国家自然科学基金(81201636)
- 作品数：14 被引量：22H指数：3
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- BRG1对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制探讨
- 2014年
- 目的探讨沉默BRG1基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法体外化学合成BRG1小干扰RNA（siRNA）和Control siRNA（si—Ctr1），脂质体介导转染乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，Transwell迁移实验和侵袭实验观察沉默BRG1基因对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响，明胶酶谱实验检测基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）变化，Westernblot检测基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）及MMP-2蛋白表达。结果转染BRG1 siRNA可以有效减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞BRG1的表达，细胞迁移和侵袭能力下降。BRG1沉默后TIMP-2表达升高，MMP-2表达下降且酶活性降低。结论BRG1沉默后通过上调TIMP-2抑制MMP-2的表达，破坏TIMP-2／MMP-2平衡，最终抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭能力。
- 时梅林白津梅鹏金郑骏年
- 关键词：乳腺癌迁移基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶组织抑制因子-2
- 下调Cullin1基因表达抑制乳腺癌细胞增殖研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨下调Cullin1（Cull）基因对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法利用脂质体将靶向Cull基因小干扰RNA（siRNA）、对照siRNA分别转染人乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，Westernblot技术检测Cull基因表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）比色法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期变化，Westernblot检测细胞周期蛋白（Cyclin）A、CyclinD1、CyclinE以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21和p27表达。结果与对照组比较，转染CullsiRNA48h后MDA—MB-231和BT-549细胞Cull蛋白表达明显降低；细胞增殖明显减慢，72h和96h更加明显（P〈0．01）；Cull基因干涉6h后2种细胞G，期细胞比例[（29．49±0．75）％、（24．86％±0．52）％]增加，与对照组[（17．39±0．56）％、（t2．73％±0．41）％]比较差异有统计学意义（P〈0．01）。Cull基因干涉后2种细胞CyclinA、CyclinD1及CyclinE表达明显减少，而p21和p27表达明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Cull基因干涉后能通过影响细胞周期蛋白及其依赖性激酶抑制因子的表达，使乳腺癌细胞停滞在G1期，最终抑制其增殖。
- 任泽强雍红梅张秀忠张蓬波白津时梅林郑骏年
- 关键词：乳腺癌增殖细胞周期
- Cullin1基因在乳腺癌细胞侵袭中的作用及机制被引量：2
- 2013年
- 目的探讨Cullin1（Cul1）基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响及机制。方法Cul1小干扰RNA（siRNA）、对照siRNA分别转染人乳腺癌MDA-MB-231和BT-549细胞，细胞迁移试验观察迁移能力：细胞侵袭试验观察侵袭能力；明胶酶谱实验检测细胞分泌基质金属蛋白酶（MMPs）的能力；Western blot法检测MMPs及组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）蛋白的表达。结果与对照组比较，Cul1 siRNA处理组MDA-MB-231和BT-549两种细胞的迁移能力分别减少了83％和77％；侵袭能力分别减少了84％和79％；MMP．2活力分别减少了88％和76％；MMP-2蛋白表达分别减少了47．87％和15．35％，TIMP-2蛋白表达量分别增加了49．03％和68．84％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Cul1基因干涉后通过上调TIMP-2表达进而抑制MMP-2表达及分泌，最终抑制乳腺癌细胞的侵袭能力。
- 任泽强雍红梅张秀忠张蓬波白津时梅林郑骏年
- 关键词：乳腺癌基质金属蛋白酶-2
- Cullin1基因表达抑制对乳腺癌细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的应用小于扰RNA（siRNA）干涉乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞Cullin1（Cul1）基因的表达，探讨CullsiRNA（si—Cull）对人乳腺癌细胞株增殖的影响及其分子作用机制。方法体外化学合成CullsiRNA和ControlsiRNA（si—Ctd）序列，转染乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，CCK8细胞增殖实验分析Cull干涉后对2种乳腺癌细胞增殖的影响，流式细胞仪分析2种乳腺癌细胞周期的变化，Westernblot检测Cull蛋白、cyclin家族蛋白、CDK抑制剂蛋白表达水平。结果转染Cull的siRNA可以有效减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞株Cull的表达，Cull干涉后通过增强p21、p27的表达，降低cyclinA、cyclinD1和cyclinE的表达，使细胞周期停滞在G，期，从而抑制细胞的增殖。结论CullsiRNA可以有效地减少乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞Cull的表达，Cull干涉后可能通过影响cyclins、CDK抑制剂蛋白表达从而使细胞周期停滞在G1期，最终能明显抑制乳腺癌细胞的增殖。
- 白津李望雍红梅郑骏年
- 关键词：小干扰RNA乳腺癌增殖细胞周期
- RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响
- 2014年
- 目的 研究RUNX3基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响,并探讨其分子作用机制.方法 分别用RUNX3的真核表达载体pFlag-RUNX3和对照载体pFlag-control转染乳腺癌MDA-MB-231、BT-549细胞,CCK-8细胞增殖实验检测RUNX3基因高表达后对2种乳腺癌细胞增殖的影响;细胞迁移和侵袭实验检测RUNX3基因高表达对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响;人类肿瘤转移PCR芯片研究RUNX3基因高表达后乳腺癌细胞中转移相关基因的表达水平; RT-PCR和Western blot方法检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响;明胶酶谱实验检测RUNX3基因表达后对2种乳腺癌细胞分泌活性MMP-2的影响.结果 在2种乳腺癌细胞中过表达RUNX3能够抑制细胞的迁移和侵袭能力.在84个肿瘤转移相关基因中MMP-2受RUNX3的影响最显著.结论 RUNX3通过MMP-2通路调节乳腺癌细胞的迁移与侵袭.
