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利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库被引量：8: 2010年; 以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重组反应将雪莲cDNA重组到植物表达载体pLEELA上,从而构建了天山雪莲cDNA表达文库。结果表明:cDNA入门文库滴度达到1.2×107cfu/mL,文库总容量为4.8×107cfu。表达文库的滴度为6.9×106cfu/mL,文库总容量为2.76×107cfu,插入片段平均大小1000 bp。阳性克隆率100%。天山雪莲cDNA表达文库的建立为进一步高通量筛选天山雪莲抗寒基因奠定了基础。; 李晨沈海涛张煜星王爱英祝建波; 关键词：天山雪莲 CDNA表达文库 GATEWAY技术

天山雪莲冷调节蛋白基因siCOR转化烟草植株的抗旱性分析被引量：11: 2012年; 冷调节蛋白(cold regulated proteins,CORPs)是植物在冷驯化下产生的特异性蛋白,与植物的抗寒性密切相关。然而,大量研究表明,绝大多数植物冷诱导基因同样会响应水分胁迫。采用半定量RT-PCR分析天山雪莲(Sasussured in-volucrata)冷调节蛋白基因siCOR的表达,结果表明siCOR是一个受干旱胁迫诱导表达的基因。为研究siCOR基因是否与抗旱性相关,以siCOR转基因烟草为研究材料,利用水分胁迫处理进行抗旱性分析。结果表明与野生型(wild-type,WT)相比,转siCOR植株叶片萎蔫较迟且程度较轻,复水后恢复快且较完全;其叶片相对含水量和PSII相对量子产率的降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株。采用PEG6000模拟干旱胁迫,发现转siCOR植株T3代种子的萌发率较高,主根生长的受抑制程度较野生型轻。以上结果表明,siCOR基因在植物对干旱胁迫的响应中起重要作用。; 郭新勇程晨王爱英张煜星王重喻娜祝建波; 关键词：抗旱性天山雪莲烟草

薄荷组织培养及抗除草剂基因的遗传转化: 2018年; 薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)是一类用途广泛的中药材,是世界三大香料之一,也是我国重要的经济作物。以薄荷茎段为外植体,建立高效的薄荷离体培养植株再生体系,确定草甘膦筛选的选择压,并将带除草剂标记的植物表达载体p BI121-Ubi-epsps通过农杆菌介导转化薄荷,用PCR和RT-PCR法对转化薄荷进行分子鉴定。结果表明,薄荷对除草剂草甘膦的最适筛选浓度为10 mg/L,通过分子鉴定确定转基因薄荷已获得。试验结果对后期杂种优势的利用、种质资源的保存以及植物新品种的培育奠定基础,具有重要的理论与实践意义。; 梁文洁张丽郭新勇王爱英向本春祝建波; 关键词：薄荷除草剂

天山雪莲△9硬脂酰脱饱和酶基因信号肽的功能分析: 2010年; 为了验证天山雪莲△9硬脂酰脱饱和酶基因sikSAD信号肽的功能,本研究利用PCR法从已构建的天山雪莲cDNA文库中克隆了sikSAD的96bp信号肽序列,将其与报告基因GFP连接,成功构建了融合基因植物表达载体pCMBIA2301-sp-GFP。通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草NC89,获得转基因植株。通过激光共聚焦显微镜观察GFP在转基因烟草叶片中的激发荧光,确定天山雪莲△9硬脂酰脱饱和酶sikSAD定位于天山雪莲的叶绿体中。; 陈尚珂孙建富王爱英沈海涛祝建波; 关键词：导肽 GFP 亚细胞定位

拟南芥冷诱导型启动子CBF3驱动IPT基因在烟*草中的表达被引量：2: 2012年; 用PCR的方法获得拟南芥冷诱导型启动子CBF3和农杆菌Ti质粒上的IPT基因,构建由启动子CBF3驱动IPT植物表达载体,并经农杆菌介导将基因整合到烟草的基因组中,利用Kan筛选、PCR和RT-PCR检测,最终获得转基因的植株。通过对烟草的植物学性状和农艺学性状的分析发现,随着启动子CBF3驱动的IPT基因在烟草中的表达,使得植株性状发生很大的改变,如株型变为塔型,株高增高,节距增长,且有很多的分枝和侧芽,叶片明显增多,表现出短窄且平滑的性状,茎围、腰叶长和腰叶宽都减小许多,相应的最大叶面积、顶叶面积和叶质量也都下降,但叶的密度却有所增加。; 郭新勇程晨张选祝建波; 关键词：表型

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国家自然科学基金(30960034)