黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10551208)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
- 相关作者：苏颖王峰山艳春陈剑王继群更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学暨南大学附属第一医院暨南大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Nogo-A基因敲除鼠视神经损伤后修复的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的评价Nogo-A基因在视神经损伤后修复机制中的作用。方法Nogo-A基因敲除联合视神经损伤鼠为实验组(20只),C57BL/6小鼠联合视神经损伤作为对照组(20只)。制备视网膜、视神经冰冻切片,采用免疫荧光技术检测视网膜神经节细胞和视神经中生长相关蛋白(GAP)-43的表达。进行视网膜神经节细胞体外培养,进行GAP-43染色,采用图像分析系统计算细胞轴突长度。结果视神经中GAP-43表达:夹伤后1、3、7d对照组中表达少量GAP-43,实验组中GAP-43表达明显高于对照组(t=2·12,3·56、2·63,均P<0·01)。GAP-43抗体染色可见着色在体外培养RGC轴突,实验组3d有较长轴突生长,对照组3d有较短轴突生长。RGC于培养1、3及7d,经自动图像分析系统处理,得出细胞突起长度,实验组突起长度明显高于对照组(F=41·36、31·23,均P<0·01)。结论Nogo-A基因在抑制视神经损伤后轴突再生机制中起重要作用。
- 苏颖王峰赵世光刘平崔浩滕岩
- 关键词：视神经GAP-43蛋白勿动蛋白
- 定量大鼠视神经损伤模型的建立被引量：20
- 2005年
- 目的:建立大鼠定量视神经损伤模型,介绍其制作方法。方法:健康Wistar大鼠90只,15只为正常组,只进行3%荧光金逆行标记视网膜神经节细胞,以对比正常大鼠左、右眼视网膜神经节细胞数量;另75只大鼠,其中左眼为损伤眼,右眼为未损伤眼,作为对照组,按损伤后存活时间不同分为1d组、3d组、7d组、15d组、30d组,每组15只。应用40g力的视神经夹在大鼠眼球后2mm处夹视神经9s,于处死前7d采用双上丘注射3%荧光金标记双眼视网膜神经节细胞。取眼球标本并分离视神经至视交叉。视网膜铺片做荧光照相,并输入计算机图像分析仪计数视网膜神经节细胞。将视神经沿其长轴做切片在光镜下观察。结果:手术获取完整的大鼠眼球,并分离视神经至视交叉。视网膜神经节细胞计数,损伤组与对照组进行比较。正常组中,左眼195.76±36.12,右眼197.52±39.25,两者差异无显著(P>0.05);伤后1d左眼165.12±26.36,右眼191.21±35.26,两者差异显著(P<0.01);伤后3d左眼152.26±25.12,右眼192.16±32.12,两者差异显著(P<0.01);伤后7d左眼135.19±21.32,右眼189.26±26.16,两者差异显著(P<0.01);伤后15d左眼123.96±27.19,右眼191.76±25.29,两者差异显著(P<0.01);伤后30d左眼105.75±22.26,右眼186.56±23.76,两者差异显著(P<0.01)。损伤眼视神经损伤后不同时间RGCs计数逐渐下降(P<0.01);损伤处视神经肿胀、出血,胶质细胞排列紊乱,空泡样变性,随损伤后时间延长而加重。结论:应用40g力视神经夹建立的定量视神经损伤动物模型是可行的,并可应用于视神经损伤修复的研究中,完整标本的获取需要较为熟练的手术技巧。
- 苏颖王继群王峰山艳春陈剑崔浩徐锦堂
- 关键词：视网膜神经节细胞上丘视神经损伤
- 原发性开角型青光眼患者TIGR基因突变筛选、序列分析
- 2006年
- 目的:观察原发性开角型青光眼(primaryopenangleglaucoma,POAG)患者小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(trabecularmeshworkinducedglucocorticoidresponseprotein,TIGR)基因的突变情况。方法:实验于2001-01/2005-12在哈尔滨医科大学和暨南大学完成。应用聚合酶链式反应方法扩增90例原发性开角型青光眼患者和30例正常对照组的小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白基因3个外显子的片段,应用单链构像多态筛选可能突变的聚合酶链反应产物。将聚合酶链反应产物,以EcorⅠ酶切鉴定重组质粒,然后测序。结果:①用单链构像多态方法筛选的5例原发性开角型青光眼患者在小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白基因第3外显子中部(第6对引物)片段出现单链带型异常,余均未见异常;正常对照组未见异常。基因的3个外显子片段,包含各外显子的7对引物。②克隆测序的3例样品,在388密码子位置出现由GAT突变为AAT,氨基酸由天冬氨酸替换为天冬酰胺,即Asp388Asn。结论:原发性开角型青光眼患者的发病可能与小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白基因突变有关。
- 苏颖王峰王继群山艳春刘平陈剑
- 关键词：糖皮质激素类基因
- 活化的巨噬细胞促进视神经损伤后视网膜中生长相关蛋白-43的表达被引量：2
- 2005年
- 目的评估活化巨噬细胞对于视神经损伤后视网膜神经节细胞中生长相关蛋白43(GAP43)表达的影响。方法成年Wistar大鼠按夹伤后存活时间不同(1、3、7d)分为3组,每只大鼠右眼接受玻璃体内注射酵母多糖(实验组),左眼接受玻璃体内注射PBS(对照组)。采用免疫荧光技术检测视网膜神经节细胞中GAP43和ED1的表达。结果对照组中未见ED1阳性巨噬细胞,实验组中视网膜内表面见ED1阳性巨噬细胞,C组GAP43较多(189.26±26.16),与B组(65.29±21.32)相比有显著差异,而对照组中无GAP43的表达。结论玻璃体内注射酵母多糖可激活巨噬细胞,从而促进视神经损伤后视网膜神经节细胞中GAP43的表达。
- 王峰王继群苏颖山艳春徐锦堂陈剑
- 关键词：视网膜节细胞生长相关蛋白营养因子
