯化钴缺氧HIF-1Α生物学行为
- RNA干扰技术抑制卵巢上皮性癌细胞IGF1R基因表达及增强顺铂敏感性的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的利用RNA干扰（RNAi）技术抑制卵巢上皮性癌（卵巢癌）H08910PM细胞胰岛素样生长因子1型受体（IGF1R）基因的表达，探讨IGF1R的生物学功能及对顺铂敏感性的影响。方法将IGF1R基因的特异性小分子干扰RNA（siRNA）、非特异性siRNA分别转染细胞；转染后48h通过实时PCR、蛋白印迹法（western blot）、流式细胞仪分别测定IGF1R mRNA、蛋白的表达及细胞周期变化；转染后24、48、72、96h通过细胞增殖／毒性检测试剂cell counting kit-8（CCK-8）测定细胞增殖；于转染后24h给予不同浓度的顺铂作用24h，通过CCK-8法测定细胞增殖抑制率；于转染后24h给予10μg／ml顺铂作用24h，通过流式细胞仪及蛋白印迹法分别检测细胞凋亡和B淋巴细胞白血病／淋巴瘤蛋白2（Bcl-2）蛋白的表达。结果（1）转染后48h，IGF1R mRNA和蛋白的表达水平均明显下调，转染后IGF1R mRNA的表达水平下调了85．5％（P〈0．01）。（2）转染后48、72、96h，细胞增殖被明显抑制，细胞增殖活性分别为1．71±0．13、2．32±0．23、2．79±0．28，与未转染及转染非特异性siRNA的对照细胞比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（3）转染后48h有24．37％的细胞处于G2期（P〈0．05）。（4）转染后24h联合不同浓度的顺铂作用24h，当顺铂浓度为2．5、5、10、20μg／ml时，细胞增殖被明显抑制，细胞增殖抑制率分别为（25．94±0．08）％、（40．25±0．05）％、（59．48±0．03）％、（74．18±0．08）％，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（5）在转染siRNA24h后给予10μg／ml顺铂作用24h，可使细胞的凋亡率增加至17．95％（P〈0．05），并使Bcl-2蛋白的表达水平下调。结论通过RNAi技术可有效抑制IGF1R基因在转录和翻译水平的表达，抑制肿瘤细胞的增殖，出现G2期阻滞，明显提高细胞对顺铂化疗的敏感性。
- 高华施君葛盛芳狄文
- 关键词：RNA干扰顺铂
- IGF1、IGF1R及IGFBP3在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床病理意义被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨胰岛素样生长因子1(IGF1)及其受体(IGF1R)、胰岛素样生长因子结合蛋白质3(IGFBP3)在卵巢上皮性肿瘤的表达及在原发性卵巢上皮性癌(EOC)中的临床病理意义。方法:用免疫组化法检测10例正常卵巢组织、13例良性卵巢上皮性肿瘤、12例交界性卵巢上皮性肿瘤、50例EOC手术病理标本中IGF1、IGF1R、IGFBP3的表达,分析三者表达与EOC临床病理特征的相关性。结果:(1)IGF1、IGF1R、IGFBP3在正常卵巢组织、良性卵巢上皮性肿瘤、交界性卵巢上皮性肿瘤、EOC的表达依次增强,IGF1阳性表达率分别为20.00%,23.08%,25.00%,80.00%;IGF1R阳性表达率分别为20.00%,30.77%,33.33%,84.00%;IGFBP3阳性表达率分别为30.00%,38.46%,41.67%,86.00%,三者在EOC组的阳性表达率均明显高于交界性卵巢上皮性肿瘤组(P<0.01)。(2)IGF1R在EOC中的表达阳性程度与病理学分级、临床分期、腹水/腹腔冲洗液阳性之间呈显著正相关(P<0.05);IGFBP3表达的阳性程度与临床分期呈显著的负相关(P<0.05)。(3)IGF1R在EOC中的表达程度与IGF1表达程度间呈显著的正相关(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中存在IGF1、IGF1R、IGFBP3的过表达,三者共同参与了EOC的发生发展过程;IGF1R与EOC不良预后的重要临床病理指标间呈显著的正相关,IGF1R可作为卵巢上皮性癌基因靶向治疗的新靶点。
