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抗人骨唾液蛋白单克隆抗体的制备及鉴定: 2011年; 目的制备高亲和力、高特异性的抗人骨唾液蛋白（BSP）单克隆抗体（mAb），并对其生物学特性进行鉴定，为BSP作为乳腺癌骨转移临床诊断靶点的研究奠定基础。方法重组BSP蛋白免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与Sp2／0细胞融合，经筛选建立可稳定分泌抗BSPmAb细胞株，制备腹腔积液，ProteinG纯化。ELISA检测抗体的效价和亲和力，并用亚型鉴定试纸条鉴定mAb的亚型。应用Western blotting检测mAb的特异性，进一步利用纯化的mAb经免疫组织化学法检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中BSP的表达情况。结果获得9株抗BSPmAb细胞株，选择其中2株（D001和D002）进一步鉴定，其上清效价分别为1：5120和1：10240，腹腔积液效价分别为1：25600和1：51200。2株抗体亚型均为IgG1型，轻链均为K型。Western blotting结果均在预期位置出现阳性条带。利用此2株细胞株所得抗体均可在乳腺癌细胞MDA-MB-231中检测到BSP的表达。结论成功制备能特异性识别BSP的mAb，为进一步研究BSP的生物学功能以及对BSP作为乳腺癌骨转移的标志物进行临床评价奠定基础。; 杜红延接力刚姚小艳李明; 关键词：乳腺肿瘤

骨唾液酸蛋白双抗夹心酶联免疫吸附试验检测方法的初步建立被引量：2: 2009年; 目的建立快速检测骨唾液酸蛋白的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为试剂盒的研制奠定基础。方法用鼠抗人骨唾液酸蛋白(BSP)单克隆抗体包被酶标板,兔抗人BSP检测,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗与兔抗人BSP相结合,初步建立BSP的双抗夹心ELISA检测方法。结果自建双抗夹心ELISA法检测骨唾液酸蛋白的灵敏度为1.5ng/mL,标准曲线的线性范围为2～100ng/mL,回归方程y=0.2548x+0.0775(r=0.992);批内批间变异系数分别为4.6%～5.4%和5.2%～7.1%,对人血清做50、25和10ng/mL三个加标浓度的回收率实验,回收率47.2%～101%;4℃有效期至少360d。结论成功建立双抗夹心ELISA检测BSP的方法。; 严芳王捷王江涛; 关键词：骨唾液酸蛋白单克隆抗体

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广东省医学科学技术研究基金(B2007105)