国家自然科学基金(30960475)
- 作品数：9 被引量：55H指数：3
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- 癌痛消方中活血化淤药对大鼠移植性肝癌细胞中Fas、FasL及Caspase-3蛋白表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨癌痛消方中使用的大剂量活血化淤药物对肝癌细胞凋亡因子的影响,进一步明确其在抗肿瘤方面的作用机制。方法将40只Walker-256移植性肝癌大鼠模型随机分为4组,即癌痛消全方组、活血化淤药组、非活血化淤药组及模型组,于造模后第8天给药,连续用药14 d后停药24 h,处死大鼠,并取出适量肿瘤组织行流式细胞JC-1染色法检测,并取出适量瘤块行免疫组化法检测其中Fas、FasL、Caspase-3蛋白的表达情况。结果肝癌细胞线粒体膜电位下降的细胞比值(JC-1+%)在活血化淤药组中为(22.34±1.94)%,与癌痛消全方组、非活血化淤组两两比较,差异均显著(P=0.000),与模型组比较,差异无统计学意义(P=0.093)。Fas、FasL和Caspase-3蛋白在活血化淤药组的表达情况与模型组比较,差异无统计学意义(P=0.835、P=0.584和P=0.820);与癌痛消全方组和非活血化淤药组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。三者蛋白表达情况与细胞凋亡检测结果相一致。结论单独使用癌痛消方中大剂量活血化淤药不能明显影响Fas、FasL和Caspase-3蛋白在肝癌细胞中的表达,不能明显干扰细胞凋亡网络信号从而促进肝癌细胞的凋亡,有必要与其他具有抗肿瘤作用药物联合使用。
- 王书杰韦艾凌张永琴陆海颂林元佳韩海涛
- 关键词：活血化淤药FASL
- 癌毒清颗粒对肝癌模型小鼠HIF-1α、VEGF、bFGF的影响被引量：3
- 2019年
- 目的:研究癌毒清颗粒(AG)对肝癌(HCC)模型小鼠HIF-1α、VEGF、bFGF的影响,探讨AG抗HCC的作用机制。方法:昆明小鼠50只,腋下接种H22肝癌细胞,建立肝癌异位移植瘤模型。于接种24h后,将动物随机分为模型组,AG高、中、低剂量组,氟尿嘧啶组。AG各组给予AG灌胃,氟尿嘧啶组腹腔注射氟尿嘧啶。给药12d后,摘取眼球采血,剥取瘤组织,称取瘤重,瘤组织进行病理组织学检查;ELISA法检测小鼠血清中HIF-1α、VEGF、bFGF的水平。结果:H22肝癌小鼠异位移植瘤模型中,各组体重变化无统计学意义(P>0.05)。AG高、中、低剂量组抑瘤率分别为50.91%,35.25%,20.10%,氟尿嘧啶组为43.99%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),其中AG高剂量组抑瘤效果最佳。与模型组比较,各组小鼠血清HIF-1α、VEGF、bFGF浓度均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。病理组织显示,AG三组肝癌细胞大小不等,肝癌细胞密度减少,肝癌细胞排列较分散,间质新生血管分布较少,肿瘤细胞坏死数量较多,细胞核着色欠均匀。结论:癌毒清颗粒能遏制H22肝癌小鼠异位移植瘤的生长,遏制程度和药物的剂量有关。癌毒清颗粒抗癌作用机制之一可能是通过下调缺氧微环境中血管生成促进因子VEGF、HIF-α、bFGF的表达,遏制肝癌移植瘤微血管生成。
- 容佩荣刘凤莉朱倩胥冰寇小妮晁旭黄峰
- 关键词：肝癌缺氧微环境抑瘤
- 癌毒清对肝癌模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度的影响被引量：2
- 2019年
- 目的:观察癌毒清对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度(microvessel density,MVD)的影响。方法:将50只小鼠腋下接种H22肝癌细胞株,建立肝癌异位移植瘤模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组,每组各10只。癌毒清各剂量组给予不同剂量的癌毒清溶液灌胃,氟尿嘧啶组给予氟尿嘧啶腹腔注射,模型组给予等剂量蒸馏水灌胃。给药12 d后,脱颈处死,剥取瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率和病理组织学检查,免疫组织化学法观察MVD。