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黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10551216)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
吴德全
张新晨
徐华锋
王书
杨维良
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相关机构:
哈尔滨医科大学附属第二医院
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发文基金:
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相关领域:
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2013
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抑制葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达对胃癌细胞株生长的影响
被引量:1
2013年
目的观察利用psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和pSiSTRIKETM/GRP94抑制人类胃癌细胞株SGC-7901 GRP78和GRP94基因表达对胃癌细胞活性及凋亡的影响。方法构建受控于人RNA聚合酶HI启动子U6的真核表达载体,采用Lipofectamine? 2000转染试剂进行共转染,将psiSTRIKETM/GRP78和PsiSTRIKETM/GRP94同时导人胃癌细胞内,在转染前及转染后72 h通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、间接法免疫荧光技术检测GRP78和GRP94 mRNA及蛋白水平的表达,并设立阴性对照组(只加人转染试剂)比较。设立3组:实验组(共转染组)、阴性对照组(只加人转染试剂)及空白对照组(未加任何处理),在转染72 h后用噻唑蓝(MTT)法检测胃癌细胞活性,流式细胞仪检测胃癌细胞早期凋亡。结果成功将psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94转染至SGC-7901 72 h后,与2个对照组比较,GRP78相对表达量为0.49,GRP94为0.40,与对照组比较的表达明显下降,差异有统计学意义(P 〈0.05)。MTT结果显示:在转染后48 h及72 h,与2个对照组比较,实验组胃癌细胞生长受到抑制;转染后72 h,实验组具有21. 98%的凋亡率,与空白对照组和阴性对照组比较细胞凋亡显著增多,而阴性对照组(6. 04%)与空白对照组(1.05%)比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论在体外同时转染psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94 72 h后,胃癌细胞株SGC-7901 GRP78及GRP94表达明显降低。转染72 h后胃癌细胞活性明显受到抑制,细胞早期凋亡增多。
张新晨
杨维良
王书
吴德全
徐华锋
关键词:
RNA干扰
葡萄糖调节蛋白78
葡萄糖调节蛋白94
胃癌细胞
细胞凋亡
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