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国际科学基金(A4108-1)

作品数:2 被引量:11H指数:2
相关作者:刘永杰陆承平蒋蔚孟喜龙更多>>
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相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇单胞菌
  • 2篇嗜水气单胞菌
  • 2篇气单胞菌
  • 1篇弹性蛋白
  • 1篇弹性蛋白酶
  • 1篇正交
  • 1篇正交试验
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫原性
  • 1篇免疫原性分析
  • 1篇J

机构

  • 2篇南京农业大学

作者

  • 2篇陆承平
  • 2篇刘永杰
  • 1篇蒋蔚
  • 1篇孟喜龙

传媒

  • 1篇中国水产科学
  • 1篇南京农业大学...

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
嗜水气单胞菌J-1株OmpA融合蛋白的高效表达及免疫原性分析被引量:7
2008年
以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)J-1株基因组为模板,根据GenBank已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白的基因序列设计1对引物,扩增去除信号肽序列的成熟外膜蛋白OmpA的基因片段,定向克隆至表达质粒pET32a(+)中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序。结果表明,插入片段长度为948bp,与NCBI上登录的几个相关序列相比,同源性在93.1%-95%之间,缺失4个氨基酸。将重组原核表达质粒pET32a-OmpA转化至大肠杆菌BL21(DE3),经诱导可表达分子量约57.4kD的蛋白,凝胶薄层扫描显示OmpA在转化菌中表达量占全菌蛋白的50%以上。用兔抗J-1株总外膜蛋白血清进行Western blot,在57.4kD处有明显反应条带。融合蛋白经Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化后免疫新西兰兔制备抗血清,ELISA效价达1:12800以上。Western blot检测结果显示,该血清与9株具有代表性的气单胞菌的分子量约35kD的外膜蛋白均有较强反应,说明所表达的融合蛋白不仅保持原有外膜蛋白的免疫原性,而且提示OmpA可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。[中国水产科学,2008,15(2):301—306]
蒋蔚刘永杰陆承平
关键词:嗜水气单胞菌免疫原性
嗜水气单胞菌产弹性蛋白酶条件的优化被引量:4
2007年
对嗜水气单胞菌产弹性蛋白酶条件进行如下优化:用单因素法优化了氮源、碳源等培养基成分及温度和初始pH值等培养条件;用三因素三水平的正交试验对氮源浓度、碳源浓度、盐离子浓度进行优化。结果发现:较低浓度的氮源、碳源有利于酶的产生,表面活性剂能明显提高酶的产量。嗜水气单胞菌产弹性蛋白酶的最佳条件:胰蛋白胨5 g.L-1,蔗糖5 g.L-1,NaCl 2.5 g.L-1,K2HPO42.0 g.L-1,Tween-80 1 g.L-1,初始pH为7.5,28℃培养48 h。
孟喜龙刘永杰陆承平
关键词:嗜水气单胞菌弹性蛋白酶正交试验
共1页<1>
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