国家科技重大专项(2002AA223130)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：梅长林宋吉吴玉梅王文靖沈学飞更多>>
- 相关机构：第二军医大学中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 常染色体显性遗传性多囊肾病诊治进展
- 2003年
- 梅长林李林
- 关键词：常染色体显性遗传性多囊肾病致病基因基因连锁
- 多囊蛋白-1 LRR-WSC区单克隆抗体的制备及其在免疫组织化学诊断中的应用被引量：4
- 2004年
- 目的 用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区单克隆抗体,检测多囊蛋白-1在肾组织和肾细胞株中的分布和定位。方法 用多囊蛋白-1 LRR-WSC区融合蛋白PCI-e免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞株SP2/0进行细胞融合,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出阳性克隆,有限稀释法将杂交瘤细胞株单克隆化,间接ELISA法和免疫印迹法(WB)鉴定抗体的特异性。用制备的抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区单克隆抗体,免疫组织化学和免疫细胞化学法检测多囊蛋白-1在不同肾组织和肾细胞株中的分布。结果 细胞融合后经筛选和克隆得到的杂交瘤细胞株经WB分析表明,该细胞株分泌的单克隆抗体能特异地与多囊蛋白-1 LRR-WSC区结合。免疫组织化学显示,多囊蛋白-1主要分布于正常肾组织的远端肾小管和集合管,在胎肾囊肿组织中表达于近端肾小管,在人常染色体显性多囊肾病(ADPKD)肾囊肿组织中,表达于囊肿衬里上皮细胞,同时在ADPKD肾囊肿衬里上皮细胞系和猪近端肾小管细胞株(LLC-PK1)中也发现了多囊蛋白-1的表达。结论 本实验成功制备了抗多囊蛋白-1 LRR-WSC区的单克隆抗体,该抗体对深入研究ADPKD的发病机制具有重要意义。多囊蛋白-1在肾组织中的表达模式对肾小管的形态发生、维持肾小管结构的完整性非常重要。
- 赵海丹赵海丹梅长林沈学飞孙田美张树忠王文靖吴玉梅
- 关键词：单克隆抗体肾小管ADPKD阳性克隆
