国家自然科学基金(2376007)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：袁其朋李文进陆阳孙新晓杨蕾蕾更多>>
- 相关机构：北京化工大学北京科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 玫瑰微球菌中treZ基因在毕赤酵母中的表达研究被引量：3
- 2009年
- 首次将玫瑰微球菌中麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)treZ基因序列连接到表达载体pPICZαA中,通过电转化法将构建好的表达载体分别转入巴斯德毕赤酵母GS115和KM71菌株中。利用含有Zeocin的YPD平板筛选到阳性转化子,并经PCR、SDS-PAGE电泳以及Western blot最终验证海藻糖水解酶基因treZ已经整合到巴斯德毕赤酵母的基因组上,并且得到了预期的表达。
- 杨蕾蕾袁其朋李文进孙新晓
- 关键词：MTHASE毕赤酵母分泌表达
- 玫瑰微球菌海藻糖合成相关酶基因的克隆和序列分析被引量：5
- 2006年
- 从玫瑰微球菌QS412中克隆出海藻糖生成相关酶-麦芽寡糖基海藻糖基水解酶的基因treZ,测定了其核苷酸序列并进行了表达。treZ编码的蛋白质有624个氨基酸,分子量为68 kD。它们与已报道的其他微生物的海藻糖生成相关酶的基因进行同源性比较,treZ的同源性分别为33.0%(耐放射异常球菌)、10.1%(硫矿硫化叶菌KM1)、51.9%(节杆菌Q36)、52.8%(根瘤菌M11)和48.5%(短杆菌)。经过氨基酸序列比较分析还发现,所有的海藻糖生成相关酶都含有糖苷酶家族13个中几个高度保守的α-淀粉酶催化活性区,推测这些海藻糖生成相关酶都可能有着共同的进化来源。
- 陆阳袁其朋
- 关键词：玫瑰微球菌海藻糖基因克隆
- 来源于玫瑰微球菌的麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因在大肠杆菌中的融合表达被引量：1
- 2007年
- 设计引物克隆玫瑰微球菌QS412中麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)的基因treZ,通过与pET-28a(+)载体相连,转化入宿主菌E.coli BL21,进行发酵诱导。通过SDS-PAGE检测到外源基因在大肠杆菌中有很高的MTHase表达量,但大部分都以不溶性包含体形式存在。对菌体超声破碎全菌液检测酶活,结果显示了水解酶酶活。这是来源于微球菌属的麦芽寡糖基海藻糖水解酶首次获得基因克隆和活性表达,为进一步提高酶活、增大海藻糖产量奠定了基础。
- 许雅琴袁其朋李文进
- 关键词：玫瑰微球菌海藻糖蛋白表达酶活
- QS412透性化细胞产海藻糖特性研究
- 2007年
- 透性化细胞中在麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶作用下由淀粉生产海藻糖,其使用可省略酶的纯化和胞内酶的固定化。本文研究了金属离子对透性化细胞产海藻糖活性的影响,观察到Mg2+对其活性有提高作用,Zn2+、Mn2+、Cu2+、Fe2+、Hg2+5种2价离子对其活性有明显抑制作用。其中,Hg2+的抑制作用最为明显,而Mn2+的作用未见报道。Zn2+在40 mmol/L浓度以上能完全抑制体系中MTHase的活性,并且这种抑制作用可以通过添加EDTA消除,这就提供了制备MTHase底物及在两种酶存在下单独测定MTSase活性的可能。本征动力学和宏观动力学分析表明透性化细胞合成海藻糖的过程中外扩散影响可忽略,内扩散影响显著。通过对该过程作用特性的研究,为透性化细胞的研究和使用打下进一步的基础。
- 周延张怀袁其朋马润宇
- 关键词：透性化细胞MTSASEMTHASE海藻糖动力学
