您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30471636)

作品数：14 被引量：48H指数：5
相关作者：郭坤元周健梅家转胡亮杉吴远彬更多>>
相关机构：南方医科大学广东省人民医院广东省中医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 14篇细胞
  • 5篇杀伤
  • 5篇NK细胞
  • 4篇受体
  • 4篇免疫
  • 4篇克隆
  • 4篇互补决定区
  • 4篇互补决定区3
  • 3篇杀伤活性
  • 3篇杀伤细胞
  • 3篇细胞毒
  • 3篇细胞杀伤
  • 3篇细胞受体
  • 3篇免疫编辑
  • 3篇活性
  • 3篇基因
  • 3篇NKG2D
  • 3篇T细胞
  • 3篇T细胞受体
  • 3篇CD34^+

机构

  • 14篇南方医科大学
  • 2篇广东省人民医...
  • 1篇广东省中医院
  • 1篇吉林大学第一...
  • 1篇厦门大学
  • 1篇成都军区

作者

  • 14篇郭坤元
  • 7篇周健
  • 5篇胡亮杉
  • 5篇吴远彬
  • 5篇梅家转
  • 4篇牛新清
  • 4篇涂三芳
  • 3篇宋朝阳
  • 3篇姚开泰
  • 3篇王杨
  • 2篇周明乾
  • 2篇佘妙容
  • 2篇马骊
  • 2篇孙明
  • 2篇郭爱林
  • 2篇温茜
  • 2篇黄迎
  • 2篇吴秉毅
  • 2篇黄宇贤
  • 2篇常红

传媒

  • 3篇南方医科大学...
  • 2篇山东医药
  • 2篇广东医学
  • 2篇中国组织工程...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中华器官移植...
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇吉林大学学报...