结果:与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组瘤质量降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组抑瘤率分别为50. 91%、35. 25%、20. 10%,氟尿嘧啶组为43. 99%,与模型组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组MVD计数降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:癌毒清的抗癌机制可能是通过降低肿瘤MVD,抑制肝癌微血管生成而实现的。
- 容佩荣刘凤莉朱倩胥冰寇小妮晁旭黄峰
- 关键词：肝癌微血管密度小鼠
- 三种不同剂量二乙基亚硝胺诱癌效果比较被引量：2
- 2013年
- 目的:观察不同剂量二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌效果,确定合适诱癌剂量。方法:将96只100～150g Wistar SPF级雄性大鼠随机分为DEN自由饮水40ppm(A组)、64ppm(B组)、80ppm(C组)及自来水自由饮用组(D组),每组24只,普通饲料喂养,于第16周各组处死12只,取肝组织,观察肝脏形态以及成癌情况,送检病理。各组剩余12只用于观察生存期。结果:第16周诱癌各组未见1例大鼠死亡。病理学检查证实A、D组成癌率为0,B、C组诱癌率分别为83.33%、91.66%,两组成癌率比较无统计学差异;C组可见一巨块型肝癌,A组均表现为肝细胞炎症、水肿、点状坏死、结缔组织轻度增生,小灶脂肪变性。B组肝脏表面弥漫性出现局灶区域肝细胞非典型性增生,癌周结缔组织增生,未发现典型肝硬变表现,C组癌周组织肝细胞弥漫性水肿变形、点状坏死、汇管区炎细胞侵润、结缔组织增生,肝小叶结构大部分破坏。DEN诱发的肝癌为肝细胞癌。结论:以64ppm、80ppm DEN均可作诱癌剂量,64ppm诱癌在生存期方面优于80ppm,64ppm浓度诱癌是一种较理想的用于药物疗效评价的大鼠肝癌模型。
- 黄峰韦艾凌
- 关键词：肝肿瘤二乙基亚硝胺动物
- 癌毒清对DEN诱癌大鼠不同时间点凋亡相关基因影响的研究被引量：3
- 2018年
- 目的通过分析癌毒清颗粒(AG)干预二乙基亚硝胺(DEN)诱导SD大鼠肝癌(HCC)模型在不同时间肝脏病理,肝组织细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax、Fas/Fasl、Casepase-3、Survivin)的表达,揭示AG防治原发性肝癌的机制。方法 40只雄性SD大鼠,随机均分为预防组和对照组,两组均饲以64 ppm浓度的DEN水溶液16周诱癌,然后饲以纯净水。预防组予AG 0.2 g/100 g灌胃,用药6 d,停药1 d,称重调整用药剂量,干预18周。两组在第4、8、12、16、18周分别随机处死4只大鼠,剖腹取出肝脏,选取阳性部位,HE染色,用于病理研究。PCR检测Bcl-2、Bax、Fas/Fasl、Casepase-3、Survivin基因表达。结果预防组各时间点均高表达Caspase-3 mRNA,低表达Bcl-2 mRNA;Fas/Fasl mRNA在第4周显著表达;Bax mRNA第12周显著表达;Survivin mRNA第8周表达下调。结论 AG干预模型大鼠是通过促进Bax mRNA、Caspase-3 mRNA、Fas mRNA表达来实现促进受损细胞、HCC细胞凋亡。另外AG干预后细胞凋亡相关基因表达在各时间点存在不一致性,提示AG防治HCC是通过多种细胞凋亡途径来实现的。
- 黄峰刘凤丽张红张红
- 关键词：肝癌凋亡相关基因
- 癌痛消方对DEN诱癌大鼠不同时间点凋亡相关蛋白的影响被引量：3
- 2017年
