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沉默lycB基因对雨生红球藻类胡萝卜素合成代谢的影响: 雨生红球藻是一种淡水浮游单细胞绿藻,逆境条件下可积累大量的类胡萝卜素。番茄红素是类胡萝卜素中的一种,是类胡萝卜素合成代谢中的一个重要中间产物。番茄红素β-环化酶(LycB)是催化番茄红素环化成β-胡萝卜素的关键酶。本; 龚文芳路立京刘鑫陈喜文陈德富

利用雨生红球藻表达系统高通量筛选活力提高的阿特拉津氯水解酶突变子被引量：1: 2011年; 阿特拉津氯水解酶定向改造的关键是开发一种廉价的、表型改变明显的高通量筛选方法。利用高错误倾向PCR和DNA洗牌相结合的突变方法,对来源于假单胞菌ADP和节杆菌AD1的阿特拉津氯水解酶基因进行随机突变,以雨生红球藻为受体、以阿特拉津为选择压力对突变文库进行高通量筛选。筛选到的12个突变子序列分析显示,突变均为点替换,位点分散在全基因上,是在高错误倾向PCR及DNA洗牌过程中逐渐累积形成的。酶活力分析显示,突变子的酶活力均高于野生株,在添加1.0 mg/L阿特拉津培养液中的活力是野生株的1.9~3.6倍,在添加2.0 mg/L阿特拉津培养液中的活力是野生株的1.7~2.6倍,粗酶提取物的活力是野生株的1.7~2.7倍。上述结果表明,雨生红球藻表达系统是定向改造阿特拉津氯水解酶的高通量筛选平台。; 王绘砖陈喜文郝晓华陈德富; 关键词：定向进化雨生红球藻高通量筛选酶活性

杜氏藻应用现状与展望被引量：5: 2009年; 杜氏藻(Dunaliella)是一种无细胞壁的双鞭毛单细胞真核绿藻。综述了利用各种杜氏藻生产类胡萝卜素、高营养藻粉、多糖、甘油和生物制品,以及在提高植物耐盐性、废水处理、环境指示和石油地质方面的应用现状和前景,以期为更好地开发杜氏藻资源提供全面、系统的资料。; 侯召丽刘鑫郝晓华陈喜文陈德富; 关键词：杜氏藻绿藻类胡萝卜素

类胡萝卜素细胞工厂——杜氏藻养殖研究进展被引量：7: 2010年; 杜氏藻是目前生产天然β-胡萝卜素最好的商品化微藻,其β-胡萝卜素含量最高达细胞干重的14%(质量分数)。此外,通过紫外线或化学诱变剂处理,也能获得用来生产八氢番茄红素、番茄红素、叶黄素和玉米黄素等其他类胡萝卜素突变株。为使杜氏藻类胡萝卜素商业开发顺利进行,分析光、温度、pH值、营养、天敌等养殖条件对杜氏藻生长和类胡萝卜素积累的影响;比较大型开放池、循环池、回旋池、级联池、大罐、异养发酵罐及封闭式光合反应器等养殖方式的利弊;同时,总结培养液再循环、藻体采集、藻泥干燥、类胡萝卜素提取等藻体采收的有益经验。; 牟春琳郝晓华刘鑫陈喜文陈德富; 关键词：类胡萝卜素杜氏藻盐藻 Β-胡萝卜素

甘油代谢对杜氏盐藻盐耐受性的调节被引量：3: 2011年; 杜氏盐藻是迄今发现的世界上最耐盐的单细胞真核生物,能在0.05 mol/L至饱和NaCl浓度下正常生长,因此其耐盐机制倍受人们关注。研究发现,杜氏盐藻盐耐受性与甘油代谢密切相关。为此,我们综述其耐盐机制、甘油代谢调控、甘油代谢与盐耐受性关联性、甘油代谢重要酶的分子生物学研究等进展,希望对深入研究植物耐盐机制、培育耐盐作物新品种及开发甘油等高附加值次生代谢产物等研究提供有益帮助。; 赵丽娜陈喜文陈德富; 关键词：耐盐机制代谢调控杜氏盐藻