年份

  • 1篇2011
  • 7篇2008
  • 6篇2007
共 14 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
人鼻咽癌细胞株CNE2对NK细胞KIR/NKG2D受体的免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤功能的影响被引量：10
2007年
目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪检测对照组(新鲜分离的NK细胞)KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况。IL2组(IL2培养的NK细胞)、CNE2组(CNE2、IL2、NK细胞混合培养)培养后4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况,LDH释放法测定IL2组及CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7。3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1。CNE2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3表达较对照组、IL2组明显升高(P<0.01),NKG2D表达较对照组、IL2组明显降低(P<0.01),KIR3DL1表达与对照组、IL2组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1及NKG2D表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组、CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.96±1.47)%和(2.74±1.64)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(4.57±2.41)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论NK细胞与NKG2D配体阳性的肿瘤细胞持续性接触,下调NK细胞表面NKG2D表达,上调NK细胞表面与HLAI类分子相结合的KIR表达,导致NK细胞对靶细胞杀伤活性减低。本研究阐明了编辑后的NK细胞杀伤活性减低的分子基础,同时提示阻断HLAI类分子与KIR的结合或者增强NK细胞表面NKG2D的表达将有利于提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性。
郭坤元梅家转姚开泰
关键词：NKG2D杀伤细胞免疫球蛋白样受体免疫编辑
同种异体NK细胞对CD_(34)^+早期急性髓系白血病细胞的杀伤活性被引量：1
2008年
目的探讨同种异体NK细胞对CD3+4早期急性髓系白血病(AML)细胞的体外杀伤活性。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,以NK杀伤敏感细胞株K562作为对照,乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定不同效靶比时NK细胞对CD3+4早期AML细胞KG1a的杀伤活性。结果AML细胞株KG1a中CD34抗原表达率为98.0%±1.1%,分选后的NK细胞纯度为93.2%±3.7%。不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均有杀伤活性,且随着效靶比的增高,其杀伤活性增高(P<0.05)。结论同种异体NK细胞对CD34+早期AML细胞具有一定的杀伤活性。
牛新清郭坤元周健胡海燕佘妙容
关键词：杀伤细胞白血病髓样杀伤活性
NK细胞与K562细胞之间相互免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤活性的影响被引量：5
2007年
目的:探讨NK细胞与K562细胞混合培养前、后其杀伤活性的变化及分子机制。方法:流式细胞仪检测NK细胞与K562细胞混合培养前、后细胞表面相应分子的变化,LDH释放法测定效靶比20∶1时NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果:相互编辑前,K562细胞表面MICA/MICB的表达率为(79.90±0.87)%,NK细胞表面NKG2D、KIR2DL1和KIR3DL1的表达率分别为(98.27±0.67)%、(45.70±1.22)%和(35.60±1.35)%。相互编辑后,K562细胞表面MICA/MICB和NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(35.56±1.01)和(34.67±3.88)%,均明显低于编辑前(P=0.000);NK细胞表面KIR2DL1和KIR3DL1的表达率分别为(47.20±1.08)%和(34.03±1.20)%,与编辑前比较差异均无显著性(P>0.05)。效靶比20∶1时,NK细胞对编辑后的K562细胞的杀伤活性为(24.07±0.58)%,编辑后的NK细胞对K562细胞的杀伤活性为(16.95±2.00)%,均明显低于编辑前NK细胞对K562细胞的杀伤活性[(54.03±3.46)%](P=0.000)。结论:NK细胞与K562细胞持续性接触后,双方发生了相互免疫编辑作用;NK细胞的杀伤活性下降,其分子机制是细胞表面相应的配受体发生了变化。
郭坤元梅家转姜振宇姚开泰
关键词：K562细胞NKG2D免疫编辑
IL-2体外诱导健康人外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移的研究被引量：3
2007年
目的研究IL-2对体外培养的T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移的影响。方法分离健康志愿者外周血T细胞,加入IL-2,常规体外培养,乳酸脱氢酶释放法检测其非特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术,分析其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果3例健康志愿者外周血T细胞对鼻咽癌细胞系CNE2没有杀伤作用;PBMC的TCRVβCDR3谱型均呈高斯分布,经IL-2体外培养后部分家族出现不同的优势表达。结论IL-2对体外培养的T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移有一定影响,对其非特异性杀伤无影响。
常红罗薇马骊周明乾温茜吴远彬黄宇贤郭坤元
关键词：IL-2T细胞受体互补决定区3
基因扫描分析人T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立被引量：1
2007年
目的建立人T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果T细胞株Jurkat细胞仅表达TCR Vα1.1和Vβ8基因,且为单克隆,而B细胞株Raji细胞则不表达所有的TCR Vα和Vβ基因。5例健康人表达所有的TCR Vα和Vβ基因,均为多克隆T细胞。结论基因扫描分析人TCR CDR3基因谱型是检测T细胞克隆性的精确敏感方法。
周健胡亮杉郭坤元黄迎郭爱林吴远彬王杨涂三芳
关键词：T细胞受体互补决定区3基因扫描T细胞克隆
同种异体NK细胞对CD34^+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应被引量：6
2008年
目的探讨同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞KG1a的杀伤活性,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞的克隆形成抑制率,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较。结果急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16+CD56+细胞)纯度为(93.2±3.7)%。不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均有杀伤活性,均能抑制其克隆形成。随着效靶比的增高,其杀伤活性和克隆抑制率随之增高(P<0.05)。同一效靶比时,NK细胞对KG1a的杀伤活性和克隆抑制率低于K562(P<0.05)。结论同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞具有细胞毒效应。