- 白津曹梦函郑骏年
- 关键词：RUNX3乳腺癌迁移基质金属蛋白酶-2
- Cullinl基因对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响
- 2012年
- 目的研究Cullinl（Cull）基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭的影响，并探讨其具体分子作用机制。方法体外化学合成CullsiRNA和ControlsiRNA（si-Ctrl）序列，转染乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，细胞迁移和侵袭实验观察抑制Cull的表达对2种乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响；明胶酶谱实验检测Cull对2种乳腺癌细胞分泌基质金属蛋白酶（MMPs）的影响；Westernblot实验观察Cull对2种乳腺癌细胞中金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）及MMPs蛋白表达的影响。结果抑制Cull的表达可以明显降低2种乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力；Cull的表达降低可以抑制2种乳腺癌细胞分泌MMP-2；抑制Cull的表达可以通过上调TIMP-2的蛋白表达而抑制MMP-2的蛋白表达。结论抑制Cull的表达可以通过上调TIMP-2的表达从而抑制MMP-2的表达，打破了TIMP-2／MMP-2的平衡，最终抑制了乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 白津雍红梅郑骏年
- 关键词：小干扰RNA乳腺癌迁移
- BRG1在人类乳腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的研究BRG1在乳腺癌组织中的表达，探讨其临床意义及判断预后的价值。方法应用组织芯片和免疫组化方法评估BRG1在437例乳腺癌组织中的表达水平，并分析其与临床病理特征及患者预后的关系。结果在437例乳腺癌组织中，BRG1阴性表达率和阳性表达率分别为47．6％和52．4％；BRG1与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、病理学分级、病理类型、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及人类表皮生长因子受体2（HER2）均无明显相关性，差异无统计学意义（P〉0．05）；BRG1高表达提示患者5年总生存率及无瘤生存率低（P=0．000，P=0．000）。结论BRG1高表达与乳腺癌的不良预后密切相关，BRG1可能成为判断乳腺癌预后的一个重要标记物。
- 时梅林白津梅鹏金郑骏年
- 关键词：乳腺癌组织芯片免疫组织化学预后
- 乳腺癌转移抑制基因1通过金属蛋白酶组织抑制因子-2/基质金属蛋白酶-2途径抑制胶质瘤细胞侵袭被引量：7
- 2013年
- 目的 探讨抑癌基因乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）影响胶质瘤细胞侵袭的机制.方法 将真核表达质粒pEGFP-BRMS1和对照质粒pEGFP-N2分别转入人胶质瘤U251和U87细胞中,Western blot技术检测BRMS1蛋白表达,人工基底膜侵袭实验检测细胞侵袭能力,明胶酶谱实验检测胶质瘤细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的活性,Western blot检测金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）及MMP-2蛋白表达.结果 与对照组比较,转染pEGFP-BRMS1质粒24 h后U251和U87细胞侵袭力分别下降了43％和52％,差异均有统计学意义（P＜0.01）；转染BRMS1可以明显抑制2种胶质瘤细胞分泌MMP-2活性；pEGFP-BRMS1可以通过上调TIMP-2的表达从而抑制MMP-2蛋白表达.结论 BRMS1可以通过增加TIMP-2表达进而抑制MMP-2的表达,打破TIMP-2/MMP-2平衡,最终抑制胶质瘤细胞侵袭能力.
- 李中林梅鹏金白津时梅林李连涛范月超郑骏年
- 关键词：胶质瘤金属蛋白酶组织抑制因子-2基质金属蛋白酶-2
- RUNX3在人类乳腺癌组织中的表达及其临床意义
- 2014年
- 目的 研究人类相关转录因子3（human runt-related transcription factor 3,RUNX3）在乳腺癌组织中的表达水平及其临床病理意义.方法 应用组织芯片和免疫组化的方法评估RUNX3在256例乳腺癌组织中的表达水平,并通过统计学分析其与临床病理特征及患者预后的关系.结果 在256例乳腺癌组织中RUNX3阳性表达率和阴性率分别为32％ （83/256）和68％ （173/256）,RUNX3的表达水平与乳腺癌的病理分级呈高度相关（P=0.000）,RUNX3低表达提示5年总生存率低以及无瘤生存率低（P=0.000;P =0.001）.结论 RUNX3低表达与乳腺癌的进展以及预后差呈高度相关.
- 白津曹梦函郑骏年
- 关键词：RUNX3乳腺癌组织芯片免疫组化预后
- BRG1在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义
- 2014年
- 目的:研究BRG1在人脑胶质瘤中的表达情况,并探讨其表达水平与胶质瘤的恶性程度及发生、发展的关系。方法:采用组织芯片及免疫组化技术,评估BRG1在120例良性胶质瘤组织(I^II级)、70例恶性胶质瘤组织(III–IV级)、8例正常脑组织和8例癌旁组织中的染色情况。结果:免疫组化结果显示:BRG1在正常脑组织中阳性表达率为25%(2/8),在癌旁组织中阳性表达率为25%(2/8),在良性胶质瘤组织中阳性表达率为80.8%(97/120),在恶性胶质瘤组织中为82.9%(58/70)。在癌旁组织与良性胶质瘤之间、癌旁组织与恶性胶质瘤之间差异均有统计学意义(P=0.000),但是在良性和恶性之间差异无统计学意义(P=0.847)。BRG1的表达与临床病理参数之间也没有相关性。结论:BRG1在人脑胶质瘤中的表达明显高于正常脑组织和癌旁组织,并与胶质瘤的发生具有一定的相关性。BRG1在胶质瘤的发生过程中可能有重要作用。
- 时梅林白津梅鹏金郑骏年
- 关键词：脑胶质瘤组织芯片免疫组化