- 目的通过分析癌痛消方(AP)干预二乙基亚硝胺(DEN)诱癌大鼠模型在不同时间点的肝脏组织病理变化、细胞凋亡的相关蛋白表达变化,来探讨癌痛消方治疗原发性肝癌的机制。方法将50只♂Wistar大鼠随机分为预防组、模型组(每组20只)和空白对照组(10只),预防组和模型组的大鼠以64 ppm DEN饮水饲养,连续16周。同时,自诱癌之日起,预防组大鼠予以AP灌胃0.2 g·(100 g)^(-1),qd,每周连续用药6 d,给药周期为18周;模型与空白对照组正常饮食,饮水(自来水)。分别在4、8、12、16、18周时,随机各取预防组和模型组的4只大鼠、2只空白对照组的,断颈处死,取肝组织(阳性部位)免疫组化法检测Bax、Bcl-2、survivin、Fas、Fasl、caspase-3蛋白的表达情况。结果空白对照组未见survivin、casepase-3、Fas/Fasl、Bax、Bcl-2蛋白的表达;模型组各时间点均可见凋亡相关蛋白的表达,以凋亡抑制蛋白Bcl-2、survivin表达量较多;AP干预过程可以全程下调survivin、Bcl-2蛋白的表达,上调Fas、casepase、Bax蛋白的表达。结论 AP可以促进受损肝细胞或癌细胞凋亡,其预防和治疗肝癌机理是上调促凋亡蛋白、下调抑凋亡蛋白的表达,促进炎症细胞或肿瘤细胞凋亡。
- 胥冰黄峰韦艾凌韦艾凌张红王小平
- 关键词：癌痛消二乙基亚硝胺
- 三种大鼠移植性肝癌原位模型制作的对比研究被引量：6
- 2012年
- 目的常用大鼠移植性肝癌模型制作方法存在诸多不足,通过对直接注射法的改良以解决其缺陷。方法将90只Wistar大鼠随机分成3组,每组30只,分别以直接注射法、瘤块种植法和改良注射法进行模型制作,观察动物模型的肿瘤生长情况和动物模型的生存情况。结果术后第8天对3组大鼠进行比较,改良注射法模型组(C组)的肿瘤最大直径、体积和质量与直接注射法模型组(A组)、瘤块种植法模型组(B组)间差异并不显著(P>0.05),具有可行性,在肿瘤移植的成功率方面以改良注射法模型组最高;在腹水和腹壁瘤发生率方面C组明显低于A、B两组(P<0.01);生存时间长于A、B两组(P<0.01)。结论基于易行性和重复性考虑而产生的改良注射法,优化了直接注射法的实验操作方法、弥补了直接注射法的缺陷,很好地控制了实验条件,既拥有直接注射法的易行性,又提升了其可重复性,同时保证了动物模型的适用性和可靠性。
- 王书杰韦艾凌张永琴陆海颂林元佳韩海涛
- 关键词：WISTAR大鼠移植性肝癌动物模型
- 癌痛消方调控大鼠移植性肝癌细胞Survivin及Bcl-2的实验研究被引量：14
- 2012年
- 目的从分子层面了解癌痛消方抗肿瘤的主要作用机制,明确不同功效药物组在抗肿瘤中所扮演的角色,从而深入阐释"癌毒"论的客观实质性。方法采用Walker-256瘤株进行Wistar大鼠的移植性肝癌的造模,造模成功后随机分为5组,即全方组、理气活血(拆方Ⅰ)组、清热解毒(拆方Ⅱ)组、扶正培元(拆方Ⅲ)组、模型组,每组10只,分别给予相应药物治疗14天,最后处死大鼠,并取出瘤块,分别应用流式细胞仪Annexin V/PI法检测肿瘤细胞凋亡率和细胞周期、免疫组化法和实时荧光定量RT-PCR法检测瘤块中Bcl-2、Survivin蛋白和mRNA的表达情况。结果 (1)全方组能明显促进肝癌细胞凋亡;并能影响肝癌细胞周期,使大部分细胞停滞于G0/G1期,有效阻止肝癌细胞增殖。拆方Ⅱ组与全方组疗效一致,差异无统计学意义(P>0.05);拆方Ⅲ组有效,但其效果不如前两者,差异有统计学意义(P<0.01);(2)癌痛消方能明显下调肝癌细胞中Survivin和Bcl-2蛋白和mRNA的表达;清热解毒药物在下调肝癌细胞中Survivin和Bcl-2蛋白和mRNA的表达效果显著,与癌痛消方功效相近(P>0.05),扶正培元药物疗效不及前两者,差异有统计学意义(P<0.01),活血化瘀药物一定程度上上调Survivin和Bcl-2蛋白和mRNA的表达。结论 (1)癌痛消方能明显通过下调肝癌细胞中Survivin和Bcl-2蛋白和mRNA的表达,致使肝癌细胞凋亡比值升高,肝癌细胞增殖受到抑制;(2)清热解毒药物在癌痛消方中起到了最为重要的作用,湿热毒邪是肿瘤发病中最根本的致病因素,正气亏虚也是肝癌起病的条件之一,痰、瘀等病理产物作用机制不明,有待进一步研究。
- 王书杰韦艾凌张永琴陆海颂林元佳韩海涛
- 关键词：湿热毒邪肝癌细胞
- 肝癌“湿热伏邪”——“癌毒”发病机制及疗法探讨被引量：22
- 2013年
- 分析慢性肝病(病毒性肝炎、肝硬化、肝癌)的致病因素——乙型肝炎病毒(HBV)的病邪属性及其致病特点,得出"湿热伏邪"这一概念,并以此为线索进行深入探讨。通过卫气营血辨证,分析湿热伏邪的传变过程中所导致不同的症候群以及新的病理产物如"痰"、"瘀"等,并阐释了痰、瘀作为枢纽因子,在肝络病变中起到的作用,最后形成湿热痰瘀互结壅盛之象,而形成"癌毒"。通过纵观慢性肝病发展,明确"湿热伏邪"作为疾病的始动因素,并贯穿全过程,总结出以清热化湿解毒为大法的治疗原则。
- 王书杰韦艾凌
- 关键词：癌毒肝癌发病机制
