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国家科技支撑计划(2008BAI60B04): 作品数：28 被引量：81H指数：6; 相关作者：石炳毅蔡明肖漓韩永许晓光更多>>; 相关机构：解放军第309医院浙江大学医学院附属第一医院华中科技大学更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金浙江省科技厅重点资助项目更多>>; 相关领域：医药卫生化学工程更多>>

移植肾活检:病理及组织学的早期诊断价值被引量：6: 2013年; 背景:移植肾活检病理学组织学早期诊断意义重大,单中心回顾性研究临床诊断与治疗较少。目的:通过对肾功能不全移植肾进行常规穿刺病理活检,根据病理诊断采取相应临床治疗方式,观察治疗效果,同时明确移植肾穿刺病理活检的安全性以及在临床诊治中的意义及其重要性。方法:选取解放军第309医院器官移植中心202例肾移植患者为研究对象,其中80例为肾移植后移植肾功能延迟恢复,122例肌酐不明原因升高。在B超引导下应用活检穿刺针行移植肾穿刺活检,对活检组织标本予以相应染色和病理组织学观察,并进行相应的临床治疗。结果与结论:穿刺组织中,除3例(1.5%)由于组织少难以诊断,其余病理诊断移植肾正常12例(5.9%),缺血再灌注损伤合并(或)急性肾小管坏死28例(13.9%),轻度钙调磷酸酶抑制剂类免疫抑制剂急性毒性损伤22例(10.9%),轻度钙调磷酸酶抑制剂类免疫抑制剂慢性毒性损伤12例(5.9%),超急性排斥反应1例(0.5%),疑为急性排斥反应29例(14.4%),急性T细胞性排斥反应34例(16.8%),急性抗体介导性排斥反应19例(9.4%),慢性T细胞介导排斥反应16例(7.9%),慢性T细胞介导排斥反应伴急性T细胞介导性排斥反应12例(5.9%),慢性抗体介导性排斥反应3例(1.5%),高血压因素4例(2.0%),间质纤维化和肾小管萎缩,未发现特定致病因素所致病变2例(1.0%),缺血性坏死2例(1.0%),移植后肾病复发3例(1.5%),C4d免疫组化染色阳性23例(11.4%),未发现患者及移植肾的不良反应。; 韩永郭晖蔡明许晓光黄海燕徐燕杰王强冯凯石炳毅; 关键词：器官移植病理活检

移植肾穿刺组织病理学检查及临床分析被引量：7: 2010年; 目的:探讨移植肾术后组织病理穿刺活检对临床诊断与治疗的指导意义。方法:肾移植术后患者82例,行常规穿刺组织病理活检,依据Banff 05标准进行病理分型,通过移植肾的病理状态明确诊断,并进行相应临床治疗,观察治疗效果。结果:81例诊断明确,1例因获取组织量较少难以诊断。82例患者中31例肾功能延迟恢复,其中28例移植肾功能恢复,3例移植肾功能至今未恢复;51例血肌酐水平升高者经治疗后44例血肌酐水平呈不同程度下降,3例慢性移植肾功能不全,4例血肌酐稳定于较高水平。结论:移植肾穿刺组织病理活检安全、可靠,对患者及移植肾无不良影响,对肾移植术后移植肾功能不全的辅助诊断和治疗有重要意义。; 韩永黄海燕许晓光蔡明王强石炳毅; 关键词：肾移植活组织检查病理学

移植肾肾小球滤过率的检测和评估(附视频)被引量：3: 2011年; 探讨评估移植肾肾小球滤过率(GFR)的最佳方法,从而早期发现移植肾功能异常并适时干预,对提高肾移植受者的生活质量和长期存活具有重要意义。本文介绍了菊粉清除率、放射性核素法实测GFR,应用外周血清肌酐、血清尿素氮、肌酐清除率等间接评估GFR,以及通过公式估算GFR等各种目前常见的GFR评估方法的原理及其优劣;并根据肾移植受者的特殊情况分析了估算GFR公式的适用性。; 蔡明; 关键词：肾移植肾功能肾小球滤过率视频

基质金属蛋白酶-2血清学和尿脱落细胞荧光原位杂交技术联合检测在膀胱癌的应用被引量：2: 2011年; 目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-2、尿脱落细胞荧光原位杂交联合检测对膀胱肿瘤诊断的价值。方法 100例膀胱肿瘤患者的MMP-2水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测含量,荧光原位杂交技术尿脱落细胞表达,20名健康人群标本对照。结果膀胱癌患者MMP-2水平,荧光原位杂交阳性显著高于健康对照组(P<0.05)。联合检测可明显提高膀胱癌阳性检出率,降低患者费用。结论 MMP-2水平与尿脱落细胞荧光原位杂交联合检测对膀胱癌的诊断有重要参考价值,弥补了单独荧光原位杂交检测的不足。; 韩永徐燕杰黄海燕许晓光冯凯蔡明石炳毅郭晖; 关键词：膀胱肿瘤明胶酶A