牛新清郭坤元周健胡亮杉涂三芳佘妙容
关键词：NK细胞CD34细胞毒
鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR Vβ CDR3谱型和细胞毒性分析被引量：1
2007年
目的用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖。方法用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征。在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL。乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性。结果健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCRVβCDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达。结论负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCRVβCDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值。
常红罗薇马骊周明乾温茜魏红梅梅家转郭坤元
关键词：CNE2细胞毒性T淋巴细胞互补决定区3克隆性增殖
单倍体相合造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病小鼠模型的建立及其评价被引量：8
2008年
目的：因供受者主要或次要组织相容性抗原存在差异而引起的移植物抗宿主病是影响异基因造血干细胞移植效果的关键因素,目前国内尚缺乏研究此领域的实验动物模型及其评价体系。本实验拟建立半相合异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病小鼠模型,并制定半定量评价体系。方法：实验于2007-03/08在南方医科大学实验动物中心完成。①动物：供鼠为近交系Balb/CH-2d小鼠40只,雄性,8～10周龄,体质量18～22g;受鼠为CB6F1小鼠（Balb/c×C57BL/6F1H-2d/b）48只,雌性,10～12周龄,体质量18～24g,随机数字表法分为3×10^7,6×10^7,9×10^7个脾细胞移植组及空白对照组,12只/组。小鼠均由南方医科大学实验动物中心提供,SPF级,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：Balb/CH-2d小鼠颈椎脱臼处死,取脾脏研磨后制成脾单细胞悬液,离心弃上清,加入Tris-NH4Cl裂解红细胞,用RPMI1640调整细胞浓度为1.2×10^8L^-1,锥虫蓝染色计数脾细胞拒染率为95.6%。3×10^7,6×10^7,9×10^7个脾细胞移植组分别经尾静脉输入对应数量的MHC半相合脾细胞悬液0.5mL,空白对照组输入等体积RPMI1640培养液。③实验评估：脾细胞移植后2,5,8,12周,光镜下计数20个分裂相,检查骨髓细胞中的Y染色体数量,进行嵌合体分析。脾细胞移植18d后,每3d观察受体小鼠的临床表现,包括体质量、体形、体位、毛发变化及生存情况,并予以评分。输注脾细胞后100d观察皮肤、肝脏、回盲端小肠靶器官的病理变化,并进行评分。结果：48只受体小鼠均进入结果分析。①嵌合体检测：6×10^7个脾细胞移植组可形成较为稳定的低水平供受者混合嵌合体;9×10^7个脾细胞移植组起初可形成较高水平的供受者混合嵌合体,随时间的推移水平降低;3×10^7个脾细胞移植组未能形成稳定的供受者混合嵌合体。②慢性移植物抗宿主病的临床及病�
吴远彬郭坤元陆志刚周健宋朝阳吴秉毅吴顺杰
关键词：造血干细胞移植异基因慢性移植物抗宿主病
基因扫描分析小鼠T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立
2008年
目的建立小鼠T细胞受体(TCR)互补决定区3(CDR3)谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法应用RT-PCR方法分别扩增近交系小鼠C57BL/6H-2b,Balb/CH-2d和F1代小鼠(Balb/c×C57BL/6F1H-2d/b,CB6F1)脾脏T细胞的21个TCRVα家族和18个TCRVβ家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果3种小鼠脾脏T细胞均表达所有的TCRVα和VβCDR3基因,基因扫描显示全部TCRCDR3谱型呈高斯(钟型)分布,提示均为多克隆T细胞。各家族CDR3基因表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布。结论基因扫描分析TCRαβCDR3基因谱型是检测小鼠T细胞克隆性的精确敏感方法。
周健黄迎吴远彬胡亮杉涂三芳王杨孙明郭爱林郭坤元
关键词：小鼠T细胞受体互补决定区3基因扫描T细胞克隆
不同遗传背景NK细胞对转化细胞的杀伤效应被引量：1
2008年
目的:细胞免疫治疗的着眼点不仅是杀伤局部异常生长的肿瘤细胞,还要应对潜在转化细胞的影响,为此观察3种不同遗传背景NK细胞对转化细胞杀伤效应的差异。方法:实验于2007-03/09在南方医科大学珠江医院血液科完成。①材料:SPF级8～10周龄的C57BL/6(H-2b)小鼠10只、Balb/C(H-2d)小鼠10只、Balb/C(H-2d)×C57BL/6(H-2b)杂交F1代(H-2d/b)小鼠10只,均购于南方医科大学实验动物中心,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。YAC-1细胞株由本室冻存;C57BL/6鼠源性红白血病细胞株FBL-3由周健博士惠赠。②实验方法:脱臼处死3种不同遗传背景小鼠,无菌取脾,密度梯度离心法常规分离脾单个核细胞,免疫磁珠细胞阳性分选得到3种不同遗传背景小鼠的NK细胞,即全相合C57BL/6组、不相合Balb/C组、半相合F1代组,以其作为效应细胞。将培养至对数生长期的YAC-1、FBL-3细胞株以及ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞作为靶细胞。相对于靶细胞,不相合Balb/C组与半相合F1代组为同种异体反应性NK细胞,全相合C57BL/6组为自体NK细胞。③实验评估:通过流式细胞术检测CD49b+的表达鉴定NK细胞纯度。调整靶细胞YAC-1密度为2×108L-1,按效靶比5:1,10:1,20:1,40:1以乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞的杀伤活性。调整靶细胞FBL-3和ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞密度均为2×108L-1,按效靶比20:1,40:1同法测定NK细胞的杀伤活性。结果:①NK细胞的纯度鉴定:CD49b+细胞率全相合C57BL/6组为(90.93±2.46)%,不相合Balb/C组为(89.50±1.04)%,半相合F1代组为(91.93±2.01)%,分选所得NK细胞的纯度满足实验要求。②NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性:3组NK细胞的杀伤活性均随效靶比5:1,10:1,20:1,40:1的升高而增强;同一效靶比时3组NK细胞对YAC-1的杀伤活性差异无显著性意义(F=0.557,P=0.600;F=0.550,P=0.604;F=0.503,P=0.628;F=0.946,P=0.439)。③NK细胞对FBL-3和ConA刺激的C57BL/6小鼠脾细胞的杀伤�
王杨郭坤元黄宇贤周健
关键词：自然杀伤细胞细胞免疫治疗
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0