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乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损的研究被引量：8: 2009年; 目的研究乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用。方法将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面。移植后2d,将SPF级裸鼠随机分为实验组和模型对照组,每组4只。实验组选用乳没生肌散对创面进行外敷治疗,隔日换药;模型对照组创面不用药物治疗,隔日涂以生理盐水。组织工程皮肤移植后9d取材,取移植处组织行冰冻切片,HE染色,观察创面局部表皮厚度及真皮中毛细血管增生情况,免疫荧光双标检测真皮层中Ln、Ⅰ型胶原的表达。结果组织工程皮肤移植后9d,实验组与模型对照组相比,创面移植处表皮增厚,真皮中毛细血管增生较多,Ln、Ⅰ型胶原的的分泌增强。结论乳没生肌散具有促进组织工程皮肤修复皮肤创面的作用。; 刘爱军靳俊峰黄粤杜标炎; 关键词：组织工程皮肤皮肤缺损

人骨髓间充质干细胞分离培养鉴定及VEGF基因的转染被引量：1: 2011年; 目的:探讨人骨髓间充质干细胞(hMSC)分离培养、鉴定方法及人血管内皮生长因子(hVEGF)165基因转染hMSC后表达情况,拟构建血管化组织工程皮肤。方法:用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,筛选贴壁细胞培养并传代。观察细胞形态,生长情况。检验细胞CD44、CD29、CD14、CD45等表面标记。利用基因重组技术,构建pCDN3.1+VEGF表达质粒,并将其转染第3代hMSC。经G418抗性筛选后扩大培养并用Western blot实验检测其蛋白产物。结果:骨髓密度梯度离心法分离hMSC,接种培养瓶后26 h呈对数生长,6 d后达到高峰。hMSC表达CD29,CD44,不表达造血细胞标记物CD14和CD45。通过酶切鉴定验证成功构建pCDN3.1+VEGF表达质粒。Western blotting实验证实转染后hMSCS表达VEGF增加。结论:成功建立hMSC分离培养鉴定体系。利用基因重组技术可成功将hVEGF基因导入hMSC并产生预期效应。; 黄粤戴丽冰钟晓旻沈雁李叶扬李孝建; 关键词：人骨髓间充质干细胞 VEGF 转染

人骨髓间充质干细胞体外分离培养与鉴定被引量：2: 2011年; 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)体外分离培养、鉴定条件及方法,探讨其作为种子细胞构建血管化组织工程皮肤可行性。方法用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,筛选贴壁细胞培养并传代。观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,检验细胞CD44、CD29、CD14、CD45等表面标记。采用定向诱导分化方法体外鉴定hBMSCs所具有的多项分化能力。结果骨髓密度梯度离心法分离hBMSCs,接种培养瓶后呈克隆样贴壁生长。在特定培养基中hBMSCs可向成骨、成脂及成软骨方向转化。结论成功建立hBMSCs分离培养鉴定体系。所培养的hBMSCs可以成为皮肤组织工程较为理想的种子细胞。; 黄粤戴丽冰钟晓旻沈雁李叶扬李孝建; 关键词：人骨髓间充质干细胞细胞培养

龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损的作用被引量：25: 2009年; 【目的】观察龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用。【方法】将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面;实验动物随机分为4组,选用"活血圣药"龙血竭于移植后2d分别进行创面外敷、单纯口服、创面外敷+口服治疗,并设空白对照组。组织工程皮肤移植后9d取材检测,观察创面局部表皮厚度、真皮层中层粘连蛋白(Ln)、Ⅰ型胶原蛋白的表达及毛细血管增生情况。【结果】龙血竭能促进组织工程皮肤移植后表皮的发育及真皮层中毛细血管的增生,增强Ln、Ⅰ型胶原蛋白的分泌,龙血竭外敷+口服组效果最佳。【结论】龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤创面有促进作用。; 刘爱军朱永红赵钟祥张立群杜标炎邝枣园李彩霞易华; 关键词：皮肤移植细胞培养

生肌中药对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响被引量：2: 2010年; 目的:探讨乳没生肌散、龙血竭对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响。方法:利用人成纤维细胞、角质形成细胞构建组织工程皮肤,并植入裸鼠皮肤缺损创面,实验动物随机分为乳没生肌散外敷组、龙血竭外敷组、龙血竭内服组、龙血竭外敷并内服组5组,并以不用药组为对照组。术后9d取材,冰冻切片,行HE染色,免疫荧光双标检测VEGF的表达。结果:术后9d,各组创面愈合,表皮层较厚,真皮层致密,生肌中药治疗后毛细血管增生明显,VEGF阳性表达增强,龙血竭外敷并内服组表达最强。结论:生肌中药能促进组织工程皮肤移植后VEGF的表达,有利于再血管化。; 靳俊峰刘爱军杜标炎; 关键词：组织工程皮肤龙血竭

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广东省中医药管理局基金(2008004)