国家自然科学基金(30371312)
- 作品数：3 被引量：37H指数：2
- 相关作者：李勤朱自严郭忠慧叶璐夷钱旻更多>>
- 相关机构：华东师范大学上海市血液中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 中国人群中Del表型分子背景研究被引量：34
- 2006年
- 目的研究Del表型的分子基础,并探寻新的Del等位基因。方法 515名经血清学方法确定的RhD阴性血样用吸收放散试验筛选并确认Del表型。Del的基因组DNA通过多重PCR(multiplex poly-merase chain reaction,MPX PCR)检测RHD基因;用序列特异性引物PCR(sequence-specific primer-polymerase chainreaction,PCR-SSP)检测Del等位基因:RHD(K409K)和RHD(M295I)。经PCR-SSP筛选,结果为阴性的样品通过基因组DNA测序及cDNA测序分析其分子背景。结果吸收放散试验共检出Del 79名。经多重PCR检测,79份样品均带有RHD第3、4、5、6、7、9特异性外显子。PCR-SSP结果显示,75名Del具有RHD(K409K)等位基因,无Del样品带有RHD(M295I)等位基因。经测序发现4名新RHD等位基因:RHD3G→A(GenBank DQ310735) ,RHD28C→T,RHD53T→C(GenBank DQ451877、DQ451878) ,RHD251T→C(GenBank DQ310734)。结论 Rh血型系统非常复杂,新的D变异表型和新的RHD等位基因可能被不断发现。
- 李勤叶璐夷郭忠慧钱旻朱自严
- 关键词：RHD基因DEL表型遗传多态性等位基因测序
- RHD基因转录子的选择性剪切被引量：2
- 2007年
- 通过RT-PCR技术分析红系细胞和非红系细胞RHD的转录情况,同时进一步比较不同D表达个体的RHD的转录关系.采用逆转录PCR（RT-PCR）技术检测HL-60,K562,Jurkat,THP-1,胚肺成纤维细胞系（HECF）,10名不同Rh表型个体的网织红细胞（CcDEe3名,CCDEe2名,CCDee2名,CcDee2名和CCDuee1名）以及10名不同Rh表型（2CCDEe,2CCDee,2ccDee,2CcDee,ccDEe和CcDEe）个体的白细胞的RhD mRNA,然后进行cDNA测序分析.结果表明,HL-60,Jurkat,THP-1,胚肺成纤维细胞系（HECF）以及不同Rh表型个体的外周血有核细胞中除网状红细胞外皆不存在RhD mRNA,K562具有一个正常的RHD基因转录本,而不同表型个体的网织红细胞具有复杂的RhD cDNA形式,有的缺少RHD基因的外显子7,有的缺少外显子7~9或外显子4~9,但这些个体都有一个正常形式的RhD mRNA.由此得出结论,选择性剪切使RHD基因的产生多种形式的转录子,但这些不同形式的转录子仅来自红系的血细胞如网织红细胞和K562细胞系,白细胞、单核细胞、T淋巴细胞以及胚肺成纤维细胞都不具有RHD的mRNA.
- 张玉娴李勤朱自严
- 关键词：RHD基因MRNACDNA
- 中国人RHD基因合子型检测分析被引量：1
- 2009年
- 目的判定中国人群中RHD基因是否是纯合子。方法从上海地区正常献血者中选取RhD阳性、RhD阴性、Del和其它D变异型样本共50份,采用PCR-RFLP方法扩增Rhesus盒子判断RHD合子型,同时相对实时定量real-time quantitative(RQ)PCR扩增检测RHD基因第5、7外显子的特征区域。结果9份样本在2种方法的检测结果中出现矛盾。进一步对RHD基因的特异性序列进行PCR-SSP及克隆测序分析,证实这9份样本中,4份是DⅥⅢ变异型,2份是Del与RHD711del C等位基因杂合子,另外3份是携带有中国RhD阴性人群中较常见的RHD-CE(2—9)-D RH阴性等位基因。结论中国人Rh血型系统遗传背景较白种人复杂,RHD基因存在较多的变异情况。仅使用单一方法判断RHD合子型及RhD血清学表型容易产生误判,而从Rhesus盒子和RHD基因不同外显子2个角度进行综合判断,可以减少误判。
- 侯磊郭忠慧李勤叶璐夷朱自严
- 关键词：实时定量PCR
