福建省自然科学基金(B0010028)
- 作品数：8 被引量：132H指数：6
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- 番鸭呼肠孤病毒M3基因克隆及序列分析
- 2008年
- 参考Genbank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)M3基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株M3基因进行RT-PCR扩增,克隆到pMD18-T载体中,并对克隆产物进行酶切鉴定。结果番鸭呼肠孤病毒M3基因长度为1997bp,而禽呼肠孤病毒长度为1996bp。5’末端和3’末端具有保守序列,分别为5’GCTTTTT和TCATC-3’。番鸭呼肠孤病毒M3基因开放阅读框(25-1683bp)编码552个氨基酸组成的蛋白,分子量约60ku,禽呼肠孤病毒在1169位少一个碱基C,阅读框(25-1932bp)编码635个氨基酸。番鸭呼肠孤病毒MW9710株M3基因与法国89330株核苷酸同源性为87.2%,氨基酸同源性为95.3%;而与禽呼肠孤病毒的核苷酸同源性低于72.5%,氨基酸同源性低于82%。表明番鸭呼肠孤病毒是不同于禽呼肠孤病毒的独立基因群。
- 林锋强朱小丽胡奇林欧阳岁东程晓霞陈仕龙王劭陈少莺
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒克隆
- 应用RT-PCR技术检测番鸭呼肠孤病毒被引量：41
- 2004年
- 参考 Gen Bank中番鸭呼肠孤病毒 (m uscovy duck reovirus,MDRV ) S1基因序列 ,用计算机设计并合成了 1对引物 HP11、HP12 ,以此引物用 RT- PCR对番鸭呼肠孤病毒 S1基因进行了特异性扩增。结果表明 :引物 HP11、HP12能从所有供试的 4株分离毒 MDRV- MW9710、MW980 6、MW980 9、MW9810扩增出 30 0 bp S1基因 c DNA片段 ,而不能从禽呼肠孤病毒 (ARV) S1133株和番鸭胚成纤维 (MDEF)细胞培养物中扩增出任何片段 ;该 RT- PCR的检测灵敏度为 1pg的病毒核酸 ,特异性强 ,重复性好 ,对含毒细胞培养液和尿囊液只需用氯仿进行简单处理 ,即能检测出 MDRV核酸。因此认为 ,该 RT-
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- 关键词：RT-PCR番鸭呼肠孤病毒基因序列
- 番鸭呼肠孤病毒病雏番鸭实质器官的超微结构被引量：28
- 2006年
- 对人工感染番鸭呼肠孤病毒发病雏番鸭的心、肝、肺、肾、脾脏、胸腺、法氏囊等7种实质器官的超微结构进行了观察。电镜下发现:心、肝、肺、肾等实质器官出现不同程度的细胞变性、水肿以及局灶性溶解坏死;各器官血管内皮细胞脂滴增多、水肿以至坏死脱落,通透性增加;浆细胞、淋巴细胞和吞噬细胞呈散在或灶性浸润于坏死区和实质细胞间。免疫器官脾脏、胸腺和法氏囊中的部分淋巴细胞、浆细胞坏死和不同程度凋亡,且细胞溶解坏死形成大小不一的坏死灶并被大量增生的吞噬细胞所吞噬,淋巴细胞数量明显减少。上述结果提示,番鸭呼肠孤病毒能导致番鸭免疫抑制。
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- 关键词：番鸭呼肠孤病毒雏番鸭器官超微结构
- 番鸭呼肠孤病毒MW9710株S1基因片段的克隆及序列分析被引量：25
- 2004年
- 参考GenBank番鸭呼肠孤病毒(muscovyduckreovirus,MDRV)S1基因序列设计合成一对引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株S1基因进行RT＿PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物为300bp,与预期的目的片段大小一致,经PCR、酶切反应鉴定后克隆到pGEM＿Teasy载体中,核苷酸序列经BLAST软件分析表明:番鸭呼肠孤病毒MW9170株S1基因的目的片段与番鸭呼肠孤病毒法国89026株同源性为91 7%,与鸡关节炎病毒S2基因同源性为68 7%,结果提示番鸭呼肠孤病毒MW9710株与鸡关节炎病毒亲缘距离较远。
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- 关键词：番鸭呼肠孤病毒S1基因基因克隆双链RNA
- 番鸭呼肠孤病毒M3基因克隆及序列分析
- 参考Genbank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)M3基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株M3基因进行RT-PCR扩增,克隆到pMD18-T载体中,并对克隆产物进行酶切...
