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酶的体外定向进化策略研究进展被引量：5: 2005年; 酶的体外定向进化是目前酶学工程发展的一个新技术,本文综述了易错PCR、DNA重组等策略的进展,该项技术为医学、工业、农业等方面提供了广阔的前景。; 崔玉杨军孙萍王全立; 关键词：体外定向进化易错PCR DNA改组

咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性检测被引量：2: 2007年; 目的:初步证实咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性。方法:通过PCR扩增得到咖啡豆α-半乳糖苷酶基因克隆到载体pGEM-T easy,目的片段与预期的大小一致。咖啡豆α-半乳糖苷酶基因与分泌性原核表达载体pAS18连接,转化到宿主菌E.coli JM83。经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳分析,Western-blot印迹证实蛋白表达的特异性。结果:PCR扩增得到目的片段测序结果正确。SDS-PAGE电泳分析得到目的蛋白41kD,经过Western blot鉴定正确。ELISA检测证实咖啡豆α-半乳糖苷酶具有生物活性。结论:优化诱导条件,初步证实重组咖啡豆α-半乳糖苷酶基因具有生物活性。; 崔玉杨军詹林盛; 关键词：Α-半乳糖苷酶活性

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国家自然科学基金(30371330)