工业生产β-胡萝卜素杜氏藻的分离及种属鉴定被引量：2: 2009年; 杜氏藻(Dunaliella)是生产天然β-胡萝卜素的良好资源,受到世界各国的广泛关注。为了研究和改造其类胡萝卜素代谢途径,利用离心和抗生素筛选相结合的方法对7株生产β-胡萝卜素用的工业藻种进行了分离和纯化。rDNA凝胶电泳图显示,分离的7株藻种中,6株能扩增出0.9 kb^1.7 kb不等的单一条带,表明已分离到单一藻种。在此基础上测定了各藻种转录间隔区1(ITS1)序列,并建立了系统进化树。结果显示,其中3株属于D.viridis类,另3株为D.salina。同时对杜氏藻的生长、工业藻种的分离、D.viridis对生产β-胡萝卜素工业藻的污染及D.salina与D.bardawil分类等问题进行了讨论。; 牟春琳陈喜文侯召丽王绘砖陈德富辛乃宏郭连城张俊杰; 关键词：杜氏藻系统进化树种属鉴定 Β-胡萝卜素

沉默lycB基因对雨生红球藻类胡萝卜素合成代谢的影响被引量：4: 2013年; 雨生红球藻是一种淡水浮游单细胞绿藻,逆境条件下可积累大量的类胡萝卜素。番茄红素是类胡萝卜素中的一种,是类胡萝卜素合成代谢中的一个重要中间产物。番茄红素β-环化酶(LycB)是催化番茄红素形成β-胡萝卜素的关键酶。文章以杜氏盐藻lycB基因为干扰序列,构建了含卡那霉素与阿特拉津双抗性的RNAi载体p1301-BS-RNAi。将其电转化进雨生红球藻细胞,经抗性筛选、基因组PCR及RT-PCR筛选,获得了16个独立的干扰株系。选取生长良好的7个进行高光诱导,发现其番茄红素含量增加了99.4%,β-胡萝卜素含量减少了48.4%,即通过异源的lycB-RNAi基因沉默可抑制番茄红素向β-胡萝卜素的转化。对比分析发现,番茄红素增加量仅是β-胡萝卜素减少量的5%,表明因lycB-RNAi抑制而产生的番茄红素的95%又被其他通路转换成了其他代谢产物,因此要实现雨生红球藻番茄红素含量的大幅增长,需协同调控其他代谢通路。; 龚文芳路立京刘鑫陈喜文陈德富; 关键词：雨生红球藻番茄红素Β-环化酶 RNAI 番茄红素代谢通路

盐胁迫下杜氏盐藻甘油代谢相关基因的表达与酶活性分析: 杜氏盐藻具有高度耐盐性,可在0.05mol/L至饱和盐浓度中生长,其盐胁迫调控与其甘油含量有关,但调控机制仍存在巨大争议。甘油含量分析显示,培养液盐度转换后1h即有大量甘油合成,至24h,甘油含量增加至2.3倍。半定量R...; 赵丽娜陈喜文陈德富; 关键词：杜氏盐藻酶活性; 文献传递

利用微藻生产维生素E的研究现状与应用前景被引量：1: 2011年; 维生素E(生育酚)是一种人体和动物所必需的脂溶性营养成分。植物油等组织是天然维生素E的重要来源之一。但植物组织中生育酚含量低,且大多为低活性类型。利用微藻进行维生素E生产很具商业化前景。其中裸藻生长速度快,α-生育酚含量高,可占生育酚总量的97%以上。对利用微藻生产维生素E的研究现状和应用进行了综述。; 史晓丽陈德富陈喜文; 关键词：生育酚抗氧化微藻

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海洋公益性行业科研专项(200805044)