肾移植术后巨细胞病毒感染诊断、预防与治疗被引量：4: 2011年; 目的:探讨肾移植术后巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染的诊断、治疗与预防方法。方法:回顾性分析28例肾移植患者临床资料,检测手术前、后血中CMV抗原和CMV抗体及肾脏穿刺标本组织中CMV抗原的表达,并采用静脉注射更昔洛韦进行预防与治疗。结果:11例发生CMV感染,均为无临床症状的CMV感染,均治愈。结论:积极预防、早期治疗肾移植术后CMV感染至关重要,CMV抗原检测和免疫组织化学检测共同应用能够对CMV感染作出早期诊断,更昔洛韦能有效治疗CMV感染。; 韩永黄海燕许晓光王新颖蔡明石炳毅; 关键词：肾移植 CMV感染

大鼠脐带源间充质干细胞的分离及生物学性状被引量：4: 2010年; 背景:关于大鼠骨髓来源的间充质干细胞用于移植免疫耐受及进行组织修复的研究很多,但尚无脐带来源间充质干细胞的相关研究。目的:建立从大鼠脐带分离间充质干细胞的方法,并观察其生物学性状。方法:大鼠脐带经酶消化和组织块培养两种方法进行分离培养,于DMEM-LG培养基中培养,倒置显微镜观察细胞形态,细胞计数绘制生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期及细胞表型,免疫组织化学染色检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力。结果与结论:两种方法均能成功地从大鼠脐带中获得大量的间充质干细胞:原代培养显示,胶原酶消化法比组织块培养法的效率更高,大约10d就可以进行传代,而组织块培养法要14d才能传代;传代扩增两者之间没有差别。免疫表型分析显示,大鼠脐带源细胞表达黏附分子和基质细胞标记CD90、CD106,不表达造血细胞标记CD34、CD45。体外诱导实验证实,大鼠脐带间充质干细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。; 刘奎利石炳毅刘德忠金建刚李海斌史迎昌冯凯肖漓; 关键词：脐带间充质干细胞生物学性状脐带干细胞

移植肾小球炎的细胞类型及其与管周毛细血管C4d沉积的关系: 2010年; 目的研究同种异体肾移植术后急性排斥患者肾小球炎的细胞类型及其与管周毛细血管（PTC）C4d沉积的关系.方法 2006年6月至2009年6月在本中心行同种异体肾移植手术后,肾功能异常且病理证实为急性排斥并发小球炎受者51例的肾活检组织为研究对象.免疫组化方法检测同一活检标本连续切片内T细胞表面标记物CD3、巨噬细胞表面标记物CD68、体液性排斥特异性标记物C4d、细胞毒T淋巴细胞标记物颗粒酶B及调节性T淋巴细胞标记物Foxp3的表达情况.根据PTC有无C4d沉积将受者分为C4d阳性组和C4d阴性组,定量计数小球内阳性细胞数,并计算每个小球的平均细胞数.结果 C4d阳性与C4d阴性的急性排斥受者小球内浸润的炎细胞数分别为17.79±7.70和8.17±3.80,差异有统计学意义（P＜0.01）.C4d阳性急性排斥受者小球内以巨噬细胞浸润为主,与C4d阴性者差异有统计学意义（13.73±7.03比2.57±1.22,P＜0.01）.C4d阴性急性排斥受者小球内以T淋巴细胞为主,与C4d阳性者差异有统计学意义（5.60±2.81比4.05±2.60,P=0.023）.C4d阴性与C4d阳性急性排斥受者小球内T淋巴细胞都以细胞毒细胞为主（3.37±2.34比4.27±2.41,P=0.141）,而没有调节性T淋巴细胞的浸润.结论肾移植术后急性排斥患者小球内炎细胞浸润总数与PTC的C4d沉积有关.C4d阳性患者小球炎细胞数多于C4d阴性患者.C4d阳性患者小球炎细胞以巨噬细胞浸润为主;C4d阴性患者小球炎细胞以T淋巴细胞浸润为主.两组患者小球内T淋巴细胞都以细胞毒细胞为主.; 金娟王慧萍赵杰何强毕艳陈江华; 关键词：肾小球 C4D