- 高华许雁萍刘强狄文
- 关键词：胰岛素样生长因子1胰岛素样生长因子结合蛋白3
- 胰岛素样生长因子1及其受体在卵巢癌细胞增殖中的作用被引量：8
- 2008年
- 目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF1)及其受体(IGF1R)在卵巢癌HO8910PM细胞增殖中的作用。方法以不同浓度的IGF1作用于HO8910PM细胞24、48、72和96 h,通过CCK-8法检测细胞增殖活性;在脂质体介导下转染特异性IGF1R小干扰RNA(siRNA),通过实时PCR和Western blotting验证其在IGF1R mRNA和蛋白表达水平的抑制效果;于转染后48 h给予IGF1刺激,通过CCK-8法测定细胞增殖活性。结果IGF1作用48 h后可明显刺激细胞的增殖(P<0.05);转染IGF1R siRNA后48 h,IGF1R mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05);转染IGF1R siRNA后48 h给予IGF1刺激,IGF1的促细胞增殖效应明显被抑制(P<0.05)。结论IGF1通过IGF1R途径促进HO8910PM细胞的增殖,IGF1R siRNA可以有效抑制该作用。
- 高华施君葛盛芳狄文
- 关键词：胰岛素样生长因子受体卵巢癌小干扰RNA
- 乳腺癌转移抑制基因作用机制
- 2007年
- 乳腺癌转移抑制基因（BRMS1）在人乳腺癌、黑色素瘤、膀胱癌、卵巢癌、嗜铬细胞瘤中具有抑制肿瘤细胞转移的能力，可明显减少转移灶的发生，作用机制复杂多样而又非典型，成为研究抑制肿瘤转移的新靶点。
- 高华狄文
- 关键词：肿瘤转移分子作用机制
- 口腔HPV携带者子宫颈病变的发病风险分析被引量：9
- 2013年
- 目的通过人群调查，分析口腔HPV携带者中宫颈病变[包括宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌]的发病风险。方法选取2009年1月至2011年12月在上海地区3个临床中心（包括上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市第一妇婴保健院和上海市奉贤区中心医院）诊治的1200例门诊患者（包括行年度体检和门诊就诊患者）和50例术前诊断为CINⅢ、宫颈癌的住院患者，以荧光定量PCR技术检测其口腔HPV感染情况。对其中1200例门诊患者进行横断面队列分析，比较口腔HPV阳性和阴性者之间宫颈病变发生率的差异，并分析口腔HPV感染患者的人口一行为学特征；另对1250例门诊和住院患者进行病例一对照分析，比较宫颈正常者与宫颈病变患者口腔HPV感染的差异，分析宫颈病变发病的主要危险因素。结果荧光定量PCR技术检测显示，1200例门诊患者中，口腔HPV阳性71例，占5．9％（71／1200）；50例住院患者中，口腔HPV阳性16例，占32．0％（16／50）。横断面队列分析显示，1200例门诊患者中，共发现宫颈病变患者（包括CINI和CINⅡ）18例，口腔HPV阳性（71例）和阴性（1129例）患者的宫颈病变发生率分别为4．2％（3／71）和1．3％（15／1129），两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；口腔HPV阳性者发生CINI和CINⅡ的相对危险度分别为2．9和4．0；口腔HPV阳性者口交频繁（包括口交频度为经常和一直者）及性伴侣数〉3个者显著多于口腔HPV阴性者（P〈0．01）。病例一对照分析显示，1250例门诊和住院患者中，宫颈正常者（1182例）口腔HPV阳性率为5．8％（68／1182），宫颈病变者（68例）口腔HPV阳性率为27．9％（19／68），其中CINI、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌患者口腔HPV阳性率分别为2／13、1／5、31．4％（11／35）和5／15，CINI、cINⅡ、CINⅢ、宫颈癌患者口腔HPV阳性率分剐与宫颈正常者比较，�
- 何以丰张梅莹冯令达殷怡华张蓉狄文
- 关键词：口腔疾病传播宫颈上皮内瘤样病变
