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低温诱导淡水白鲳细胞凋亡的研究被引量：2: 2006年; 为探讨10℃低温导致淡水白鲳尾鳍细胞系CBT死亡的原因及其可能机制.采用CCK-8试剂盒法检测细胞存活率,荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧(ROS)含量,亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段分析,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率.结果表明随CBT细胞受10℃低温作用时间的延长,细胞存活率显著下降,细胞内ROS含量和LDH释放率显著增加(P<0.01).低温处理3 d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,凋亡率为13%.再经32℃复温12 h后,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带;Tunel检测,低温处理3、4和5 d的CBT细胞分别有23.49%,27.72%和35.10%发生凋亡.低温处理5 d的CBT细胞核分裂成多个小核,呈现出典型的凋亡小体.因此10℃低温能诱导CBT细胞凋亡.ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程.; 俞宏朱敏杰严文静张铭; 关键词：淡水白鲳细胞凋亡活性氧

低温诱导淡水白鲳尾鳍细胞系早期凋亡被引量：5: 2005年; 淡水白鲳属喜温性鱼类,本文以其尾鳍细胞系CBT为研究材料,探讨低温胁迫(10℃)对细胞的影响。实验采用MTT法测定细胞活力,透射电子显微镜观察超微结构,激光扫描共聚焦显微镜检测磷脂酰丝氨酸(PS)对翻和线粒体膜电位的变化。结果显示:低温处理导致细胞活力和线粒体膜电位显著下降(P<0.01);电镜下可见核质过聚等现象;10℃处理3d,Annexin-V-FITC/PI双染表明87.7%的细胞进入早期凋亡。由此认为,冷胁迫淡水白鲳CBT细胞致死的途径是细胞凋亡。; 严文静陈汉民赵小立俞宏张铭; 关键词：淡水白鲳显微镜检测 FITC 喜温性冷胁迫

鱼类细胞低温伤害的红外光谱研究: 2006年; 分别对喜温性鱼类白鲳尾鳍细胞系CBT和广温性鱼类草鱼胚胎细胞系CP进行低温胁迫处理0～8d．采用傅立叶变换红外光谱技术检测细胞内DNA、RNA、蛋白质、磷脂、葡萄糖等相对含量的变化，得到低温对不同鱼类细胞伤害作用的动态资料．研究发现，在CBT细胞处理中，1～3d的DNA／酰胺Ⅱ、RNA／酰胺Ⅱ、葡萄糖／磷酸键、葡萄糖／磷脂的比值升高，第4日下降，5～7d值再度上升，第8日再次下降；RNA／DNA的比值1～3d降低，第4日升高，5～7d逐渐减少，第8日又上升．CP细胞DNA／酰胺Ⅱ、RNA／酰胺Ⅱ的值在处理1～3d无明显变化，第4日下降，5～8d又上升；葡萄糖／磷酸键、葡萄糖／磷脂值在0～2d平稳上升，3～7d下降，第8日突然上升；RNA／DNA有1、4、6d的高点和2、8d的低点．两种细胞的RNA／DNA比率与葡萄糖／磷酸键比率都有线性关系．生化物质变化与低温诱发细胞凋亡的过程有相关性．; 朱敏杰俞宏严文静张铭; 关键词：生化组分

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国家自然科学基金(30070583)