肾移植后BK病毒相关性肾病的早期诊断被引量：3: 2012年; 背景:联合检测对于早期诊断BK病毒相关性肾病有着重要意义,目前研究较少。目的:探讨肾移植后联合检测诊断BK病毒相关性肾病的方法,并初步分析其临床应用价值。方法:留取84例肾移植患者的尿液和外周血标本,进行BK病毒感染负荷的实时荧光定量PCR和尿液巴氏染色检测,同时进行移植肾病理穿刺病理组织学及免疫组化检测,用于早期诊断BK病毒相关性肾病。结果与结论:2例患者诊断为BK病毒相关性肾病,占移植肾活检病例的2.5%。2例患者证实BK病毒相关性肾病后予以免疫抑制剂减量,肾功能明显好转。结果显示以上方法联合检测可提高BK病毒相关性肾病的诊断率,简便、可靠、准确,为进一步研究BK病毒感染与肾移植后移植物丢失的关系奠定了基础。; 韩永蔡明钱叶勇王新颖黄海燕许晓光肖漓周文强冯凯石炳毅; 关键词：肾移植 BK病毒巴氏染色实时荧光定量PCR 病理学

受者同系骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠的免疫调节作用被引量：4: 2012年; 目的观察静脉注射受者同系骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠心脏移植免疫反应的影响。方法以20只成年雄性Lewis大鼠作为心脏供体,20只成年雄性Wistar大鼠作为受体,将其随机分为2组,每组10只,行颈部心脏移植:对照组(A组)手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9%氯化钠注射液;MSC处理组(B组)手术后24h,经尾静脉注射2×106个MSC(悬浮于3ml 0.9%氯化钠注射液中)。术后1周,每组随机取受体大鼠4只,检测静脉血及移植物CD4+、CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25highfoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值。其余6只大鼠用于继续观察移植物存活时间。结果 A组大鼠移植心脏存活7.2±1.3d,B组大鼠移植心脏存活14.8±2.9d,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。B组静脉血中CD4+/CD8+值、CD4+CD25highT细胞占总淋巴细胞的比例、CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为1.18±0.07、2.51%±0.56%、2.05%±0.62%)均明显高于A组(分别为0.49±0.05、0.96%±0.19%、0.82%±0.09%),差异有统计学意义(P<0.01)。移植心脏中CD4+/CD8+值在两组间无统计学差异(P>0.05);B组移植心脏中CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为2.74%±0.28%、2.54%±0.31%)均明显高于A组(分别为0.61%±0.06%、0.53%±0.06%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论静脉注射受者同系骨髓MSC可诱导大鼠心脏移植免疫耐受,延长移植心脏的存活时间。; 刘德忠石炳毅刘奎利金建刚李海斌肖漓张晓毅邹练; 关键词：间质干细胞心脏移植免疫调节移植物排斥

细胞因子对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响被引量：8: 2011年; 目的研究外源性肿瘤坏死因子β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6和IL-23对小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌的影响,并初步探讨其在器官移植免疫中的调节机制。方法用佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)刺激小鼠脾单个核细胞4h,将细胞因子与脾单个核细胞共培养72h,根据加入细胞因子的不同,将培养细胞分为空白对照组、TGF-β组、TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组。流式细胞术分析各组Th17细胞比例,半定量RT-PCR检测各组细胞核孤儿受体mRNA(RORγt mRNA)和IL-17mRNA的表达变化,ELISA测定各组细胞培养上清液中IL-17蛋白浓度。结果空白对照组及TGF-β组未见Th17细胞和RORγt mRNA的表达,TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞比例差异具有统计学意义(0.30%±0.14%vs 0.51%±0.11%,P<0.01),RORγt mRNA的表达差异具有统计学意义(0.217±0.038 vs 0.458±0.127,P<0.01)。空白对照组与TGF-β组IL-17mRNA表达强度差异无统计学意义(0.868±0.222 vs 0.799±0.205,P>0.05),IL-17蛋白浓度差异无统计学意义(90.04±22.56pg/ml vs125.38±27.58pg/ml,P>0.05),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA差异具有统计学意义(1.396±0.359 vs 2.415±0.604,P<0.01),TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17蛋白浓度差异具有统计学意义(973.32±217.33pg/ml vs 1498.46±317.27pg/ml,P<0.01)。TGF-β+IL-6组与TGF-β+IL-6+IL-23组IL-17mRNA表达强度、IL-17蛋白浓度均高于空白组与TGF-β组(P<0.01)。结论 TGF-β+IL-6在体外能促进小鼠脾单个核细胞Th17分化和IL-17分泌,IL-23能明显增强这种作用。; 郑慧丽李海斌肖漓赵薇杜国盛王振石炳毅; 关键词：细胞因子类单个核细胞 TH17 白细胞介素17

国家科技支撑计划(2008BAI60B04)

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