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- 关键词：番鸭呼肠孤病毒克隆
- 文献传递
- 番鸭呼肠病毒的分离与RT-PCR鉴定被引量：5
- 2005年
- 从发病番鸭中分离到1株病毒,用该病毒接种番鸭胚,至第2代可引起鸭胚死亡,胚体出血,部分鸭胚肝脾有少量白点。分离毒经用RT-PCR方法进行检测,可与番鸭呼肠病毒标准株扩增出大小一致的特异条带,证实该分离毒为番鸭呼肠病毒。
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- 关键词：番鸭呼肠病毒
- 番鸭呼肠孤病毒σB和σNS基因克隆及序列分析被引量：7
- 2006年
- 参考GenBank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,DRV)σB和σNS基因序列设计合成引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株σB和σNS基因进行RT-PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物分别为1154bp和1113 bp,与预期的目的片段大小一致。核苷酸序列经BLAST软件分析表明：番鸭呼肠孤病毒MW9710株σB基因与番鸭呼肠孤病毒法国89026株同源性为88．1%；氨基酸同源性为94．0%：σNS基因与法国89026株和89330株同源性分别为93．8%和93．1%；氨基酸同源性为95．9%和95．1%。而σB和σNS基因与禽呼肠孤病毒的同源性约为60%～80%。表明番鸭呼肠孤病毒是不同于禽呼肠孤病毒的独立基因群。
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- 关键词：番鸭呼肠孤病毒
- 番鸭呼肠孤病毒的鉴定被引量：64
- 2004年
- 从以软脚为主要临床症状,以肝、脾表面有多量灰白色坏死点,肾肿大及出血为主要病变的病番鸭肝、脾组织中分离到5株病毒(MW9710、MW9803、MW9806、MW9809和MW9810)。雏番鸭和雏鹅经人工感染后出现与自然病例相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒。樱桃谷鸭、麻鸭和鸡人工感染不发病。经电镜观察,病毒呈球形,正二十面体,立体对称,无囊膜,有双层衣壳,直径为60nm～73nm,病毒粒子在胞浆中增殖。病毒对乙醚、氯仿、胰蛋白酶、50℃处理1h和3%甲醛处理不敏感。对pH3处理2h、60℃处理30min和紫外线照射敏感。1mol/LMg Cl2不能增强病毒的感染力。病毒核酸型为dsRNA,病毒核酸具有禽呼肠孤病毒的特征:有10条带,按其大小可分为三类:大片段(L1～L3)、中片段(M1～M3)和小片段(S1～S4)。但是MW9710株的M2和S1～S4片段的迁移率明显不同于鸡关节炎病毒(ARV)S1133株,而与番鸭呼肠孤病毒法国株(89330、89026株)的核酸电泳图谱极为相似。在血清中和试验中,ARVS1133和MW9710株互不交叉。并且,以针对ARVS1基因的特异性引物XZ11、XZ12对MW9710株等进行RT PCR扩增,只能从ARV中扩增出特异性条带;而以MDRV89026株S1基因的特异引物HP11、HP12进行RT PCR扩增,只能从MW9710等分离毒株中扩增出特异性条带。上述结果表明。
- 胡奇林陈少莺林锋强程晓霞林天龙江斌陈仕龙程由铨李怡英朱小丽
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒基因
- 番鸭肝白点病病理学研究被引量：12
- 2002年
- 应用番鸭肝白点病分离毒人工感染1日龄雏番鸭,并对发病鸭的肝、脾、心、肺、肾、胰、法氏囊、胸腺、脑和肠等10种器官组织进行了病理组织学观察。结果表明,试验感染发病鸭特征性病理变化主要为肝脾表面及切面的灰白色坏死点;显微结构变化表现为各器官不同程度变性、细胞溶解坏死及血管扩张充血,病灶区及血管周围淋巴单核细胞明显浸润;免疫器官脾、胸腺和法氏囊淋巴细胞变性坏死,数量明显减少;其特征性显微结构变化主要为肝组织程度不一的脂肪变性和空泡变性,小空泡融合成网眼状大空泡或肝细胞呈现局灶性溶解,并见淋巴单核细胞从病灶的周边逐渐向中心浸润,最后形成细胞性结节;脾脏淋巴细胞坏死,数量减少,网状结缔组织显露。
- 陈少莺胡奇林江斌程晓霞林天龙陈仕龙李怡英程由铨
- 关键词：番鸭肝白点病病理学
