国家自然科学基金(30471698)
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
- 相关作者：杜建军卢晓昭祁胜宾双剑博杨国栋更多>>
- 相关机构：第四军医大学解放军第323医院第四军医大学西京医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人GDDR基因启动子的克隆和报告基因载体构建被引量：8
- 2011年
- 目的:克隆人GDDR基因的启动子;构建GDDR启动子的报告基因载体并进行活性分析。方法:设计合成GD-DR启动子引物,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增GD-DR启动子;将扩增片段插入T载体并利用酶切与测序进行鉴定;亚克隆该基因至pGL3-Basic荧光报告基因载体;瞬时转染细胞,用双荧光素酶报告基因系统检测报告基因载体的活性。结果:PCR扩增得到人GDDR基因启动子;成功构建pGL3-GDDR-promoter报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;双荧光素酶报告基因检测系统证实构建的报告基因载体具有启动子活性。结论:成功地构建人GDDR基因启动子的克隆及其报告基因载体的构建,为深入研究GDDR转录表达的调控机制提供基础。
- 祁胜宾双剑博卢晓昭杜建军
- 关键词：基因启动子荧光素酶报告基因
- 胃癌下调新基因GDDR表达特性及功能研究被引量：5
- 2009年
- 明确胃癌下调新基因GDDR的亚细胞定位、分泌特性及生物学功能研究。与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达明确GD-DR表达产物亚细胞定位;GES细胞系转染上清检测分泌蛋白表达;胃癌7901细胞系稳定转染GDDR,观察其生物学作用。发现GDDR表达产物定位于胞浆,是一分泌蛋白。四甲基偶氮唑盐比色法(MTTassay)检测描绘生长曲线及流式细胞计数仪(FACS)细胞周期检测表明,GDDR对胃癌7901细胞增值显著抑制(96h(1.233±0.017)vs(0.618±0.015),t=2.447,P=2.63×10-9),并且可以引起细胞的周期阻滞。说明胃癌下调新基因GDDR产物为胞浆分布,具有分泌特性,能通过阻滞细胞周期显著抑制胃癌细胞生长,可能为新的候选抑癌基因。
- 褚光辉杜建军杨国栋窦科峰卢兹凡
- 关键词：胃肿瘤分泌蛋白细胞周期
