国家教育部博士点基金(9924)
- 作品数：5 被引量：49H指数：3
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- 相关机构：北京大学第一医院解放军第302医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙型肝炎病毒囊膜中蛋白与白细胞介素18联合基因免疫的实验研究
- 2001年
- 董菁成军王勤环刘妍王刚施双双夏小兵李克邵得志斯崇文
- 关键词：基因免疫白细胞介素抗体滴度蛋白
- Sybr green1实时定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的探索被引量：27
- 2002年
- 目的 寻找一种能广泛用于临床快速、简便、灵敏度和特异性较好、价格低廉的乙型肝炎病毒 (HBV)DNA定量诊断方法。方法 以Sybrgreen 1作为荧光指示剂 ,做样品血清DNA的实时定量聚合酶链反应 (PCR) ,并结合溶解曲线结果 ,与Taqman荧光定量方法结果进行了对比。结果 Taqman法较好地检出体内HBVDNA载量。Sybr法测得样品的病毒拷贝数 5 3× 1 0 4copies ml与Taq man法所得数值 9 6× 1 0 4copieslml相近 ,但检出率偏低。结论 Sybrgreen 1荧光实时定量方法简便、便宜 。
- 王艳徐小元公维波王勤环何为刘志红
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA聚合酶链反应
- 乙型肝炎病毒囊膜中蛋白与白细胞介素18联合基因免疫被引量：20
- 2002年
- 目的 构建HBV囊膜中蛋白核酸疫苗表达载体并免疫小鼠 ,观察白细胞介素 18(IL 18)对基因免疫的辅助作用。方法 构建质粒 pVR10 12 M、pcDNA 3 .1- IL 18,肌内注射法免疫 2 5只Balb/c小鼠 ,3组小鼠分别注射 10 0 μgpVR10 12 ,pVR10 12 M ,pVR10 12 M和 pcDNA 3 .1- IL 18质粒 ,每 2周 1次 ,共 3次。每次免疫 2周后眼眶采血 ,检测血清抗 HBs,第 3次免疫后 2周应用乳酸脱氢酶检测法验证特异性细胞杀伤率。结果 经注射上述质粒后 ,可观察到注射 pVR10 12 M组的小鼠随免疫次数的增加 ,抗 HBs阳性率、抗体滴度均逐步增高 ;同时联用质粒 pcDNA 3 .1- IL 18的小鼠抗 HBs阳性率、抗体滴度均较单独应用 pVR10 12 M组为低 (第 3次免疫后抗 HBs阳性率、抗体滴度两组比较P <0 .0 5 )。细胞毒性实验证实联用组的细胞杀伤率为 (89.0 2± 15 .5 4) % ,较单独应用pVR10 12 M组 (83 .0 8± 14 .0 2 ) %为高 ,但两组之间差异无显著性。 结论 注射质粒 pVR10 12 M可诱导小鼠产生足量的抗 HBs ,并可检测出特异性细胞免疫反应 ;联合应用IL 18对特异性体液免疫有抑制作用 。
- 董菁成军王勤环刘妍王刚施双双李克邵得志斯崇文
- 关键词：乙型肝炎病毒囊膜白细胞介素18基因免疫动物实验
- 趋化因子受体CXCR4反义RNA重组表达载体的构建及其在真核细胞中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 :构建趋化因子受体CXCR4反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV 1研究。方法 :用RT PCR法从健康人外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBMCs)中获得目的基因 ,并以正、反两个方向定向插入到逆转录病毒载体 pLXSN。重组载体用脂质体转染剂 (lipofectAMINE)转染PA317包装细胞 ,抗G418克隆的细胞上清经逆转录后用荧光定量PCR(fluorogenic quantitativePCR ,FQ PCR)测定假病毒滴度 ,进一步感染NIH 3T3细胞。结果 :CXCR4正、反义RNA的真核表达载体 ,经PA317细胞包装形成的假病毒颗粒已成功地感染NIH 3T3细胞 ,目的基因在该细胞中得到整合与表达。结论 :从PBMCs中获得的目的基因通过逆转录病毒载体可转移至真核细胞中并得到表达 ,为进一步研究CXCR4反义RNA的抗HIV 1作用奠定了基础。
- 邢卉春徐小元王勤环于敏公伟波斯崇文邵一鸣
- 关键词：趋化因子受体真核细胞
- HBsAg中蛋白与IL-18联合核酸免疫HBsAg转基因小鼠的实验研究被引量：8
- 2002年
- 董菁成军王勤环施双双洪源郎振为皇甫竞坤李莉斯崇文
- 关键词：乙型肝炎病毒白细胞介素-18乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎转基因
